動(dòng)物疫病診斷化驗(yàn)室操作中常見(jiàn)問(wèn)題與解決對(duì)策

林麗

（云南省麗江市永勝縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，麗江 674200）

0 引言

傳統(tǒng)的獸醫(yī)工作方式越來(lái)越難以適應(yīng)當(dāng)前動(dòng)物疫病形勢(shì)的發(fā)展，因此，需要提高動(dòng)物疫病的診斷水平。在動(dòng)物疫病防控工作中，診斷化驗(yàn)室是其中的重要內(nèi)容，在加強(qiáng)動(dòng)物疫病診斷方面發(fā)揮巨大的作用，但是一些地區(qū)的化驗(yàn)室診斷還存在一些問(wèn)題。

1 檢測(cè)依據(jù)

化驗(yàn)室診斷方法采用的檢測(cè)依據(jù)有以下幾種：①?lài)?guó)家標(biāo)準(zhǔn)以及農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)；②動(dòng)物疫病檢測(cè)的其他規(guī)范；③化驗(yàn)室自行設(shè)定的檢測(cè)方法。不管采用何種方法，都需要考慮化驗(yàn)室自身的條件及樣品類(lèi)型，如在對(duì)偽狂犬病進(jìn)行診斷時(shí)，實(shí)驗(yàn)室有酶標(biāo)儀，沒(méi)有基因擴(kuò)增儀，在診斷時(shí)檢測(cè)人員可采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)進(jìn)行診斷。如果送檢樣品為血清，檢測(cè)人員則可以采用酶聯(lián)吸附試驗(yàn)，而不需要采用動(dòng)物接種試驗(yàn)與病毒分離鑒定方法。

2 檢測(cè)操作中的問(wèn)題

2.1 微量移液器的使用

在許多檢驗(yàn)方法中，微量移液器得到廣泛的應(yīng)用，其中在酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)或者血凝抑制試驗(yàn)中，應(yīng)用最為廣泛。當(dāng)調(diào)整固定到某一需要的使用量進(jìn)行使用時(shí)，下壓排液有2個(gè)檔位，輕壓一檔，然后松開(kāi)手指，所吸的液體則為指示的用量；重壓另一檔，則為放液時(shí)使用[1]。在工作中，一些實(shí)驗(yàn)人員偶爾會(huì)出現(xiàn)疏忽，吸液時(shí)重壓一檔，這樣會(huì)導(dǎo)致吸液的量存在誤差，進(jìn)而影響檢測(cè)的準(zhǔn)確性。尤其是在倍比稀釋時(shí)，實(shí)驗(yàn)人員不注意使用，在不同的孔中吸液稀釋時(shí)存在時(shí)重時(shí)輕的問(wèn)題，易導(dǎo)致同一份樣品檢測(cè)的抗體滴度沒(méi)有規(guī)律，導(dǎo)致試驗(yàn)失敗。

2.2 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)中的問(wèn)題

在動(dòng)物疫病診斷標(biāo)準(zhǔn)等技術(shù)規(guī)范中，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)對(duì)試驗(yàn)中加底物的反應(yīng)步驟進(jìn)行規(guī)定，規(guī)定固定的時(shí)間，然后加終止液。但是，在許多酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)中，加底物的反應(yīng)步驟需要根據(jù)陰性、陽(yáng)性對(duì)照反應(yīng)情況對(duì)反應(yīng)的時(shí)間進(jìn)行調(diào)整。如當(dāng)陰性與陽(yáng)性對(duì)照的反應(yīng)結(jié)果出現(xiàn)后，實(shí)驗(yàn)人員則可以加終止液。有關(guān)資料規(guī)定的時(shí)間可能太長(zhǎng)或者太短，這樣會(huì)對(duì)反應(yīng)的結(jié)果產(chǎn)生影響。如果加底物的反應(yīng)時(shí)間較長(zhǎng)，樣品則有可能呈現(xiàn)陽(yáng)性，易導(dǎo)致誤診情況的產(chǎn)生。

3 不開(kāi)具《檢測(cè)委托書(shū)》

《檢測(cè)委托書(shū)》是指客戶(hù)在送檢時(shí)，與檢測(cè)單位所簽訂的檢測(cè)合同，在合同內(nèi)會(huì)標(biāo)注客戶(hù)的姓名、樣品數(shù)量以及狀況等。該委托書(shū)一式兩份，在簽訂后，檢測(cè)單位一份，客戶(hù)手持一份。但是，因?yàn)槭艿礁鞣N因素的影響，如熟客或者他人代為送檢等，因此經(jīng)常不開(kāi)具《檢測(cè)委托書(shū)》[2]。最后在操作中，時(shí)常遇到送檢樣品的數(shù)量問(wèn)題，或者樣品狀況不好的情況，如組織樣品受污染、血清樣品中有溶血的現(xiàn)象，這些情況則不能進(jìn)行檢測(cè)，易與客戶(hù)發(fā)生糾紛。

