凝聚胺法與微柱凝膠法交叉配血陽性結(jié)果研究

豐強(qiáng)

[摘要] 目的 研究凝聚胺法與微柱凝膠法交叉配血陽性結(jié)果。方法 方便選擇申請(qǐng)輸血患者2 000例，選擇時(shí)間：2016年3月—2017年3月，所有供血者均為無償獻(xiàn)血者，均按照《輸血技術(shù)學(xué)》、產(chǎn)品說明書中所規(guī)定的操作流程進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作，急診進(jìn)行凝聚胺法配血，其他配血類型則采用微柱凝膠法。比較記錄凝聚胺法與微柱凝膠法交叉配血陽性結(jié)果。結(jié)果 凝聚胺法操作耗時(shí)（12.09±2.11）min低于微柱凝膠法（32.22±2.31）min，但微柱凝膠法的陽性標(biāo)本檢出率（90.00%）均高于凝聚胺法（50.00%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=38.10、t=64.34、P=0.00）。結(jié)論 微柱凝膠法具有較高的敏感性，但操作耗時(shí)較長(zhǎng)，并不適合應(yīng)用于急診配血過程中；而凝聚胺法相對(duì)更為快速，但存在一定的漏檢率，適合應(yīng)用于急診配血過程中。

[關(guān)鍵詞] 凝聚胺法；微柱凝膠法；交叉配血；陽性結(jié)果

[中圖分類號(hào)] R457 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-0742（2018）11（b）-0179-03

Study on Crossmatching Positive Results of Polybrene and Microtubes Gel Test

FENG Qiang

Department of Blood Transfusion， Xiamen Fifth Hospital， Xiamen， Fujian Province， 361100 China

[Abstract] Objective To research the crossmatching positive results of polybrene and microtubes gel test. Methods 2 000 cases of blood transfusion patients were convenient selected from March 2016 to March 2017， and all blood donors were the voluntary blood donation， and the patients were for experimental operation according to the Transfusion technology and operation procedures of product instruction， and the crossmatching positive results of polybrene and microtubes gel test were compared and recorded. Results The operation time of polybrene was lower than that of microtubes gel test[（12.09±2.11）min vs （32.22±2.31）min]， but the test rate of positive specimens of microtubes gel test was higher than that of polybrene and the difference was obvious（90.00% vs 50.00%），（χ2=38.10， t=64.34， P=0.00）. Conclusion The sensitivity of microtubes gel test is higher， but the operation time is longer， and it is not suitable for the emergency blood matching， and the polybrene is relatively rapid， with a certain missed diagnosis rate， and it is suitable for the emergency blood matching course.

[Key words]Polybrene； Microtubes gel test； Crossmatching； Positive results

交叉配血的工作中有許多方法，如：凝聚胺法、微柱凝膠法、鹽水介質(zhì)法等，傳統(tǒng)的應(yīng)用方式是鹽水介質(zhì)法，之后隨著交叉配血方式的不斷發(fā)展和改進(jìn)，凝聚胺法和卡式微柱凝膠法被廣泛應(yīng)用?？ㄊ轿⒅z法一般應(yīng)用于非急診用血之中。該文研究2016年3月—2017年3月的2 000例申請(qǐng)輸血患者的凝聚胺法與微柱凝膠法交叉配血陽性結(jié)果。

1 資料與方法

1.1 一般資料

方便選擇醫(yī)院申請(qǐng)輸血患者，共計(jì)2 000例，所有供血者均為無償獻(xiàn)血者。2 000例申請(qǐng)輸血患者中有男性1 600例，女性400例；年齡10～90歲，平均（50.55±30.11）歲；該次標(biāo)本應(yīng)用1～2 mL的EDTA-2 鉀抗凝血，發(fā)現(xiàn)陽性標(biāo)本共計(jì)100例。

所有患者均知情同意該次研究過程、內(nèi)容，自愿簽署知情同意書。

1.2 方法

均按照《輸血技術(shù)學(xué)》、產(chǎn)品說明書中所規(guī)定的操作流程進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作，急診進(jìn)行凝聚胺法配血，其他配血類型則采用微柱凝膠法。

凝聚胺法中的試劑和儀器均由長(zhǎng)春博訊生物技術(shù)公司所提供，而微柱凝膠法中的試劑和儀器均由瑞士達(dá)亞美公司所提供。凝聚胺法采用紅細(xì)胞懸液的濃度在3%～5%之間，微柱凝膠法采用紅細(xì)胞懸液的濃度為1%，在配血的過程中若出現(xiàn)了陽性結(jié)果標(biāo)本則應(yīng)用另一種方式進(jìn)行配血。

凝聚胺法的具體操作方式；將受血者血漿（2 滴血清）與獻(xiàn)血者紅細(xì)胞懸液（1滴）加入到主側(cè)管之中，并在次側(cè)管中加入2 滴獻(xiàn)血者血清和受血者的1滴紅細(xì)胞懸液；分別將4滴低離子介質(zhì)液加入到主側(cè)管、次側(cè)管之中，將其混勻并在室溫狀態(tài)下放置1 min；分別將2 滴聚凝胺液加入到主側(cè)管、次側(cè)管之中，將其混勻并離心，離心時(shí)間10 s，轉(zhuǎn)速為3 500 r/min，將上清液遺棄并輕搖試管，若沒有凝聚現(xiàn)象則重做上述步驟；將2 滴懸液滴入，并輕搖，若凝聚有清散則代表配血相合。

