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    未成熟粒細(xì)胞在新生兒細(xì)菌性感染疾病診斷中的應(yīng)用價(jià)值

    2018-03-14 08:30:40張婭娟詹明華
    兵器裝備工程學(xué)報(bào) 2018年2期
    關(guān)鍵詞:參考值細(xì)菌性膿毒癥

    馬 科,張婭娟,李 潔,馮 博,詹明華

    (河北北方學(xué)院 a.附屬第一醫(yī)院檢驗(yàn)科; b.附屬第一醫(yī)院醫(yī)務(wù)處, 河北 張家口 075000)

    新生兒細(xì)菌性感染是臨床常見疾病,新生兒受細(xì)菌微生物感染引起炎癥反應(yīng),患兒可表現(xiàn)出發(fā)熱、腹瀉、肺炎、尿路感染等多種病癥,病情嚴(yán)重極易引發(fā)早期膿毒癥(early-onset sepsis,EOS),導(dǎo)致新生兒發(fā)病率、死亡率升高[1-4]。目前膿毒癥(sepsis)診斷的金標(biāo)準(zhǔn)為血培養(yǎng),但血培養(yǎng)方法受諸多因素限制臨床診斷陽性率低,檢驗(yàn)耗時(shí)長不能快速發(fā)出檢驗(yàn)報(bào)告。研究表明,低出生體重的膿毒癥患兒血培養(yǎng)陽性率僅為1.9%,早產(chǎn)或經(jīng)抗生素治療后的患兒血培養(yǎng)常出現(xiàn)錯(cuò)誤的陰性結(jié)果[5-6]。同時(shí)新生兒自身血容量少,多次進(jìn)行血培養(yǎng)檢驗(yàn)會(huì)造成患兒失血過多,加重病情發(fā)展并引發(fā)其他病癥。雖然臨床已開展中性桿狀核粒細(xì)胞計(jì)數(shù)(Band)、血漿降鈣素原(PCT)、白細(xì)胞介素6(IL-6)、C反應(yīng)蛋白(CRP)等多種檢測(cè)項(xiàng)目,對(duì)于膿毒癥的早期診斷和監(jiān)測(cè)依然缺乏有效的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)指標(biāo)。

    白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類檢測(cè)為新生兒常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目,在新生兒感染、膿毒癥疾病診斷中發(fā)揮著重要作用。白細(xì)胞通過調(diào)理吞噬作用清除體內(nèi)外來入侵的病原微生物,感染、膿毒癥可引起人體多個(gè)器官機(jī)能障礙并影響白細(xì)胞的吞噬作用,致使白細(xì)胞吞噬作用表現(xiàn)為增強(qiáng)、無變化或耐受,導(dǎo)致外周血中白細(xì)胞數(shù)量為升高、正常、甚至減低多種變化,使膿毒癥早期診斷治療面臨巨大挑戰(zhàn)[7-8]。近期研究發(fā)現(xiàn),檢測(cè)血液中未成熟粒細(xì)胞(immature granulocyte,IG)在炎癥、感染疾病的診斷中具有預(yù)示作用。正常健康人外周血中未成熟粒細(xì)胞(早幼粒細(xì)胞、中幼粒細(xì)胞、晚幼粒細(xì)胞)含量極低,人體受到病原微生物入侵時(shí)機(jī)體反應(yīng)性釋放未成熟粒細(xì)胞進(jìn)入外周血中。Emily L.Wiland等研究表明,成人和兒童靜脈血中未成熟粒細(xì)胞占白細(xì)胞總數(shù)比通常小于1%,在以往研究中發(fā)現(xiàn),成人未成熟粒細(xì)胞(IG#、IG%)的正常參考值范圍分別為:0~0.06(109/L),0~0.8%,新生兒未成熟粒細(xì)胞正常參考值范圍未見報(bào)道[9-11]。本研究應(yīng)用Sysmex XN-2000全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀檢測(cè)新生兒外周血未成熟粒細(xì)胞含量(IG#)及百分比(IG%),通過研究探討成人未成熟粒細(xì)胞正常參考值是否適用于新生兒,并分析未成熟粒細(xì)胞在新生兒細(xì)菌性感染疾病診斷中的作用,豐富實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)方法,為進(jìn)一步深入研究膿毒癥早期診斷提供檢驗(yàn)依據(jù)。

