甲硝唑凝膠的皮膚安全性實(shí)驗(yàn)研究

王璐茜，張昦昉，王鈞，盧海霞，姚春濤

（吉林省藥品檢驗(yàn)所，吉林 長春 130033）

引言

甲硝唑是常用的抗厭氧菌藥物，通常用于治療炎癥性丘疹、膿皰瘡、酒渣鼻紅斑的局部皮膚用藥，為了評價(jià)甲硝唑凝膠局部用藥的安全性，對甲硝唑凝膠局部應(yīng)用對皮膚有無刺激性、皮膚過敏性進(jìn)行了初步考察，為臨床用藥提供依據(jù)[1]。

1 資料與方法

1.1 一般資料

動物：健康白色家兔：雌雄兼用，體重2.0-2.5 kg。來源：長春生物制品研究所。健康白色豚鼠：雌雄兼用，體重250-350 g。來源：山東泰邦生物制品有限公司。試驗(yàn)前動物均在實(shí)驗(yàn)動物房環(huán)境中適應(yīng)7 日。常規(guī)飼料，不限制飲水。

藥物：甲硝唑凝膠（吉林一正藥業(yè)集團(tuán)有限公司），甲硝唑凝膠陰性樣品（吉林一正藥業(yè)集團(tuán)有限公司），2,4-二硝基氯苯（天津光復(fù)精細(xì)化工研究所），95%乙醇（北京化工廠）

1.2 方法

皮膚刺激性試驗(yàn)：甲硝唑凝膠說明書中未說明本品不得用于皮膚潰破處，所以我們考察了甲硝唑凝膠對正常皮膚及破損皮膚的刺激性。

取12 只長耳白家兔，隨機(jī)分為正常皮膚組及破損皮膚組，每組6 只。正常皮膚組及破損皮膚組每只家兔左側(cè)給藥區(qū)涂布甲硝唑凝膠陰性樣品0.5 g、右側(cè)給藥區(qū)涂布甲硝唑凝膠0.5 g。

于實(shí)驗(yàn)開始前24 小時，將家兔家兔脊柱兩側(cè)用電推去毛，每側(cè)去毛范圍為（3 cm×3 cm）。破損皮膚組家兔在用藥部位用12 號針尖劃“井”以滲血為度。采用同體左右側(cè)自身對照法，每只家兔左側(cè)給藥區(qū)涂布甲硝唑凝膠陰性樣品0.5 g、右側(cè)給藥區(qū)涂布相同體積的甲硝唑凝膠供試品，然后用二層紗布（3 cm×3 cm）和一層玻璃紙覆蓋，用無刺激膠布固定。敷貼4h 后用溫水清潔給藥部位。每日一次，連續(xù)14 d，每日觀察敷貼前、敷貼后1 小時及末次敷貼后24、48、72 h 家兔背部給藥區(qū)皮膚有無紅斑、水腫、色素沉著、出血點(diǎn)、皮膚粗糙、皮膚菲薄等情況。

Buehler（BT）試驗(yàn)：經(jīng)過預(yù)實(shí)驗(yàn)，甲硝唑凝膠選用0.2 g/只為誘導(dǎo)及激發(fā)劑量，稱取0.1 g 2,4-二硝基氯苯，加95%熱乙醇2 ml 溶解，再加純化水稀釋至10 ml 混勻，制成1%的2,4-二硝基氯苯溶液作為陽性藥溶液選用0.2 ml/只為誘導(dǎo)及激發(fā)劑量。

取健康豚鼠40 只，體重250-350 g，隨機(jī)分為3 組，陰性和陽性對照組各10 只、供試品組20 只。于實(shí)驗(yàn)開始前24 h，將豚鼠背部面積為（2 cm×2 cm）的給藥區(qū)進(jìn)行脫毛并標(biāo)號稱重。第0、7 和14 d，供試品組每只涂布供試品0.2 g；陽性對照組同法涂布1%的2,4-二硝基氯苯溶液；陰性對照組同法涂布甲硝唑凝膠陰性樣品；并用封閉片局部固定6 小時，然后用溫水清潔給藥部位并觀察1-24 h 后動物有無過敏反應(yīng)癥狀。第27 d 稱重后，供試品組每只在未給藥的肋腹部（于實(shí)驗(yàn)前1 日進(jìn)行面積為（2 cm×2 cm）的脫毛處理）涂布供試品0.2 g；陽性對照組同法涂布1%的2,4-二硝基氯苯溶液；陰性對照組同法涂布甲硝唑凝膠陰性樣品；采用封閉片局部固定6 h，然后用溫水清潔給藥部位并觀察24-48 h 后動物有無過敏反應(yīng)癥狀。

2 結(jié)果與分析

2.1 皮膚刺激性試驗(yàn) 按照《藥物研究技術(shù)指導(dǎo)原則》[2]皮膚刺激性試驗(yàn)規(guī)定進(jìn)行評價(jià)，按下列公式計(jì)算每天每只動物平均積分，觀察結(jié)果見表1，甲硝唑凝膠對家兔正常皮膚及破損皮膚均無刺激性。

表1 甲硝唑凝膠皮膚多次皮膚刺激性試驗(yàn)結(jié)果

2.2 Buehler（BT）試驗(yàn) 按照《藥物研究技術(shù)指導(dǎo)原則》[2]皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)規(guī)定進(jìn)行評分及皮膚過敏性強(qiáng)度評價(jià)，給予豚鼠甲硝唑凝膠未見皮膚過敏反應(yīng)，給予豚鼠陽性對照藥表現(xiàn)為極強(qiáng)致敏反應(yīng)。

3 結(jié)論與討論

甲硝唑凝膠連續(xù)多次給藥試驗(yàn)中家兔正常皮膚對凝膠未見紅斑與水腫，而破損皮膚僅在最初幾天出現(xiàn)輕微紅斑，并且隨著試驗(yàn)天數(shù)增加逐漸恢復(fù)，在第3 天家兔皮膚均已正常無紅斑，總體評分甲硝唑凝膠對正常皮膚及破損皮膚均無刺激性；皮膚過敏試驗(yàn)（BT 法）中，甲硝唑凝膠與陰性樣品的豚鼠皮膚均未見紅斑與水腫，而陽性對照組均有不同程度的紅斑水腫情況，總體評分甲硝唑凝膠未引起豚鼠的皮膚過敏反應(yīng)。綜上所述，甲硝唑凝膠在正常皮膚和破損皮膚上均可使用，用于局部給藥是一種較為安全的治療藥物。