廣東省汕頭市潮陽區(qū)中山東路潮陽第一中學(xué) 趙志豐
這個(gè)實(shí)驗(yàn)存在的問題是,把過濾液收集到試管用棉塞塞緊,濾液會(huì)分層,上層色較淡,色素較少,做實(shí)驗(yàn)效果差一些,色素層淡,看不清,易消失;畫濾液細(xì)線要用下層濾液。
第一,可以用新儀器研磨過濾器代替試管,粗濾液可以在研磨過濾器中再研磨,繼續(xù)浸泡提取色素,保存濾液,濾液顏色深,色素多,有利于提高實(shí)驗(yàn)效果。研磨過濾器單獨(dú)來做實(shí)驗(yàn),就是研磨作用有限,研磨桿易梗塞,掉落濾網(wǎng)罩,一些學(xué)生容易把材料裝錯(cuò)了,裝入研磨桿中,使材料研磨不著。研磨過濾器使用方法要詳細(xì)講解和演示,它是反向過濾的;還有一點(diǎn)要注意的:研磨過濾器用水洗后,容易積水在里面,洗后要抖去研磨桿里的水,實(shí)驗(yàn)后要把底座(外套筒)與研磨桿分開晾干;連續(xù)兩節(jié)課間,把研磨過濾器的濾液及葉泥倒掉,刮干凈就可以了再用。避免學(xué)生把過濾液放在燒杯(層析用的)中,層析前,又要把燒杯洗干凈,燒杯壁上有水,會(huì)嚴(yán)重影響到層析的效果。
第二,藥品、材料用量,二氧化硅(細(xì)沙)、碳酸鈣粉末用量1/3或1/4藥勺,菠菜、無水乙醇的量減半,即菠菜葉2.5g,無水乙醇5mL,研磨起來不會(huì)太費(fèi)勁,易充分研磨,耗時(shí)少一些,濾液足夠用,濾液不致太稀。層析液中的苯不可省略,苯有助于胡蘿卜素的層析,層析后出現(xiàn)四條色素帶。只含有石油醚丙酮的層析液,層析的結(jié)果是:上面是淺色素帶,無法正常分層。最好使用層析液原配方。
第三,注意濾紙條的干燥;印濾液細(xì)線后及時(shí)用電吹風(fēng)吹干,第一次畫濾液細(xì)線,細(xì)線可能擴(kuò)散,及時(shí)干燥再劃線就不易再擴(kuò)散了。濾紙條放在桌面要防止弄濕,研缽使用后,水洗之后,擦干再倒扣晾干;層析用的燒杯不要裝過濾液,要保持干凈,層析后,把層析液回收,燒杯加蓋不要水洗,避免水分對層析的不良影響;燒杯壁有水珠要及時(shí)用紙巾擦干。
第四,層析燒杯上蓋板的使用,有助于濾紙條的安放及防止層析液的揮發(fā)。蓋板可以用鋁塑板制作,切割成小段長方形,兩片鋁塑片蓋在100mL燒杯上,中間的縫就可以插入濾紙條,濾紙條在適當(dāng)高度(7cm左右相當(dāng)于燒杯底到鋁塑片上的距離)折一個(gè)直角,放入燒杯里進(jìn)行層析,就不會(huì)移動(dòng)了,比較穩(wěn)定。
這個(gè)實(shí)驗(yàn)是高中生物較難做的實(shí)驗(yàn),因?yàn)槭秋@微裝片的制作,觀察的是分裂期細(xì)胞中的染色體,較細(xì)微,在低倍鏡下,要仔細(xì)觀察,才能找到,分裂期較短,分裂期細(xì)胞所占比例較小,這些增加了實(shí)驗(yàn)難度,還有,統(tǒng)編教材中,實(shí)驗(yàn)材料,實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)也存在一些不足和缺點(diǎn),第一,通過一些實(shí)驗(yàn)探究,0.01g/mL龍膽紫染色液濃度太高(室溫20度左右),一半(0.005g/mL)也較高,0.002g/mL龍膽紫染色液染2.5~3min,比較合適。第二,還有洋蔥根要長到5cm才剪根尖,時(shí)間太長,長1至2cm就可以剪了,這時(shí)細(xì)胞的生長分裂也較快,洋蔥的根經(jīng)常不夠用,用大蒜代替;有條件的話,最好把根預(yù)處理一下,如大蒜的根長到1至2cm時(shí),把大蒜和培養(yǎng)皿一起轉(zhuǎn)入冰箱冷藏,幾小時(shí)或十幾小時(shí),讓細(xì)胞分裂停頓下來,提高分裂細(xì)胞的比例。