    1 檢測(cè)方法

    1.1 一般資料

    選取2017年1月至2017年6月間在河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院出生的新生兒93例,所有新生兒胎齡≥37周,其中非感染新生兒50例為非感染組,非感染新生兒為超過預(yù)產(chǎn)期出生的嬰兒或低出生體重兒,其中男26例,女24例;根據(jù)臨床癥狀及實(shí)驗(yàn)室檢查并由臨床醫(yī)生確診的細(xì)菌性感染新生兒43例為感染組,其中男21例,女22例。新生兒家屬對(duì)研究檢測(cè)的項(xiàng)目知情同意,符合本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)標(biāo)準(zhǔn)。

    1.2 儀器和試劑

    檢測(cè)白細(xì)胞(WBC)、未成熟粒細(xì)胞(IG#、IG%)選用Sysmex XN-2000全自動(dòng)血細(xì)胞分析及原廠配套生產(chǎn)試劑、質(zhì)控品;檢測(cè)血漿降鈣素原(PCT)選用北京熱景生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的UPT上轉(zhuǎn)發(fā)光免疫分析儀及配套試劑、質(zhì)控品;檢測(cè)C反應(yīng)蛋白(CRP)含量選用上海奧普生物醫(yī)藥有限公司生產(chǎn)的Ottoman C反應(yīng)蛋白檢測(cè)分析儀及配套試劑、質(zhì)控品。

    1.3 標(biāo)本采集與檢測(cè)

    新生兒出生48 h內(nèi)采集血液標(biāo)本,抽取2 mL靜脈血液標(biāo)本置于EDTA-K2抗凝管中檢測(cè)白細(xì)胞(WBC)、未成熟粒細(xì)胞(IG#、IG%)和C反應(yīng)蛋白(CRP)含量,抽取2ml靜脈血液標(biāo)本置于肝素鋰抗凝管中檢測(cè)血漿降鈣素原(PCT),標(biāo)本采集后2 h內(nèi)完成檢測(cè)。

    1.4 檢測(cè)未成熟粒細(xì)胞在新生兒細(xì)菌性感染疾病診斷中的作用

    選取非感染新生兒和細(xì)菌性感染新生兒檢測(cè)的白細(xì)胞(WBC)、未成熟粒細(xì)胞(IG#、IG%)、血漿降鈣素原(PCT)和C反應(yīng)蛋白(CRP)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,WBC、PCT、CRP參數(shù)數(shù)據(jù)使用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)分析,IG#和IG%參數(shù)數(shù)據(jù)使用非參數(shù)檢驗(yàn)(kruskal-wallis H檢驗(yàn))分析,比較非感染新生兒和細(xì)菌性感染新生兒之間檢測(cè)指標(biāo)差異。運(yùn)用受試者工作特征曲線(receiver operating characteristic curve,ROC曲線),計(jì)算IG#和IG%參數(shù)的曲線下面積(AUC),并分析檢測(cè)IG#和IG%診斷新生兒細(xì)菌性感染的靈敏度、特異性、約登指數(shù)等指標(biāo),探討檢測(cè)未成熟粒細(xì)胞在新生兒細(xì)菌性感染診斷中的應(yīng)用價(jià)值,分析成人未成熟粒細(xì)胞正常參考值是否適用于新生兒,為進(jìn)一步深入研究提供依據(jù)。

    1.5 數(shù)據(jù)整理與統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

    2 檢測(cè)結(jié)果

    感染組和非感染組新生兒血液IG#、IG%、WBC、PCT和CRP水平比較:細(xì)菌性感染新生兒血液中WBC、PCT含量均顯著高于非感染新生兒(P<0.01),IG#、IG%和CRP含量亦高于非感染新生兒(P<0.05),如表1所示。感染組43例血液標(biāo)本檢測(cè)的IG#、IG%范圍分別為0.01~0.90(109/L)和0.2%~5.7%,四分位數(shù)為0.20[0.08,0.50](109/L)和1.3[0.7,3.2]%,非感染組50例血液標(biāo)本檢測(cè)的IG#、IG%范圍分別為0.00~0.23(109/L)和 0.0%~1.9%,四分位數(shù)為0.05[0.02,0.11](109/L)和0.5[0.3,1.0]%,如圖1所示。非感染組新生兒血液標(biāo)本IG#含量超過0.06(109/L)的比值為44%,IG%超過0.8%的比值為40%。