微柱凝膠法的具體操作方式；將受血者的1 滴血漿與獻(xiàn)血者的2 滴紅細(xì)胞懸液加入到主側(cè)管之中，其中，血漿25 μL，紅細(xì)胞懸液50 μL，并在次側(cè)管中加入受血者的2 滴紅細(xì)胞懸液（濃度1%）和25 μL的血者血漿（大約1 滴）；在37℃ 恒溫孵育器中放置，待孵育 15 min之后，進(jìn)行離心，離心時(shí)間10 min，轉(zhuǎn)速1 030 r/min；若在凝膠上層有紅細(xì)胞全部滯留且凝膠背景十分清晰則代表4+；若紅細(xì)胞沉積大部分在微柱的底部沉積且紅細(xì)胞少量的在凝膠介質(zhì)中下層滯留則代表1。

1.3 觀察項(xiàng)目

比較記錄凝聚胺法與微柱凝膠法交叉配血陽性結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理研究數(shù)據(jù)指標(biāo)，計(jì)量資料用（x±s）表示，行t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

凝聚胺法操作耗時(shí)（12.09±2.11）min低于微柱凝膠法（32.22±2.31）min，但微柱凝膠法的陽性標(biāo)本檢出率（90.00%）均高于凝聚胺法（50.00%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表1。

3 討論

凝聚胺法能夠有效結(jié)合IgG 與紅細(xì)胞，可以將紅細(xì)胞彼此之間距離有效縮短，并且能夠結(jié)合紅細(xì)胞抗原和血清之中的抗體，以此產(chǎn)生非特異性質(zhì)的凝聚作用，當(dāng)附加的假凝聚清除液散開凝聚之后，會(huì)依然存在特異性的凝聚（主要是由于抗原抗體反應(yīng)所引起的）；凝聚胺法的試劑具有極好的穩(wěn)定性，并且檢驗(yàn)操作十分便捷，具有極佳的重復(fù)性，并且操作過程中不需要額外特殊的儀器設(shè)備，十分適合應(yīng)用于急診配血的工作之中[1-2]。

微柱凝膠法能夠結(jié)合凝膠過濾技術(shù)和抗原抗體反應(yīng)，并能夠?qū)δz間隙大小進(jìn)行有效調(diào)節(jié)，可以使得其通過RBC并與RBC分離，但是，該種方式需要借助離心機(jī)和孵育器，一般情況下需要30 min才能獲得結(jié)果，因此，該種方式并不適合應(yīng)用在急診配血工作中，微柱凝膠法只需要少量的標(biāo)本用量并且能夠有效保存標(biāo)本結(jié)果，因此，該種方式適合應(yīng)用在批量標(biāo)本的配血工作之中，并且，該種配血工作大大減少了人為差錯(cuò)的發(fā)生率，應(yīng)用價(jià)值性十分肯定[3-4]。

不論是凝聚胺法還是微柱凝膠法都存在一定的假陽性率，導(dǎo)致該種情況出現(xiàn)的原因眾多，如：①假陽性微柱凝膠法出現(xiàn)假陽性是因?yàn)榧t細(xì)胞懸液的濃度所致，致使血漿比例與血球比例不適合，因此，臨床中普遍認(rèn)為紅細(xì)胞濃度為1%最為適宜，若患者為新生兒可以適當(dāng)調(diào)濃，但是，也要注意紅細(xì)胞懸液用量需要在血漿量之上，一般是其兩倍[3]；②凝聚胺法出現(xiàn)假陽性是因?yàn)檠“灏l(fā)生大批量的聚集情況所導(dǎo)致的，該種情況一旦發(fā)現(xiàn)要及時(shí)改用血清配血，并延長(zhǎng)離心時(shí)間；③在進(jìn)行采血過程中，其標(biāo)本抗凝效果并不理想，即標(biāo)本因素所致假陽性標(biāo)本出現(xiàn)；④若患者存在較高的白細(xì)胞計(jì)數(shù)則會(huì)影響微柱凝膠法的最終結(jié)果；⑤若室溫過低則容易影響凝聚胺法的最終結(jié)果；⑥若患者存在高球蛋白、異常的血清蛋白則會(huì)影響微柱凝膠法的最終結(jié)果；⑦若患者應(yīng)用了肝素和止血敏等藥物則會(huì)影響凝聚胺法的最終結(jié)果[5-7]。

該次研究結(jié)果顯示出：凝聚胺法操作耗時(shí)（12.09±2.11）min低于微柱凝膠法（32.22±2.31）min，但微柱凝膠法的陽性標(biāo)本檢出率（90.00%）均高于凝聚胺法（50.00%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；并且，該次研究數(shù)據(jù)結(jié)果經(jīng)SPSS21.0系統(tǒng)軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)對(duì)比發(fā)現(xiàn)，與劉潘[8]學(xué)者所闡述的研究結(jié)論相似，在其他研究中發(fā)現(xiàn)微柱凝膠法的相合例數(shù)有95例，因此檢出率為95.00%，配血時(shí)間在（30.21±5.22）min，且凝聚胺法的相合例數(shù)有100例，因此檢出率為100.00%，配血時(shí)間在（10.35±3.22）min，與該次研究相似度較高，間接說明該次研究結(jié)論具有導(dǎo)向性；但是，該次研究的選擇標(biāo)本數(shù)量還是相對(duì)較少，因此，在其他學(xué)者研究中可以選擇大量的標(biāo)本進(jìn)行進(jìn)一步研究，由此可見，微柱凝膠法具有較高的敏感性，但是，操作耗時(shí)時(shí)間較長(zhǎng)，并不適合應(yīng)用于急診配血過程中；而凝聚胺法則相對(duì)更為快速，但是存在一定的漏檢率，適合應(yīng)用于急診配血過程中。

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（收稿日期：2018-07-24）