不同病理類型結腸息肉與幽門螺桿菌之間的關系

李 東，趙衛(wèi)東

1.濱州醫(yī)學院臨床學院(煙臺校區(qū))，山東 煙臺 264000； 2.勝利油田中心醫(yī)院消化內科

幽門螺桿菌(Helicobacter pylori,H.pylori)在世界各地普遍流行，其感染率在歐洲約20%，南美洲約60%，亞洲約50%[1]。研究[2]統(tǒng)計顯示，2008年我國H.pylori感染率在城市為45.2%，農村為39%。H.pylori感染可能與結腸癌、結腸息肉的發(fā)病相關，但尚無定論。近年來，隨著生活水平的提高，我國結腸息肉的發(fā)病率呈上升趨勢，但其病因和發(fā)病機制尚不明確。ZUMKELLER等[3]就此對1991年至2002年的文獻進行了首次Meta分析發(fā)現(xiàn)，H.pylori感染與結腸癌及結腸腺瘤性息肉的發(fā)病可能相關，OR值為1.4。SOYLU等[4]用免疫組化方法在結腸腫瘤中檢測到了H.pylori的存在，這進一步印證了H.pylori與結腸息肉及結腸癌的發(fā)生可能有相關性。研究[5]顯示，H.pylori感染與結腸息肉有相關性，但目前對于不同病理類型的結腸息肉與H.pylori感染之間是否有一定的關系，研究較少。本研究主要應用嗜銀染色(Warthin-Starry，WS)法檢測H.pylori感染情況，相對有非侵入性的呼氣試驗和快速尿素酶檢測，WS染色法具有敏感性、準確性高，染出的H.pylori清晰度高的特點。應用χ2檢驗檢測各組之間是否存在一定關系，從而進一步指導臨床。

1 資料與方法

1.1一般資料收集2016年1月至2017年1月于勝利油田中心醫(yī)院行結腸鏡檢查的患者180例，切除結腸息肉，標本經病理學診斷后分為3組，其中腺瘤性息肉60例，炎性息肉60例，增生性息肉60例，同時收集結腸鏡檢查陰性患者60例，經患者同意后取微量標本檢測H.pylori感染情況作為對照組。所有患者均無家族性腺瘤性息肉病史，近4周未服用過抗生素、質子泵抑制劑或糖皮質激素、無H.pylori根除治療史、長期(>1個月)口服NSAID和炎癥性腸病及結腸癌病史，所有患者均沒有放化療及其他針對腫瘤的特殊治療。

1.2方法

1.2.1 標本收集：采用Olympus CF-290電子結腸鏡檢查，對發(fā)現(xiàn)結腸息肉患者予以描述鏡下息肉的部位、大小和數(shù)目，所有標本均經甲醛液體浸泡后送往病理科。

1.2.2 病理學組織檢測：組織固定后測定直腸息肉的大小，由經驗豐富的病理科醫(yī)師行病理組織學檢查確診息肉病理類型，進一步分為腺瘤性息肉、炎性息肉、增生性息肉。

1.2.3H.pylori毒力菌株抗體檢測：WS染色法試劑(硝酸銀、明膠、對苯二酚)，TB-718生物組織包埋機，Leica ST5020全自動組織脫水機，Olympus bx51顯微鏡，Anymicro DSS圖像采集系統(tǒng)。

1.2.4 WS染色法原理：利用生物組織成分對銀離子的還原性質不同，借助含銀離子顯影液中對苯二酚的還原顯影輔助作用，使不同組織部位銀離子密度不同，從而顯示從淺黃色到黑色不同的色彩，也顯示出不同組織部位中微生物和異物的形態(tài)。由于H.pylori具有嗜銀性，在一定條件下，H.pylori可以從銀液中吸附銀離子，后經孵育液中的顯色劑處理，H.pylori內已吸咐的銀離子被還原為黑色的金屬銀而顯色。

