納豆+甘麥大棗加味湯對氣虛血瘀證大鼠血液流變學(xué)和凝血功能的影響

李雅君，程嘉藝

（遼寧中醫(yī)藥大學(xué)，沈陽 110032）

氣虛血瘀證是血瘀證常見的一種臨床癥狀，存在于諸多疾病的不同病理階段和病程，病因復(fù)雜，常見于老年人心腦血管疾病，隨著近年來，我國老齡化日益嚴(yán)重，防治老年人氣虛血瘀證刻不容緩[1-2]。甘麥大棗湯出自醫(yī)圣張仲景的《金匱要略》，該方由3味藥食同源中藥甘草、小麥和大棗組成，主要治療婦人臟躁等疾病[3]，“朱氏婦科”[4-5]第三代傳人朱南孫教授認(rèn)為，甘麥大棗湯能養(yǎng)心安神，補益脾腎之氣。本文在原方3味藥中加入姜黃、當(dāng)歸、人參、山藥、山楂等補氣活血化瘀藥食同源中藥。使各味中藥相互配伍，增強補血益氣的作用。本實驗通過觀察納豆+甘麥大棗加味湯對氣虛血瘀證大鼠血黏、凝血4項等指標(biāo)的影響，為甘麥大棗加味湯益氣活血化瘀的研究提供一定的實驗依據(jù)。

1 材料

1.1 動物 SPF級Wistar大鼠70只，雌雄各半，體質(zhì)量（200±20） g，購于本溪長生生物有限公司，合格證號：SCXK（遼）2015-0001。

1.2 藥品與試劑 PT測定試劑盒（批號R6007），APTT測定試劑盒（批號R4007），F(xiàn)ib測定試劑盒（批號R6011），TT測定試劑盒（批號546768）。戊巴比妥鈉由遼寧中醫(yī)藥大學(xué)實驗室提供（批號1021N038），檸檬酸鈉抗凝管（許可證編號，湘食藥監(jiān)械生產(chǎn)許20150049）。肝素鈉抗凝管（許可證號，冀食藥監(jiān)械生產(chǎn)許20100418）。

1.3 主要儀器 半自動血液流變儀LBY-N6K，北京普利生儀器有限公司；Sysmex CA510型全自動血凝分析儀，日本Sysmex株式會社。

1.4 供試品溶液制備 甘麥大棗加味湯（人參、當(dāng)歸、大棗、姜黃、甘草各10 g，淮小麥20 g，山藥、炒山楂各15 g），各味藥材加入10倍量水，浸泡30 min，加熱回流煎煮2次，1 h/次，濾過，合并煎煮液，濃縮至100%濃度，放至冰箱4 ℃冷藏備用。補陽還五湯煎煮方法與甘麥大棗加味湯相同，以上藥材購于遼寧眾意愿大藥房，藥材經(jīng)遼寧中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定室翟彥君教授鑒定符合2015年版《中國藥典》1部相關(guān)項要求。納豆粉購于遼寧天潤生物技術(shù)有限公司，使用時用溫水沖開。

2 方法

2.1 分組及給藥 將雌雄各半的70只Wistar大鼠按照體質(zhì)量隨機分成7組，即空白組，模型組，陽性藥組14.0 g生藥/kg，納豆＋甘麥大棗加味湯高劑量組（1.875＋12.5 g）生藥/kg、中劑量組（1.875＋6.25 g）生藥/kg、低劑量組（1.875＋3.125 g）生藥/kg，納豆組1.875 g納豆/kg，造模時，除空白組正常飲食飲水外，其余各組每天將大鼠放入水溫14～16 ℃，水深（35±5）cm，直徑為50 cm的水桶中進(jìn)行游泳，以每組大鼠自然沉降沒入水中5s-1不能自主上浮為其疲憊標(biāo)準(zhǔn)，當(dāng)全組有50%出現(xiàn)自然沉降時，全組停止游泳撈出，使之暴露于空氣中自然晾干[6]，除正常組外，其余各組大鼠按照40 g/（kg·d）[7]提供飼料，灌胃給藥1次/d，連續(xù)60 d，取血前大鼠禁食24 h，不禁水，每10 d測定體質(zhì)量1次。

2.2 血流變指標(biāo)測定 取血前用戊巴比妥鈉30 mg/kg麻醉，腹主動脈取血，2 mL測定全血黏度，取3 mL以3 000 r/min，離心15 min，測定血漿黏度。

2.3 凝血4項測定 腹主動脈取血2 mL以3 000 r/min，離心15 min，分離血漿，按照凝血4項試劑盒說明書進(jìn)行。

2.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件處理所得到的數(shù)據(jù)，選用one-wayANOVA進(jìn)行統(tǒng)計處理，數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 大鼠造模前后表征及體質(zhì)量變化比較 見表1。

