小兒熱速清糖漿解熱作用研究

馬曉玉 陳榮昌 楊龍坡 葛一蒙 孫桂波 孫曉波

[摘要]目的 探討小兒熱速清糖漿對干酵母誘導(dǎo)大鼠發(fā)熱及內(nèi)毒素誘導(dǎo)新西蘭兔發(fā)熱模型的解熱作用。方法 ①大鼠發(fā)熱試驗：70只雄性SD大鼠，按體重和體溫隨機分為7組（n=10），分別為正常組，模型組，小兒熱速清糖漿低、中、高劑量組（7.5、15.0、30.0 ml/kg），阿司匹林組（7.5 mg/kg），感冒止咳糖漿組（15 ml/kg），正常組和模型組大鼠給予等體積的生理鹽水灌胃。預(yù)給藥3 d后頸部皮下注射干酵母混懸液造模，計算各組大鼠在不同時間的體溫，與基礎(chǔ)體溫比較，有顯著性差異則造模成功。分別在注射后1、2、3、6、8 h測量大鼠體溫，在第6小時再灌胃給藥1次。②兔發(fā)熱試驗：選取42只雄性新西蘭兔基礎(chǔ)體溫在38.5～39.5℃，按體重和體溫隨機分為7組（n=6），分別為正常組，模型組，小兒熱速清糖漿低、中、高劑量組（4、8、16 ml/kg），阿司匹林陽性對照組（4 mg/kg），感冒止咳糖漿組（8 ml/kg），正常組和對照組給予等體積的生理鹽水。預(yù)給藥3 d后，耳緣靜脈注射大腸桿菌內(nèi)毒素，計算各組新西蘭兔在不同時間的體溫與基礎(chǔ)體溫比較，有顯著性差異則造模成功。于注射后第1、2、3、4、5、6小時分別測量新西蘭兔的肛溫。結(jié)果 大鼠發(fā)熱試驗中，第1小時模型組大鼠的體溫顯著高于造模前基礎(chǔ)體溫（P<0.05）；模型組和各給藥組大鼠第2、3、6、8小時的體溫高于基礎(chǔ)體溫，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；各時間點模型組大鼠的體溫顯著高于正常組（P<0.05）；相同時間點小兒熱速清糖漿高劑量組和阿司匹林組第2、3、6、8小時的體溫顯著低于模型組（P<0.05）；第3、6、8小時阿司匹林組大鼠體溫顯著低于小兒熱速清糖漿高劑量組（P<0.05）；感冒止咳糖漿組大鼠第2、3小時的體溫顯著低于模型組（P<0.05）。新西蘭兔發(fā)熱試驗中，第1小時模型組和低劑量組新西蘭兔的體溫顯著高于造模前基礎(chǔ)體溫（P<0.05）；模型組和各給藥組新西蘭兔第2、3、4、5、6小時的體溫高于基礎(chǔ)體溫，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；各時間點模型組新西蘭兔的體溫顯著高于正常組（P<0.05）；相同時間點小兒熱速清糖漿高劑量組第2、3、4、5、6小時的體溫顯著低于模型組（P<0.05）；各個時間點阿司匹林組新西蘭兔的體溫低于模型組（P<0.05）；感冒止咳糖漿組新西蘭兔第2、4、5、6小時的體溫顯著低于模型組（P<0.05）。結(jié)論 小兒熱速清糖漿對酵母致熱大鼠模型及內(nèi)毒素致熱新西蘭兔模型均有一定的解熱作用。

[關(guān)鍵詞]小兒熱速清糖漿；解熱；新西蘭兔；大鼠

[中圖分類號] R96 [文獻標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-4721（2018）12（c）-0042-04

