AVE-562全自動糞便分析儀的臨床應(yīng)用評價

鮑蘊文， 顧孔珍， 徐克前

（1. 中山大學(xué)孫逸仙紀念醫(yī)院檢驗科，廣東 廣州 510120；2. 中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)檢驗系，湖南 長沙 410013）

糞便檢查是臨床“三大常規(guī)”檢查項目之一，對消化道疾病[1-3]和寄生蟲病[4]的診斷和鑒別診斷有重要作用。以前糞便檢查方法以手工鏡檢法為主，其生物安全風(fēng)險較高，且由于標本的特殊氣味和性狀，使操作者容易產(chǎn)生排斥心理。隨著檢驗儀器自動化的高速發(fā)展，越來越多的糞便自動檢測分析儀已經(jīng)應(yīng)用到臨床檢驗工作中，使糞便檢測變得簡單、易操作[5]，降低了生物安全風(fēng)險，也減輕了操作者的心理負擔。本研究以手工鏡檢法為金標準，分析AVE-562全自動糞便分析儀（簡稱AVE-562）糞便常規(guī)檢查結(jié)果；儀器自動糞便隱血（occult blood，OB）檢測與武漢康珠OB試紙條人工檢測進行比較，探討AVE-562的臨床應(yīng)用價值。

1 材料和方法

1.1 標本來源

收集2015年10月—2016年1月中山大學(xué)孫逸仙紀念醫(yī)院3 028份門診和住院患者的糞便標本。

1.2 儀器試劑

AVE-562及其配套試劑（長沙愛威科技公司），OB試驗人工檢測采用OB試紙條（武漢康珠公司，批號20150906）。

1.3 方法

每份糞便標本同時用手工鏡檢法和AVE-562進行檢測。手工鏡檢法按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第4版）[6]的要求操作，挑取糞便標本，生理鹽水懸液以看清報紙上字跡為宜，低倍鏡觀察10個視野以上，高倍鏡觀察20個視野以上。AVE-562按儀器說明書操作，將糞便標本按標準操作卡手工多點取樣置于標本采集處理器中送檢。門診患者糞便標本0.5 h內(nèi)檢查完畢，住院患者標本2 h內(nèi)檢查完畢。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 19.0軟件進行統(tǒng)計分析，手工鏡檢法和AVE-562 2種方法檢測結(jié)果的差異采用配對χ2檢驗，一致性采用kappa檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 AVE-562的OB檢測

AVE-562 自動檢測與OB試紙條手工法檢測糞便標本OB結(jié)果見表1。3 028份糞便標本經(jīng)上述2種方法檢測，陽性率分別為15.65%（474/3 028）和15.49%（469/3 028），二者一致率為97.85%[（439+2 524）/3 028]。

2.2 AVE-562的糞便常規(guī)檢測

AVE-562與手工鏡檢法檢測糞便標本常規(guī)檢測結(jié)果分別見表2～表6。以手工鏡檢法作為金標準，AVE-562檢測紅細胞（red blood cell，RBC）、白細胞（white blood cell，WBC）、寄生蟲蟲卵和脂肪球的敏感性分別為86.05%、80.95%、72.00%和91.89%；特異性分別為99.63%、99.80%、99.73%和99.86%；準確率分別為99.44%、99.54%、99.50%和99.67%；kappa值分別為0.810、0.827、0.703和0.930。

表1 AVE-562 自動檢測與武漢康珠OB試紙條手工檢測糞便標本OB的結(jié)果 （例）

表2 AVE-562與手工鏡檢法檢測糞便標本中RBC的結(jié)果

表3 AVE-562與手工鏡檢法檢測糞便標本中WBC的結(jié)果

表4 AVE-562與手工鏡檢法檢測糞便標本中寄生蟲蟲卵的結(jié)果

表5 AVE-562與手工鏡檢法檢測糞便標本中脂肪球的結(jié)果

表6 AVE-562檢測糞便標本性能評價 （%）

3 討論

糞便檢驗在消化道疾病的診斷及鑒別診斷中有重要意義，糞便檢驗包括理學(xué)、化學(xué)和顯微鏡檢查等。長期以來糞便顯微鏡檢查都由人工完成。隨著檢驗儀器自動化的高速發(fā)展，糞便顯微鏡檢查也逐漸由手工法過渡到自動分析法。自動分析法具有簡便快速、干擾因素少、高安全性以及智能化等優(yōu)點，可有效減輕操作人員勞動強度，極大提高實驗室工作效率和安全性。但與此同時，實驗室為保證檢驗結(jié)果的準確性[7-8]，亦需要對新儀器的臨床應(yīng)用價值進行評價。