4 檢測(cè)報(bào)告中的填寫(xiě)問(wèn)題

4.1 樣品號(hào)與牲畜耳號(hào)不一致

某縣由獸醫(yī)部門(mén)采集、送檢的牛血清，用血清號(hào)標(biāo)記。但是在化驗(yàn)室檢測(cè)時(shí)，檢測(cè)出牛血清某種抗體呈陽(yáng)性（因?yàn)樵撌∽⑸溥@種疫苗的情況非常少，經(jīng)過(guò)相關(guān)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，并沒(méi)有注射過(guò)這種疫苗），并且有某種疫病的臨床癥狀，最終檢測(cè)出患有某種疫病，并且以血清號(hào)出具了檢測(cè)報(bào)告。因?yàn)槲袡z驗(yàn)的牛場(chǎng)要求保險(xiǎn)公司給予賠償（其向保險(xiǎn)公司投保），但保險(xiǎn)公司認(rèn)為在《檢驗(yàn)報(bào)告》上，血清號(hào)與牛耳號(hào)不符，不給予賠償，出具相應(yīng)的證明后，保險(xiǎn)公司才認(rèn)可[3]。因此，在接受檢測(cè)樣品時(shí)，《檢測(cè)委托書(shū)》上需要標(biāo)注牲畜的標(biāo)識(shí)，以確保樣品能與報(bào)告上的相對(duì)應(yīng)，防止上述問(wèn)題的出現(xiàn)。

4.2 檢驗(yàn)結(jié)論中的用詞問(wèn)題

在檢測(cè)中，許多檢驗(yàn)項(xiàng)目需要檢測(cè)是否存在抗體，或者檢測(cè)抗體滴度。但是，現(xiàn)在許多疫苗都有疫苗可防，當(dāng)動(dòng)物注射疫苗后，會(huì)產(chǎn)生抗體，或者因?yàn)槟撤N疫病剛發(fā)生沒(méi)有產(chǎn)生抗體，檢測(cè)出來(lái)的抗體陽(yáng)性結(jié)果則不能表明究竟是或者不是某種疫病[4]。因此，在《檢驗(yàn)報(bào)告》中檢驗(yàn)結(jié)論一欄，不能填寫(xiě)某樣品檢驗(yàn)結(jié)果判定為某種疫病，而應(yīng)該填寫(xiě)其他的術(shù)語(yǔ)，如某樣品抗體呈陽(yáng)性（陰性）或者某樣品的抗體滴度等。

5 解決對(duì)策

針對(duì)化驗(yàn)室操作中存在的各種問(wèn)題，需要制定一個(gè)較為完善的工作制度，對(duì)實(shí)驗(yàn)人員的工作行為進(jìn)行規(guī)定，使他們的工作變得更加科學(xué)化、規(guī)范化。針對(duì)實(shí)驗(yàn)人員存在的失誤問(wèn)題，需要提高他們的思想意識(shí)，端正工作態(tài)度，使他們能認(rèn)真、仔細(xì)地應(yīng)對(duì)每一份工作。對(duì)于不開(kāi)具《檢測(cè)委托書(shū)》的這一問(wèn)題，則需要對(duì)工作人員進(jìn)行嚴(yán)格的規(guī)定，無(wú)論是熟客或者代人送檢，都應(yīng)該根據(jù)工作制度的要求開(kāi)具檢測(cè)委托書(shū)，有效防止糾紛事件的發(fā)生[5]。最后，對(duì)于檢測(cè)報(bào)告中存在的填寫(xiě)問(wèn)題，需要對(duì)工作人員的填寫(xiě)用詞進(jìn)行規(guī)范，根據(jù)實(shí)際情況開(kāi)具證明，確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性與科學(xué)性。

6 結(jié)束語(yǔ)

在動(dòng)物疫病診斷中，化驗(yàn)室的操作較為關(guān)鍵，對(duì)診斷的結(jié)果有直接的影響。但是，在當(dāng)前實(shí)驗(yàn)室操作中還存在一些問(wèn)題，如檢測(cè)操作中、檢測(cè)報(bào)告中未填寫(xiě)、不開(kāi)具《檢測(cè)委托書(shū)》等這些問(wèn)題的存在嚴(yán)重影響動(dòng)物疫病的診斷，不利于動(dòng)物疫病的防控。因此，在今后工作中，需要對(duì)相關(guān)工作制度進(jìn)行不斷地完善，促使化驗(yàn)室的操作更加規(guī)范化、科學(xué)化；加強(qiáng)對(duì)實(shí)驗(yàn)室人員的專(zhuān)業(yè)培訓(xùn)，提高其操作水平。只有這樣才能提高動(dòng)物疫病檢測(cè)的準(zhǔn)確性，為我國(guó)的動(dòng)物疫病防控工作做好鋪墊。