[Abstract] Objective To explore the antipyretic effect of Resuqing Syrup of children on rat fever induced by dry yeast and New Zealand rabbit fever induced by endotoxin. Methods ①Fever test in rats： seventy male SD rats were randomly divided into 7 groups according to body weight and body temperature （n=10）， they were normal group， model group， low， medium and high dose Children Resuging Synup group （7.5， 15.0， 30.0 ml/kg）， Aspirin group （7.5 mg/kg）， Cold Cough Syrup group （15 ml/kg）， normal group and model group were given the same volume of physiology saline water gavage. After 3 days of pre-administration， Dry Yeast Suspension was subcutaneously injected into the neck to establish the model， the body temperature of rats in each group was calculated at different time points， compared with the basal body temperature， the model was successful with significant difference. The body temperature of rats was measured at 1， 2， 3， 6 and 8 hours after injection， and then given orally once at 6 hours. ②Rabbit fever test： a total of 42 male New Zealand rabbits were randomly divided into 7 groups （n=6） according to body weight and body temperature， they were normal group， model group， low， medium and high dose group （4， 8， 16 ml/kg）， aspirin positive control group （4 mg/kg）， cold and cough syrup group （8 ml/kg） and normal group （8 ml/kg）， the same volume of saline was given to the control group. After 3 days of pre-administration， Endotoxin was injected into the ear vein to calculate the body temperature of New Zealand rabbits at different time points compared with the basal body temperature， the model was successfully established with significant difference. Anal temperature of New Zealand rabbits was measured at 1， 2， 3， 4， 5 and 6 hours after injection. Results In the fever test of rats， the body temperature of the first hour model group was significantly higher than that of the basal body temperature before modeling （P<0.05）. The body temperature of rats in model group and each administration group at 2nd， 3rd， 6th and 8th hours was higher than that of basal body temperature （P<0.05）. At each time point， the body temperature of the model group was significantly higher than that of the normal group （P<0.05）. At the same time point， the body temperature of the high dose group and aspirin group was significantly lower than that of the model group at 2nd， 3nd， 6th and 8th hours （P<0.05）. The body temperature of the aspirin group was significantly lower than that of the high dose group （P<0.05）. The body temperature of rats in the cold and cough syrup group was significantly lower than that in the model group at the 2nd and 3rd hours （P<0.05）. In the fever test of New Zealand rabbits， the body temperature of the first hour model group and low dose group was significantly higher than that of the basal body temperature before modeling （P<0.05）. The body temperature of New Zealand rabbits in the model group and each drug group at 2nd， 3rd， 4th， 5th and 6th hours was higher than that of the basal body temperature （P<0.05）. The body temperature of New Zealand rabbits in the model group was significantly higher than that in the normal group at each time point （P<0.05）. At the same time point， the body temperature of the high dose group of Resuqing Syrup at the 2nd， 3rd， 4th， 5th and 6th hours was significantly lower than that of the model group （P<0.05）. The body temperature of New Zealand rabbits in aspirin group was lower than that of model group at each time point （P<0.05）. The body temperature of New Zealand rabbits in the cold and cough syrup group was significantly lower than that in the model group at the 2nd， 4th， 5th and 6th hours （P<0.05）. Conclusion Resuqing Syrup of children has antipyretic effect on yeast-induced fever rat model and endotoxin-induced fever New Zealand rabbit model.

[Key words] Resuqing Syrup of children； Antipyretic； New Zealand rabbit； Rat

發(fā)熱是多種疾病進展過程中重要臨床表現(xiàn)之一，其中以細菌引起的感染性發(fā)熱最常見，病毒次之[1]。目前世界范圍內(nèi)正在尋找療效更好，毒副作用更小或者無毒副作用的退燒藥[2]。中醫(yī)復(fù)方制劑的效果并不是所有單味藥及其化學(xué)成分簡單相加，而是其多種組分共存及共同作用的結(jié)果[3]。中成藥是中醫(yī)臨床的主要用藥，研究中藥的藥理作用和機制對我國中藥領(lǐng)域的提升有重大意義[4]。解熱鎮(zhèn)痛抗炎藥是目前世界范圍內(nèi)處方量最大的藥物之一，已有多種藥物上市，廣泛用于臨床，但其產(chǎn)生了較多的不良反應(yīng)[5]，同時小兒臨床用藥因其特殊性受到廣泛關(guān)注。中藥因其不良反應(yīng)少、經(jīng)濟、安全等優(yōu)勢，逐漸成為研究的重點[6-7]。小兒熱速清糖漿是采用中藥方劑（柴胡、黃芩、板藍根、葛根、金銀花、水牛角、連翹、大黃）進行加工制成的中成藥。臨床上小兒熱速清糖漿具有顯著地退熱作用，且效果穩(wěn)定。本實驗通過酵母誘導(dǎo)的大鼠發(fā)熱模型和內(nèi)毒素誘導(dǎo)的新西蘭兔發(fā)熱模型來探討小兒熱速清糖漿的解熱作用。