AVE-562是由愛威科技公司自主研發(fā)的一款全自動糞便分析儀。該儀器按糞便常規(guī)檢驗經(jīng)典流程設(shè)計，具備以下特點：檢測流程全自動化，一站式完成理學(xué)檢查、OB卡檢測、顯微鏡檢查；使用糞便標本采集處理器全封閉式處理標本，無需人工干預(yù)，降低了生物安全風(fēng)險；標本采集處理器具有多觸點結(jié)構(gòu)可供多點取樣，螺旋槳設(shè)計保證混勻充分使病理成分富集；具有動態(tài)雙層濾網(wǎng)設(shè)計，可有效回收標本中的有形成分、集卵并防止堵塞，檢驗結(jié)果更準確；使用一次性計數(shù)板，防止堵塞和交叉污染；儀器自動對糞便外觀、檢測卡、顯微鏡下圖片拍照并自動判讀結(jié)果，圖片可供人工在電腦上復(fù)審可疑標本，無需再次涂片復(fù)查。

近年來，結(jié)直腸癌的發(fā)病率逐漸升高，篩查有助于結(jié)直腸癌的早發(fā)現(xiàn)、早診斷和早治療， 這是預(yù)防結(jié)直腸癌和降低結(jié)直腸癌病死率的重中之重，糞便OB試驗是篩查結(jié)直腸癌常用的方法[9-10]。AVE-562的OB試驗檢測流程全自動化，檢測卡結(jié)果由儀器自動識別，對儀器檢測結(jié)果存在疑問時，可通過審核儀器拍攝的檢測卡結(jié)果圖片對儀器自動判讀的結(jié)果進行復(fù)審。武漢康珠OB試紙條為手工檢測，人工判斷結(jié)果。在3 028份糞便標本中，有65份糞便標本檢測結(jié)果不符，其中OB試紙條陽性、AVE-562自動檢測陰性的有30份，武漢康珠OB試紙條陰性、AVE-562自動檢測陽性的有35份。2種檢查方法結(jié)果不符合的可能原因為：標本挑取位置與量不同（手工法一般挑取少許標本進行稀釋檢測，儀器法取0.5 g左右糞便標本稀釋混勻過濾后加樣至檢測卡進行檢測）；稀釋倍數(shù)不同（手工法1倍左右，儀器法10倍以上）；OB卡廠家提供的膠體金卡敏感性有差異（0.1 μg/mL和0.2 μg/mL）；檢測卡反應(yīng)時間有差異（武漢康珠OB試紙條為人工記錄結(jié)果，反應(yīng)時間不一定控制得精準，AVE-562為儀器設(shè)定的固定時間）；OB卡廠家提供的膠體金卡本身穩(wěn)定性有部分問題；不同人員對于弱陽性的判斷有差異。

AVE-562自動檢測RBC的陽性率高于手工鏡檢法，結(jié)果不相符標本中手工鏡檢法陽性、儀器法陰性的有6份，手工鏡檢法陰性、儀器法陽性的有11份。2種方法結(jié)果差異的可能原因為：標本挑取位置與量不同（手工鏡檢法一般是挑取少許標本進行涂片檢測，儀器法取0.5 g左右稀釋混勻過濾后充池到25 μL的計數(shù)板進行檢測）；觀察方法不同（手工鏡檢法看10個以上視野，儀器法檢測視野數(shù)最少10個，最多可達200個，本實驗設(shè)置視野數(shù)為40個）；受食物殘渣影響，儀器可能將糞便微顆粒判斷為RBC，導(dǎo)致陽性率偏高，可通過人工審核儀器拍攝的鏡下實景圖對錯判目標進行糾正后發(fā)出報告。

與OB試驗結(jié)果對照，儀器法和手工鏡檢法RBC的陰性率均偏高，可能原因為RBC易被消化破壞，因而在顯微鏡下不能觀察到而OB試驗可檢出。臨床應(yīng)用的OB試驗主要有化學(xué)法和免疫法2種，但化學(xué)法易受糞便中血紅蛋白的多少、過氧化氫的濃度、標本觀察時間、標本量、食物及藥物等多種因素的影響，容易出現(xiàn)假陽性和假陰性[11]。本研究采用膠體金抗體檢測法，不易受其他藥物、鐵劑、動物血等干擾，具有快速、方便、敏感性高和特異性強等優(yōu)點。

AVE-562自動檢測WBC、寄生蟲蟲卵和脂肪球的準確率高，敏感性和特異性好。WBC假陰性（19.05%）與同類儀器相比有明顯下降[12]，與手工鏡檢法有良好的一致性（kappa=0.827）。寄生蟲蟲卵檢查與手工鏡檢法有較好的一致性（kappa=0.703）。淀粉顆粒和真菌假陽性較低，可能為儀器將糞便微顆粒誤判斷為淀粉顆粒和真菌，發(fā)報告前可通過人工審核儀器拍攝的鏡下實景圖予以糾正。

通過評價儀器的綜合性能，我們發(fā)現(xiàn)AVE-562為糞便檢測提供了一種新方法，有較高的臨床應(yīng)用價值。

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