第三,根解離后,根尖生長點(diǎn)細(xì)胞容易分散、丟失,染色前,根尖最好要用鑷子或蓋玻片壓兩下,使根尖展開,有利于均勻染色,有利于根尖里面的分裂細(xì)胞的染色體的染色,因此染色最好在載玻片上進(jìn)行;以免染色后的根尖,分不清生長點(diǎn),還是成熟區(qū),不慎夾到生長點(diǎn),把分生組織夾碎,或已經(jīng)壓散的根尖不便于轉(zhuǎn)移,組織碎片容易丟失在培養(yǎng)皿的溶液中或被吸水紙吸走;減少分生組織、分裂細(xì)胞,容易導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失??;第四,用手指按壓分散細(xì)胞,多數(shù)情況下,分散不開,對染色體的觀察不利,還需要用震動(dòng)來分散。在臨時(shí)裝片的蓋玻片一側(cè)加1、2滴水,過一分鐘后,蓋上塑料片,再用手指或鉛筆木頭端輕輕敲擊,要用“輕功”,用輕巧、輕微的力道,有利于細(xì)胞分散,又不易損壞玻片,蓋玻片易碎,多敲擊,要它不碎,確實(shí)很難說。但適當(dāng)?shù)那脫粲欣诩?xì)胞的分散展開,有利于染色體的觀察。另外,可以同時(shí)用兩條根尖制作一個(gè)裝片,不過兩個(gè)根尖要分開0.5cm以上,細(xì)胞才不會(huì)太密集。
如果用改良苯酚品紅染色,預(yù)先把解離漂洗后的根尖,直接轉(zhuǎn)入品紅染液中染色十幾小時(shí),制作裝片時(shí),用過濾網(wǎng)把根尖濾出,再轉(zhuǎn)入稀醋酸溶液或2%葡萄糖溶液中,防止根尖細(xì)胞吸水膨脹,根尖分叉裂開,引起組織碎片的丟失。用這種染液染色,染色效果好,分裂相較清晰,只要根尖細(xì)胞生長較旺盛,粗壯,有分裂的細(xì)胞,制片技術(shù)過關(guān),多數(shù)能找到分裂的細(xì)胞。有時(shí)候,根尖染色的時(shí)間過久,轉(zhuǎn)入清水時(shí)間久,不易分散開時(shí),可以再用1/2濃度的鹽酸解離液處理2~3min,漂洗5~8min,再制作裝片,則細(xì)胞易分散開,染色體清晰可見,間期染色深的細(xì)胞核有些脫色,但不會(huì)影響分裂細(xì)胞的觀察。制作成功的臨時(shí)裝片,需要一些時(shí)間,還要耐心找,因此好的裝片要保存起來,可以用甘油來保存,有保水作用。方法是:在裝片的蓋玻片一側(cè)加一小滴甘油,不能加太多,避免吸水多,蓋玻片浮起移位。把裝片放入培養(yǎng)皿中,加少量清水,不漫過載玻片,蓋上培養(yǎng)皿蓋,放入冰箱冷藏室保存,可以使用幾天,進(jìn)行演示教學(xué)。
學(xué)生分組實(shí)驗(yàn)的成功率與多種因素有關(guān),藥品及儀器設(shè)備、選材,實(shí)驗(yàn)的方法步驟(一些實(shí)驗(yàn)可能一個(gè)關(guān)鍵步驟失誤了,滿盤皆輸),師生的素質(zhì)及操作能力等等有關(guān),教師和實(shí)驗(yàn)員勇于創(chuàng)新,從實(shí)際出發(fā),不唯書,在實(shí)驗(yàn)教學(xué)中,做一個(gè)有心人,發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)過程的一些失誤,及時(shí)糾正,對于提高實(shí)驗(yàn)的成功率有大的作用,如果漠視這些失誤,則實(shí)驗(yàn)成功率會(huì)下降,一些難的實(shí)驗(yàn)會(huì)難上加難??傊瑢?shí)驗(yàn)教學(xué)要引起足夠重視,它能提高學(xué)生的動(dòng)手實(shí)踐能力,有利于學(xué)生的素質(zhì)教育;要投入,要用心去做,不要輕言放棄,難做的實(shí)驗(yàn)也會(huì)做好。