晚期糖化終末產(chǎn)物在乳腺癌中表達(dá)及其臨床意義

彭偉 陳津 崔兆磊 蘇光建 肖振洲 陳燕

乳腺癌是女性最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，而轉(zhuǎn)移是乳腺癌患者死亡的主要原因。了解乳腺癌轉(zhuǎn)移的相關(guān)機(jī)制對(duì)于預(yù)防和治療乳腺癌轉(zhuǎn)移具有重要作用。新近研究發(fā)現(xiàn)糖尿病在腸癌、肝癌、前列腺癌等多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起作用[1-2]，AGEs高表達(dá)于糖尿病患者體內(nèi)，但有關(guān)AGEs與腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)的研究甚少。本研究采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)乳腺癌患者治療前血清AGEs的表達(dá)，分析其與乳腺癌臨床病理特征的關(guān)系，探討其在腫瘤發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中的作用機(jī)制及其在腫瘤治療方面的臨床意義。

1 材料和方法

1.1 研究對(duì)象

選取2016年7—11月在福建省腫瘤醫(yī)院新入院且接受正規(guī)治療的160例乳腺癌患者，同時(shí)選擇已確診的纖維腺瘤、腺病伴導(dǎo)管擴(kuò)張等乳腺良性疾病患者（30例）和健康人群（30例）。入組條件：（1） 首次發(fā)現(xiàn)乳腺癌患者； （2） 細(xì)胞學(xué)或病理學(xué)診斷的浸潤(rùn)性乳腺癌患者； （3） KPS評(píng)分≥60分；（4）未合并其它腫瘤。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并糖尿病病史、糖耐量受損及空腹受損的患者。按照以上標(biāo)準(zhǔn)，收集患者的姓名、性別、年齡、原發(fā)腫瘤大小狀態(tài)、區(qū)域淋巴轉(zhuǎn)移狀態(tài)[1988年美國(guó)癌癥研究委員會(huì)（AJCC）和國(guó)際抗癌聯(lián)盟（UICC）聯(lián)合制定的乳腺癌分期標(biāo)準(zhǔn)]、組織病理類型、治療前血清標(biāo)志物水平等臨床資料。

1.2 研究方法

血清AGEs水平檢測(cè)：所有患者入院空腹靜脈采血3～4 ml，靜置30 min，3 000 r/min離心5分鐘，分離血清，-80℃冰箱保存待測(cè)；采用上海酶聯(lián)生物科技有限公司試劑盒，酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)AGEs。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 乳腺癌患者血清AGEs水平

160例新入院的乳腺癌患者包括浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌（invasive ductal carcinoma，IDC）156例和浸潤(rùn)性小葉癌（invasive lobular carcinoma，ILC）4例，平均年齡為 （51.01±10.58）歲；30例乳腺良性疾病患者和30例健康對(duì)照人群平均年齡分別為（48.32±12.66）歲和（50.46±11.45）歲，與乳腺癌組均差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；三組每例患者均進(jìn)行血清AGEs檢測(cè)，乳腺癌組平均表達(dá)水平分別為（124.84±74.86）μg/ml，明顯高于乳腺良性疾病組[（102.11±42.83）μg/ml，P=0.039）]及健康對(duì)照組[（97.85±37.87）μg/ml，P=0.020）]，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.2 血清AGEs水平與各臨床病理特征的關(guān)系

根據(jù)不同病理特征分組分析發(fā)現(xiàn)：不同的患者年齡、病理類型間AGEs表達(dá)水平?jīng)]有明顯差異；AGEs表達(dá)水平與原始腫瘤大?。═）、雌激素受體（estrogen receptors，ER）、孕激素受體（progesterone receptors，PR）及原癌基因人類表皮生長(zhǎng)因子受體2（human epidermal growth factor receptor-2，Her-2）的表達(dá)水平?jīng)]有明顯關(guān)聯(lián)。在平衡年齡因素后發(fā)現(xiàn)，區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況（N）2-3級(jí)患者（137.72±86.65）μg/ml AGEs表達(dá)水平明顯高于N0-1級(jí)患者（117.51±66.76）μg/ml，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.025）；臨床分期Ⅲ～Ⅳ期患者（136.56±85.27）μg/ml AGEs表達(dá)水平明顯高于Ⅰ～Ⅱ期患者（117.81±67.49）μg/ml，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.045）。見(jiàn)表1。

3 討論

乳腺癌是女性最常見(jiàn)的惡性腫瘤，而轉(zhuǎn)移是乳腺癌患者死亡的主要原因。新近研究發(fā)現(xiàn)糖尿病在腸癌、肝癌等多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起作用[1-2]，AGEs高表達(dá)于糖尿病患者體內(nèi)，但有關(guān)其與腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)的研究甚少。本研究檢測(cè)乳腺癌患者治療前血清AGEs表達(dá)水平，發(fā)現(xiàn)血清AGEs的表達(dá)與區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況、臨床分期相關(guān)，提示AGEs在乳腺癌的侵襲和轉(zhuǎn)移中起作用。