表1 大鼠造模前后表征及體質(zhì)量變化比較（x± s，n = 10） g

3.2 對大鼠血液流變學(xué)指標(biāo)的影響 見表2。

3.3 對大鼠凝血功能的影響 見表3。

表2 對大鼠血液流變學(xué)指標(biāo)的影響（x± s，n = 10）

表3 對大鼠凝血功能的影響(x± s ，n = 10）

4 討論

中醫(yī)認(rèn)為，氣為血之帥，氣行則血行，氣虛則不能推動血液正常的運行，導(dǎo)致血瘀，氣虛血瘀是血瘀證常見的一種類型。血液流變學(xué)、凝血功能是判別血瘀證的一項重要指標(biāo)[8]，陳可冀[9]院士從臨床治療學(xué)角度，根據(jù)血液流變學(xué)的變化將血瘀證分為血瘀證Ⅰ型和血瘀證Ⅱ型，大多數(shù)血瘀證可以歸為Ⅰ型，主要表現(xiàn)為高血黏、高纖維蛋白原血癥、高血栓素水平，即血液“濃”“黏”“凝”“聚”，有血栓栓塞疾病的傾向。血瘀證Ⅱ型，部分疾病屬于這一類型，主要表現(xiàn)為血液黏度低、血漿蛋白等有形成分不足，或者某一凝血功能不足等，常見貧血癥、部分月經(jīng)病、肝硬化等。本實驗的造模結(jié)果為氣虛血瘀組血液黏度低（P＜0.01）、纖維蛋白原等凝血因子顯著不足（P＜0.01），與龐樹玲[6]、王晚霞[10]等實驗結(jié)果基本一致。本文采用饑餓和力竭游泳復(fù)合因素方法造模，《靈樞·五味篇》曰：“谷不入半日則氣衰，一日則氣少矣，”后天來源長時間不足，氣血生化之源匱乏，低溫刺激，寒邪入體內(nèi)，血流不暢，勞則耗氣，過度疲勞，正氣損傷。符合中醫(yī)氣虛血瘀致病因素。

血液的高切黏度反映的是紅細(xì)胞的變形能力對血液黏度的影響，低切反映的是紅細(xì)胞的聚集力對血液黏度的影響，而中切處于二者之間[11]。血液中的紅細(xì)胞含量減少會使血液黏度下降[12]。大部分血瘀呈“濃”“黏”“凝”“聚”，部分血瘀證會出現(xiàn)低凝、低黏或者更復(fù)雜的狀態(tài)，血液低凝低黏狀態(tài)不能代表血行通暢?，F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，在疾病的某些階段，機體的凝血與抗凝過程發(fā)生紊亂，凝血酶增多，凝血系統(tǒng)、血小板被激活，血液凝固性增高，血小板聚集，體內(nèi)微循環(huán)中有廣泛的微血栓生成，導(dǎo)致凝血因子大量的消耗，繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)而出現(xiàn)低凝、低黏及出血癥狀[13-14]，本研究未見出血，但實驗的氣虛血瘀模型組全血黏度高切、中切、低切和纖維蛋白原等凝血因子均明顯降低（P＜0.01）。本實驗給藥后，納豆+高、中劑量組在高切和中切的切變率下血液黏度、Fib含量顯著升高（P＜0.05），具體機制需進(jìn)一步研究。

凝血酶原時間（PT）是檢測機體外源性凝血系統(tǒng)，PT的延長反映凝血因子Ⅶ、Ⅹ、Ⅴ、Ⅱ 和Ⅰ的含量降低；APTT檢測機體的內(nèi)源性凝血系統(tǒng)，APTT降低反應(yīng)凝血因子Ⅻ、Ⅺ、Ⅴ、Ⅱ和Ⅰ的含量升高[15]，在臨床上，血瘀證是一個復(fù)雜的病證，由于患病的程度和時間不同，同一機體中，可能同時存在血瘀證Ⅰ型和血瘀證Ⅱ型，本研究中，氣虛血瘀模型組大鼠PT延長，APTT降低，各個給藥組給藥后PT含量顯著下降（P＜0.01），而對APTT無任何改善，納豆+甘麥大棗加味湯對外源性凝血系統(tǒng)有顯著效果，但對內(nèi)源性凝血系統(tǒng)效果不佳。

甘麥大棗加味湯中，人參大補元氣，當(dāng)歸補血，小麥養(yǎng)心安神，除煩，大棗補氣安神，山藥補脾肺氣，姜黃活血化瘀，山楂祛瘀，甘草調(diào)和諸藥，諸藥配伍，具有補氣活血化瘀，治標(biāo)亦治本?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，人參[16]中的人參皂甙能促進(jìn)造血干細(xì)胞增殖分化，改善低黏狀態(tài)的血液黏度；當(dāng)歸[17]中的當(dāng)歸多糖能夠升高全血黏度，增強紅細(xì)胞聚集性；山楂[18]中的黃酮能夠直接擴張外周血管，增加血流量。本實驗結(jié)果證明，納豆+甘麥大棗加味湯可以改善大鼠血液低黏、低凝狀態(tài)，表明納豆+甘麥大棗加味湯對氣虛血瘀具有很好的補氣化瘀的作用。

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