1材料與方法

1.1實驗動物

70只3～4周齡雄性SD大鼠（120～140 g）及42只7～8周齡新西蘭兔（1～1.2 kg）均由北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司提供。SD大鼠許可證編號：SCXK（京）2014-0001，新西蘭兔許可證編號：SCXK（京）2014-0012。在中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所動物中心進行動物飼養(yǎng)。動物實驗設(shè)施持續(xù)保持屏障環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)。實驗開展前經(jīng)過中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院/北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院藥用植物研究所實驗動物管理與動物福利委員會（IACUC）的審查批準(zhǔn)。

1.2主要儀器及試劑

儀器：紅外線電子體溫計（型號：MC-872，歐姆龍健康醫(yī)療有限公司）；肛溫計（型號：MC-347，歐姆龍健康醫(yī)療有限公司）。

試劑：小兒熱速清糖漿（批號：C20150401，黑龍江珍寶島藥業(yè)股份有限公司）；阿司匹林腸溶片（批號：018141111，石藥集團歐意藥業(yè)有限公司）；感冒止咳糖漿（批號：20150101，貴州拜特制藥股份有限公司）；生理鹽水（批號：E16070105，山東華魯制藥有限公司）；大腸桿菌內(nèi)毒素（批號：109K4075，Sigma公司），干酵母（批號：HY1704，安琪酵母股份有限公司）。

1.3酵母皮下注射致大鼠發(fā)熱試驗

70只120～140 g雄性SD大鼠，分別稱量體重和測兩次體溫，按體重和體溫進行分組（n=10），包括正常組，模型組，小兒熱速清糖漿低、中、高劑量組（7.5、15.0、30.0 ml/kg），阿司匹林組（7.5 mg/kg）和感冒止咳糖漿組（15 ml/kg）。除正常組、模型組給予相同容積的生理鹽水外，其余各組預(yù)給藥3 d，每天給藥兩次，第3天給藥0.5 h后，頸部皮下注射干酵母混懸液（15%，10 mg/kg）造模[8]，使用歐姆MC-872紅外線電子體溫計分別在1、2、3、6、8 h測量大鼠左耳和右耳溫度。每個時間點測量3次，取其平均值作為大鼠體溫。

1.4內(nèi)毒素致熱新西蘭兔發(fā)熱試驗

測溫時將兔置于固定盒中，溫度計探頭涂以石蠟油，插入肛門內(nèi)10 cm并用小夾固定于尾根部，待兔穩(wěn)定后每小時記錄直腸溫度1次，共3次，取3 d的均值作為基礎(chǔ)體溫，選取基礎(chǔ)體溫38.5～39.5℃的新西蘭兔42只。按體重和體溫不同隨機分為7組（n=6），包括正常組，模型組，小兒熱速清糖漿低、中、高劑量組（4，8，16 ml/kg），阿司匹林組（4 mg/kg）和感冒止咳糖漿組（8 ml/kg）[9]。各給藥組分別灌胃給予不同藥物，模型組和正常組分別灌胃給予相同容積的生理鹽水，每天給藥兩次，連續(xù)給藥3 d。末次給藥0.5 h后，除正常組外各組均按1.5 mg/kg耳緣靜脈注射2.5 g/ml大腸桿菌內(nèi)毒素，用數(shù)字測溫儀分別在1、2、3、4、5、6 h測量肛溫，每個時間點測量3次，取其平均值作為兔直腸溫度，觀察小兒熱速清糖漿對內(nèi)毒素致熱的解熱效應(yīng)。

1.5統(tǒng)計學(xué)方法

采用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS 16.0分析數(shù)據(jù)，連續(xù)型變量以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，滿足方差齊性者采用單因素方差分析或多組間多重比較分析法，方差不齊者則組間多重比較采用Tamhane′s T2檢驗，各時點比較采用混合設(shè)計重復(fù)測量數(shù)據(jù)的方差分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1小兒熱速清糖漿對各組大鼠不同時間點體溫變化的影響