1.2.5 WS染色法步驟：(1)取15 ml蒸餾水加入浸銀液缸中，將脫蠟到水的石蠟切片用蒸餾水涮洗1次后放入染缸中，再分別取5 ml、10 ml的蒸餾水加入顯影液粉1、2瓶中。將以上浸銀液及顯影液共置于60 ℃溫箱中助溶(最少30 min)，完全溶解后取出備用；(2)將浸銀液缸內的液體全部倒掉，蒸餾水涮洗2次；(3)將顯影液1中液體倒入顯影液2中，快速搖勻后加入到浸銀液缸中顯影1～5 min(以組織呈咖啡色為宜)；(4)倒掉顯影液缸中的液體，蒸餾水涮洗2次；(5)脫水透明封片。

1.2.6 結果分析：光學顯微鏡下觀察，組織細胞的細胞漿為淺黃色或淺灰色，細胞核呈黑褐色，組織纖維為黑色至棕黃色，H.pylori呈現(xiàn)細膩而清晰的黑色S形、桿狀、海鷗狀、螺旋狀、球狀、短棒狀，聚居或散在出現(xiàn)。

1.2.7 細菌感染程度分級：H.pylori陰性：染色后樣本組織內無待檢細菌出現(xiàn)。H.pylori陽性：染色后樣本組織黏膜上皮表層及腺腔內見待檢細菌半定量如下：(+)輕度：黏膜上皮表層及腺腔內偶見陽性待檢細菌；(++)中度：黏膜上皮表層及腺腔內可見散在的陽性待檢細菌，未聚集成簇；(+++)重度：黏膜上皮表層及腺腔可見大量陽性待檢細菌，聚集成簇或片[6]。

1.3統(tǒng)計學方法采用SPSS 20.0軟件進行統(tǒng)計學分析，用Pearson和Fisher確切概率計算法行χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1各組基本特征及H.pylori感染情況統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)，息肉組和對照組的性別、年齡相比，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。息肉組H.pylori感染率顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

如表1所示，腺瘤性息肉組、對照組的H.pylori檢出率分別為81.67%、26.67%，兩組相比，差異有統(tǒng)計學意義(χ2=16.754，P<0.05)。

表1 腺瘤性息肉組與對照組一般資料及H.pylori感染情況比較Tab 1 Comparison of general data and H.pylori infection between the adenomatous polyp group and the control group

如表2所示，增生性息肉組、對照組的H.pylori檢出率分別為51.67%、26.67%，兩組相比，差異有統(tǒng)計學意義(χ2=4.787，P<0.05)。

如表3所示，炎性息肉組、對照組的H.pylori檢出率分別為50.00%、26.67%，兩組相比，差異有統(tǒng)計學意義(χ2=4.261，P<0.05)。

表2 增生性息肉組與對照組一般資料及H.pylori感染情況比較Tab 2 Comparison of general data and H.pylori infection between the hyperplastic polyp group and the control group

表3 炎性息肉組與對照組一般資料及H.pylori感染情況比較Tab 3 Comparison of general data and H.pylori infection between the inflammatory polyp group and the control group

2.2息肉亞組之間H.pylori感染率比較應用多樣本計數(shù)資料方差分析比較各組之間的差異情況顯示，腺瘤性息肉組H.pylori感染率(81.67%)明顯高于增生性息肉組(51.67%)和炎性息肉組(50.00%)，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；而后兩組之間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

3 討論

1994年,H.pylori被世界衛(wèi)生組織(WHO)列為胃癌一級致病因子，人群感染率約50%[7]。H.pylori感染現(xiàn)已成為一個全球性的問題，世界各國尤其是發(fā)展中國家感染率較大，平均感染率在50%以上。目前已證實，H.pylori感染與胃炎、消化性潰瘍、胃黏膜相關組織淋巴瘤、胃癌等疾病的發(fā)生、發(fā)展相關。而對于H.pylori感染與結腸息肉及結直腸癌的發(fā)病是否相關一直存在爭議。

