FASA全自動精子分析儀檢測出的可疑無精子癥標本的確診分析

孫國海 汪珣 朱來晴 石亮

210008江蘇省南京市南京大學醫(yī)學院附屬鼓樓醫(yī)院男科實驗室

隨著社會發(fā)展及環(huán)境惡化，男性生育力逐漸下降，精液檢查需求相應不斷增加。因此，精液檢查結(jié)果的可靠性、準確性顯得尤為重要。隨著計算機技術(shù)的發(fā)展，自動精液分析儀逐步應用于臨床[1-2]。對于大部分精液標本來說，自動精液分析儀在精子密度、活力等方面的檢測結(jié)果較傳統(tǒng)手工法更客觀、可靠，但是自動精液分析儀只可用于檢測精子濃度＞2×106/mL的標本[3]。對于精子濃度遠低于2×106/mL的標本，存在精子漏檢甚至誤診為無精子癥的可能。本實驗室目前采用的全自動精子分析儀(Fully automated sperm analyzer，F(xiàn)ASA)BEION-S3 同樣會遇到這樣的問題。本文中，我們所探討對象，僅限于FASA全視野均未觀測到精子從而懷疑為無精子癥的精液標本，對這些標本進一步分析以確診其是否是無精子癥。

資料與方法

2018年1-9月收集男性精液標本，F(xiàn)ASA檢測為無精子癥標本388例，受試者年齡18～55歲。

儀器與試劑：上海北昂醫(yī)藥科技股份有限公司的FASABEION-S3，Olympus CX23光學顯微鏡，Thermo Fisher scientific公司Micro CL 17離心機。

方法：囑受試者禁欲2～7 d，手淫取精，標本于37℃孵育至完全液化后充分混勻，取2 μL于BEION-S3專用載玻片中，進行自動檢測分析。對未檢測出精子而提示無精子癥的標本，取樣50 μL均勻涂片后于高倍鏡下逐個視野觀察，記錄前向運動PR精子數(shù)、非前向運動NP精子數(shù)及不動IM精子數(shù)。重復上述涂片步驟1次，記錄2次結(jié)果之和為最終結(jié)果。如2次均未見精子，則取標本1 mL以3 000 r/min離心15 min，棄上清，將沉淀物混勻后，在兩張玻片上各加入10 μL沉淀團懸液，覆蓋22 mm×22 mm蓋玻片，200倍鏡下逐個視野觀察，如前記錄各類型精子數(shù)。

統(tǒng)計學處理：以Microsoft Excel 2013進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計。

結(jié) 果

388例精液標本中，離心前鏡檢未觀測到精子239例(61.60%)，其中離心后鏡檢發(fā)現(xiàn)精子10例(2.58%)；離心前鏡檢觀測到精子成分149例(38.40%)。觀測到的不同運動類型PR、NP、IM精子的標本例數(shù)具體結(jié)果，見表1。

討 論

在精液常規(guī)分析中，傳統(tǒng)手工法費時費力且易受檢測者主觀影響，因而近些年隨著計算機技術(shù)的發(fā)展，精液自動分析系統(tǒng)逐步被市場接受。本實驗室采用的FASA BEION-S3僅需2μL精液標本即可快速檢測出精子密度、活力等常規(guī)參數(shù)，但對于精子密度極低的精液標本存在精子漏檢及誤診為無精子癥的可能。

無精子癥是指射出的精液在離心后的沉淀物中未發(fā)現(xiàn)精子，根據(jù)不同病因可分為梗阻性無精子癥和非梗阻性無精子癥[4]。本實驗室就診的男性不育癥尤其是少精子癥、無精子癥患者，多數(shù)于后期需進行輔助生育，如果精液標本中能夠發(fā)現(xiàn)活動精子，尤其是PR精子，那么患者可能無須承受后期睪丸穿刺的痛苦，因此對懷疑無精子或少精子癥標本需盡量確診其有無精子及活動精子。在本研究中，388例經(jīng)FASA分析初步懷疑無精子癥標本，經(jīng)過離心后鏡檢，確診無精子癥標本229例。但必須指出，3 000 r/min離心15 min并不能使精液中所有精子完全沉淀下來，且離心后精子可能喪失活力。離心后發(fā)現(xiàn)精子的10例標本，屬于隱匿精子癥，其中僅1例發(fā)現(xiàn)1條PR精子，另外9例均只檢測到1～2條不動精子。對于149例可見不同運動類型精子的標本，因精子密度過低而無法準確測量密度，但通過對鏡下檢測到的精子尤其是活動精子進行計數(shù)，并在檢測報告中給予備注，為臨床醫(yī)生提供了相對直觀的精液指標，對臨床判斷不育癥病因及后繼治療具有良好的指導意義。

表1 388例FASA檢測出的無精子癥標本進一步鏡檢結(jié)果[n(%)]

綜上所述，對于FASA檢測出的懷疑無精子癥的精液標本，需進一步通過涂片鏡檢甚至離心后鏡檢的方法，確診其有無精子及活動精子，從而得到相對可靠準確的精液檢測結(jié)果。