正常組大鼠不同時間點的體溫比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；第1小時模型組大鼠的體溫顯著高于造模前基礎(chǔ)體溫（P<0.05），其他各組大鼠體溫與造模前基礎(chǔ)體溫比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；模型組和各給藥組大鼠第2、3、6、8小時的體溫高于基礎(chǔ)體溫，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；模型組大鼠各時間點的體溫顯著高于正常組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；小兒熱速清糖漿高劑量組和阿司匹林組大鼠第2、3、6、8小時的體溫顯著低于模型組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；阿司匹林組大鼠第3、6、8小時的體溫顯著低于小兒熱速清糖漿高劑量組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；感冒止咳糖漿組大鼠第2、3小時的體溫顯著低于模型組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）（表1）。

2.2小兒熱速清糖漿對各組新西蘭兔不同時間點體溫變化的影響

正常組新西蘭兔不同時間點的體溫比較，，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；第1小時模型組和低劑量組新西蘭兔的體溫顯著高于造模前基礎(chǔ)體溫（P<0.05），其他各組新西蘭兔體溫與造模前基礎(chǔ)體溫比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；模型組和各給藥組新西蘭兔第2、3、4、5、6小時的體溫高于基礎(chǔ)體溫，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；模型組新西蘭兔各時間點的體溫顯著高于正常組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；小兒熱速清糖漿高劑量組新西蘭兔第2、3、4、5、6小時的體溫顯著低于模型組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），阿司匹林組新西蘭兔各個時間點的體溫低于模型組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；感冒止咳糖漿組新西蘭兔第2、4、5、6小時的體溫顯著低于模型組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）（表2）。

3討論

發(fā)熱主要是機體受到外源性致熱原入侵后，作用于淋巴細胞、單核細胞、巨噬細胞等免疫活性細胞，產(chǎn)生內(nèi)源性致熱原，即大量致熱性細胞因子，通過中樞介質(zhì)，這些細胞因子作用于體溫調(diào)節(jié)中樞，體溫調(diào)定點上升，引起散熱減少，產(chǎn)熱增加，最終導(dǎo)致發(fā)熱[10-11]。

與西藥相比，中藥在治療發(fā)熱方面有其特殊的優(yōu)勢和特點，首先中藥可從多靶點產(chǎn)生療效，毒副作用低，有著巨大的開發(fā)空間[12]。小兒熱速清糖漿所含的幾味中藥成分具有良好的解熱作用，如水牛角、連翹、金銀花、柴胡、葛根、大黃等。水牛角為牛科動物水牛的雙角，性味咸、寒，具有涼血，清熱解毒的功能，用于熱病壯熱、熱盛出血、神昏及斑疹等[13]。連翹提取物可通過降低內(nèi)毒素所致發(fā)熱大鼠下丘腦中環(huán)磷酸腺苷（cAMP）、前列腺素E2（PGE2）的含量來降低和調(diào)節(jié)大鼠體溫[14-15]。金銀花水提取物具有解熱和抗炎作用，其不同濃度水提物對內(nèi)毒素、干酵母所致大鼠發(fā)熱和白介素-1β（IL-1β）致新西蘭兔發(fā)熱均有不同程度的抑制作用[16]，與連翹配伍應(yīng)用時療效明顯高于單味金銀花或連翹[17]。口服大量柴胡皂苷能使正常大鼠體溫下降[18]，柴胡水提物可降低致熱大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、PGE2水平，降低致熱大鼠下丘腦中cAMP及腦腹中隔區(qū)AVP的含量，升高血漿中AVP的含量[19]。有研究闡述了小兒熱速清糖漿抗流感病毒和抗菌的作用[20]。本研究結(jié)果顯示，小兒熱速清糖漿對酵母致大鼠發(fā)熱及內(nèi)毒素致熱新西蘭兔均具有一定的解熱作用，但其解熱作用弱于阿司匹林組（P<0.05）。

綜上所述，小兒熱速清糖漿具有顯著的解熱作用，雖然不及一線應(yīng)用的西藥，但適用于特定的人群，加上溫和而有效的治療作用，具有非常廣闊的應(yīng)用前景及臨床價值。

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