    對(duì)感染組和非感染組新生兒血液IG#、IG%進(jìn)行受試者工作特征曲線分析,得出曲線下面積(area under the curve,AUC)分別為0.746、0.738,當(dāng)IG#和IG%參數(shù)cut-off值為0.12、1.15時(shí),敏感度為0.70、0.63,特異性為0.78、0.84,約登指數(shù)為0.48、0.47,陽性似然比為3.18、3.94,陰性似然比為0.38、0.44,如表2、圖2所示。

    表1 非感染新生兒和細(xì)菌性感染新生兒檢測(cè)指標(biāo)

    a) 與非感染組比較,P<0.01; b)與非感染組比較,P<0.05

    表2 未成熟粒細(xì)胞IG#及IG%參數(shù)值

    3 分析

    細(xì)菌感染已成為新生兒重癥監(jiān)護(hù)室患兒發(fā)病率和死亡率升高的重要原因,尤其是對(duì)早期膿毒癥(EOS)的診斷,由于現(xiàn)有的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)存在診斷陽性率低、特異性不高、檢驗(yàn)耗時(shí)較長等因素限制,為臨床膿毒癥的診斷及后期治療帶來了不便。本研究選用Sysmex XN-2000全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀檢測(cè)新生兒外周血未成熟粒細(xì)胞含量(IG#)及百分比(IG%),同時(shí)檢測(cè)白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)、C反應(yīng)蛋白(CRP)和血漿降鈣素原(PCT)炎癥檢測(cè)項(xiàng)目進(jìn)行比較,對(duì)未成熟粒細(xì)胞(IG#、IG%)作為新的炎癥檢測(cè)指標(biāo)在新生兒細(xì)菌性感染診斷中發(fā)揮的作用進(jìn)行分析。未成熟粒細(xì)胞(immature granulocytes,IG)包含早幼粒細(xì)胞(promyelocytes)、中幼粒細(xì)胞(myelocytes)和晚幼粒細(xì)胞(metamyelocytes),Sysmex XN-2000全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀依據(jù)幼稚細(xì)胞膜表面含有的脂質(zhì)成分較少,同時(shí)細(xì)胞核內(nèi)核酸含量高的特性,可選擇性的區(qū)分未成熟粒細(xì)胞和成熟細(xì)胞,通過檢測(cè)血液中細(xì)胞的前向散射光(FSC)、側(cè)向散射光(SSC)、側(cè)向熒光(SFL)等參數(shù)來準(zhǔn)確計(jì)數(shù)未成熟粒細(xì)胞含量[12-15]。

    感染組43例血液標(biāo)本檢測(cè)的IG#、IG%范圍分別為0.01~0.90(109/L)和 0.2%~5.7%,四分位數(shù)為0.20[0.08,0.50](109/L)和1.3[0.7,3.2]%,非感染組50例血液標(biāo)本檢測(cè)的IG#、IG%范圍分別為0.00~0.23(109/L)和 0.0%~1.9%,四分位數(shù)為0.05[0.02,0.11](109/L)和0.5[0.3,1.0]%。應(yīng)用ROC曲線評(píng)價(jià)檢測(cè)未成熟粒細(xì)胞(IG#、IG%)在新生兒細(xì)菌性感染疾病診斷中的作用,曲線下面積(AUC)分別為0.746、0.738,敏感度為0.70、0.63,特異性為0.78、0.84,約登指數(shù)為0.48、0.47,陽性似然比為3.18、3.94,陰性似然比為0.38、0.44,表明未成熟粒細(xì)胞(IG#、IG%)作為炎癥指標(biāo)診斷新生兒細(xì)菌性感染疾病的敏感性、特異性較高。從非感染新生兒和細(xì)菌性感染新生兒血液中IG含量分布比較可知,非感染組新生兒血液標(biāo)本IG#含量超過0.06(109/L)的比值為44%,IG%超過0.8%的比值為40%,推測(cè)成人未成熟粒細(xì)胞(IG#、IG%)的正常參考值范圍[IG#:0~0.06(109/L),IG%:0~0.8%]不適用于新生兒。由于受研究中檢測(cè)標(biāo)本數(shù)量的限制,還需要今后增加檢測(cè)病例數(shù)量,確立新生兒未成熟粒細(xì)胞的正常參考值。

    4 結(jié)論

    細(xì)菌性感染新生兒血液中未成熟粒細(xì)胞含量顯著高于未感染新生兒,成人未成熟粒細(xì)胞的正常參考值不適用于新生兒,檢測(cè)未成熟粒細(xì)胞可用于新生兒細(xì)菌性感染疾病的診斷。

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