近年來，隨著生活水平的提高，我國結腸息肉、結腸癌的發(fā)病率也呈上升趨勢，越來越趨向于年輕化，因此，在臨床中對于結腸息肉、結腸癌的研究迫在眉睫。H.pylori感染可能導致結腸息肉甚至結腸癌，主要是與胃泌素及環(huán)氧合酶2(Cyclooxygenase，COX-2)有關[8-10]。COX-2作為腫瘤相關基因，40%～90%的結腸腺瘤性息肉和90%結腸癌患者均存在COX-2的高表達。SOYLU等[4]用免疫組化方法在結腸腫瘤中檢測到了H.pylori的存在，這印證了H.pylori與結腸息肉及結腸癌的發(fā)生可能有關聯(lián)性。目前已有研究[11-12]表明，H.pylori感染可能與結腸腺瘤及結腸癌的發(fā)病有關，結腸癌的演化過程一般表現(xiàn)為“正常腸上皮→微小腺瘤→早期腺瘤→中期腺瘤→后期腺瘤→腺癌”，整個過程一般需5～15年，有研究[13]顯示，腺瘤性息肉轉變?yōu)榻Y腸癌的癌變率為1.4%～9.4%。近年來，H.pylori與結腸息肉的研究有了新的進展，顯示了結腸腺瘤性息肉患者的H.pylori感染率高，認為H.pylori的感染增加了結直腸腺瘤和腺癌的風險，增加了結腸癌發(fā)生的危險性，促進了腸黏膜增生。結腸腺瘤性息肉-結腸腺癌關系軸顯示它們之間的密切關系，研究結腸息肉發(fā)生的原因及危險因素，有助于結腸癌的預防和篩查，從而為臨床建議一個個體化的預防策略。

結腸息肉按病理學類型主要分為腺瘤性、炎性、增生性。對于這三種病理學類型息肉之間是否與H.pylori感染存在相關性，目前研究很少。以前的臨床研究多數(shù)是采用非侵入性的檢測方法(如尿素酶呼氣試驗、血清H.pylori抗體)或侵入性方法(活檢胃黏膜組織作快速尿素酶試驗或特殊染色)，主要是針對胃H.pylori感染情況的研究，沒有直接證據(jù)證明H.pylori定植于腸黏膜。國內的CHENG等[14]比較結直腸腺瘤性息肉組兒童與正常對照組兒童的H.pylori感染率，對腸活檢標本進行免疫組化染色分析，結果顯示，兩組H.pylori檢出率差異有統(tǒng)計學意義，提示H.pylori感染可能是結直腸腺瘤的一個危險因素。國外的SOYLU等[4]也運用免疫組化的方法，在結直腸腺瘤性息肉標本中檢測出H.pylori，并發(fā)現(xiàn)腺瘤組的H.pylori感染率比正常對照組要高，但統(tǒng)計學分析顯示兩者差異無統(tǒng)計學意義。上述研究證明了H.pylori確實可以在腸黏膜上定植，這為H.pylori可能是與腸黏膜通過局部作用誘發(fā)結直腸癌發(fā)生的理論提供了依據(jù)。本研究采用WS染色法直接檢測腸黏膜H.pylori感染率，進一步證實H.pylori感染與腺瘤性息肉存在相關性。從而證實簡便的H.pylori根除治療就可降低腺瘤性息肉的發(fā)生率進而降低大腸癌的發(fā)病風險，從而減少結腸癌的發(fā)生，降低診治成本，為腺瘤性息肉及結腸癌的防治帶來一種全新的方法。

綜上所述，H.pylori感染與腺瘤性息肉、增生性息肉及炎性息肉之間存在相關性，而腺瘤性息肉相對于炎性息肉、增生性息肉與H.pylori感染情況關系更為密切。腺瘤性息肉是結腸癌前病變的最常見形式，因此可推斷，在臨床中根除H.pylori感染對于預防腺瘤性息肉、結腸癌有一定作用。因標本數(shù)量有限，對于病理診斷為增生性息肉及炎性息肉的患者，雖然數(shù)據(jù)顯示與H.pylori感染存在相關性，但遠低于腺瘤性息肉，臨床中仍需進一步大量的臨床數(shù)據(jù)進行驗證。

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