AGEs是還原糖如葡萄糖的羰基與蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子通過(guò)非酶糖基化作用形成可逆產(chǎn)物Schiff堿和Amadori產(chǎn)物，后者再經(jīng)過(guò)一系列分子重排形成不可逆的聚合物，所產(chǎn)生的系列聚合物。已有研究發(fā)現(xiàn)AGEs在糖尿病及其并發(fā)癥、腎臟疾病等慢性疾病及衰老的病理機(jī)制中有重要的作用[3]。近年，越來(lái)越多的研究發(fā)現(xiàn)糖尿病在腸癌、肝癌等多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起作用[1-2]。DE等發(fā)現(xiàn)合并糖尿病的乳腺癌患者區(qū)域治療失敗時(shí)間（DFS）和總生存時(shí)間（OS）明顯短于未合并糖尿病的患者[4]；Hou等發(fā)現(xiàn)糖尿病是乳腺癌預(yù)后差的獨(dú)立危險(xiǎn)因子[5]，表明糖尿病參與了乳腺癌的病情進(jìn)展。

AGEs高表達(dá)于糖尿病患者體內(nèi)，而糖尿病在乳腺癌侵襲轉(zhuǎn)移中起作用，但有關(guān)AGEs在乳腺癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移中作用的研究鮮有報(bào)道。有研究[6]發(fā)現(xiàn)：AGEs促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231增殖，并通過(guò)上調(diào)表達(dá)基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）-9，使乳腺癌細(xì)胞侵襲和遷移能力增強(qiáng)；同時(shí)，Stratigoula等[7]的研究發(fā)現(xiàn)AGEs高表達(dá)于腸癌組織中，并且與腫瘤的病理分級(jí)相關(guān)，本研究結(jié)果顯示：在平衡年齡等因素后，160例新入院的乳腺癌患者平均表達(dá)水平分別為（124.84±74.86）μg/ml，明顯高于乳腺良性疾病組（102.11±42.83）μg/ml及健康對(duì)照組（97.85±37.87）μg/ml；進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)血清AGEs水平與患者區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況和臨床分期密切相關(guān)，區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況（N）2-3級(jí)患者（137.72±86.65）μg/ml AGEs表達(dá)水平明顯高于N0-1級(jí)患者（117.51±66.76）μg/ml，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；臨床分期Ⅲ-Ⅳ期患者（136.56±85.27μg/ml）表達(dá)水平明顯高于Ⅰ～Ⅱ期患者（117.81±67.49）μg/ml，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），與Stratigoula等的研究結(jié)果一致。

表1 血清AGEs水平與乳腺癌臨床病理特征的關(guān)系

本研究結(jié)果顯示AGEs在乳腺癌患者體內(nèi)表達(dá)增高，同時(shí)與乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移分級(jí)、臨床分期密切相關(guān)。AGEs在乳腺癌轉(zhuǎn)移中起作用的機(jī)制可能與其受體晚期糖化終末產(chǎn)物受體（RAGE，receptor of advanced glycation endproducts）有關(guān)。RAGE是細(xì)胞表面表達(dá)的免疫球蛋白超家族成員之一，表達(dá)于多種腫瘤細(xì)胞表面，通過(guò)與多種配體結(jié)合，參與腫瘤的分裂增殖、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移等多種生物學(xué)效應(yīng)[8-9]。Fuentes等[10]發(fā)現(xiàn)S100P/RAGE通過(guò)ERK磷酸化和NF-κB活化促進(jìn)腸癌細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移；Chen等發(fā)現(xiàn)[11]HMGB1/RAGE通過(guò)ERK/c-Myc 通路下調(diào)P21表達(dá)，使肝癌細(xì)胞表達(dá)基質(zhì)金屬蛋白酶MMM-2增多，參與肝癌進(jìn)展。

總之，AGEs在乳腺癌患者體內(nèi)表達(dá)增高，同時(shí)與乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移分級(jí)、臨床分期密切相關(guān)，可能在乳腺癌發(fā)生和轉(zhuǎn)移中起作用，有可能成為乳腺癌治療的新靶點(diǎn)。同時(shí)，AGEs高表達(dá)于糖尿病患者體內(nèi)，對(duì)于治療合并糖尿病的乳腺癌患者具有一定的臨床指導(dǎo)意義。在以后的研究中，我們將進(jìn)一步深入研究AGEs參與乳腺癌侵襲轉(zhuǎn)移的機(jī)制，以期為乳腺癌的臨床診斷、預(yù)后評(píng)估及治療等奠定實(shí)驗(yàn)及理論基礎(chǔ)。

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