禽流感診斷與防治

田戈

（濟(jì)南市章丘區(qū)畜牧獸醫(yī)局，濟(jì)南 250200）

0 引言

禽流感病毒（AIV）屬正黏病毒科流感病毒屬?；蚪M由單股負(fù)鏈8節(jié)段RNA組成，分別編碼血凝素（HA）、神經(jīng)氨酸酶（NA）、膜基質(zhì)蛋白（M1和M2）、核蛋白（N）、非結(jié)構(gòu)蛋白（NS1和NS2）、聚合酶（PA、PB1和PB2）。其中H1和N1具有高度變異性，HA蛋白具有細(xì)胞融合功能，其HA1和HA2裂解位點(diǎn)存在多個(gè)堿性氨基酸，是決定H5、H7亞型禽流感病毒高致病性的關(guān)鍵分子基礎(chǔ)；NA具有神經(jīng)氨酶活性，對(duì)病毒裝配后的釋放與感染發(fā)揮重要作用，也是神經(jīng)氨酸酶抑制劑類抗病毒藥的主要靶蛋白；M2具有離子通道活性，對(duì)病毒侵入細(xì)胞后HA發(fā)揮融合功能至關(guān)重要，同時(shí)也是金剛烷胺類抗病毒藥的主要靶蛋白；PA、PB1以及PB2與基因組RNA共同構(gòu)成轉(zhuǎn)錄與復(fù)制的功能復(fù)合體；NS1功能與拮抗宿主細(xì)胞α、β干擾素有關(guān)[1]。典型的A型流感病毒粒子具有囊膜，直徑約100 nm，但通常呈體積較大的多形性對(duì)脂溶性溶劑敏感，高溫下迅速失活。A型流感病毒可通過不同亞型和不同毒株間病毒基因組節(jié)段重配，以雞基因組RNA復(fù)制過程中發(fā)生的突變，導(dǎo)致流感病毒致病性、抗原性與生物學(xué)特征的變異。根據(jù)HA和NA抗原性的差異，A型流感病毒分為15個(gè)HA亞型和9個(gè)NA亞型。目前從禽類已經(jīng)分離到15種不同的HA亞型和9種NA亞型，因此禽類尤其是水禽和遷徙鳥被認(rèn)為是A型流感病毒的自然宿主。近代史上人類曾3次暴發(fā)流感，其病原H1N1、H1N2及H3N3亞型病毒均與禽源流感病毒有密切關(guān)系。國際動(dòng)物衛(wèi)生組織將禽流感列為A類動(dòng)物疫病，我國將其列為一類動(dòng)物疫病[2]。

1 流行特點(diǎn)

禽流感是一種嚴(yán)重危害家禽的病毒性傳染性疾病，常發(fā)生于冬春季節(jié)，許多家禽和野禽都可以感染該種疾病。目前已經(jīng)得知該種病毒會(huì)感染50多種禽類，患病雞、帶毒雞、帶毒的野禽是該種病毒的主要傳染源。禽流感病毒主要經(jīng)呼吸道結(jié)膜、消化道進(jìn)行傳播，患病雞、帶毒雞的分泌物、排泄物、呼出的氣體中均存在大量病毒。健康雞通過與患病雞接觸，或者直接接觸患病雞污染的環(huán)境會(huì)導(dǎo)致病毒傳播流行，病毒還可以經(jīng)過種蛋進(jìn)行垂直傳播。另外，病毒可以通過飼養(yǎng)人員、飼養(yǎng)用具進(jìn)行傳播。在山東地區(qū)禽流感呈現(xiàn)間歇性、規(guī)律式的傳播流行，主要病毒血清型為H9型，其次是H5型。

2 臨床癥狀

不同血清型的禽流感病毒所造成的致病能力存在很大差異性，而且根據(jù)基準(zhǔn)年齡、繼發(fā)感染以及飼養(yǎng)管理?xiàng)l件等因素不同，發(fā)病率和死亡率也存在一定差異。通常低致病性禽流感所造成的死亡率較低，但會(huì)嚴(yán)重影響雞的健康生長，導(dǎo)致雞采食量下降，精神沉郁，呼吸障礙，產(chǎn)蛋率下降，畸形蛋率升高，出現(xiàn)腹瀉癥狀，排出黃綠色粥樣稀便。低致病性禽流感與其他細(xì)菌性病毒性疾病混合感染后，會(huì)使養(yǎng)殖場的死亡率進(jìn)一步升高，臨床癥狀加重，造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。流感具有很強(qiáng)的傳播性，發(fā)病時(shí)間短，死亡率較高，潛伏期通常在3 d內(nèi)，發(fā)病后體溫迅速升高到43 ℃以上，患病雞表現(xiàn)為精神極度萎靡、結(jié)膜發(fā)紺、癱瘓、鳴叫，病死率100%。水禽對(duì)該種病毒不敏感，但會(huì)存在帶毒情況。近年，隨著禽流感病毒不斷變異，鴨、鵝感染H5型致病性禽流感所造成的臨床癥狀日趨加重，死亡率有所升高。

3 病理變化

H9亞型為低致病性禽流感，通常造成的死亡率較低，大多數(shù)病死雞主要表現(xiàn)為氣管、鼻竇氣囊、結(jié)膜輕度或中度充血出血，出現(xiàn)炎癥病變。發(fā)病嚴(yán)重時(shí)，病死雞卵巢出現(xiàn)退行性變化，病變部位會(huì)波及到輸卵管。將病死雞解剖后，可以發(fā)現(xiàn)鼻竇內(nèi)存在漿液性、纖維素性、粘液性以及干酪狀滲出物。病死雞氣管粘膜輕度充血水腫，氣道壁變厚粗糙，且在其囊壁表面附著纖維素性或干酪樣滲出物。病死雞還會(huì)出現(xiàn)腹膜炎、卵黃性腹膜炎，將輸卵管打開后，可以發(fā)現(xiàn)內(nèi)部存在少量的滲出物。

高致病性禽流感感染會(huì)導(dǎo)致劇烈死亡，最急性病死雞主要表現(xiàn)為無明顯病理學(xué)變化，各個(gè)臟器正常。發(fā)病時(shí)間較長的病死雞，臟器病變較為嚴(yán)重，表現(xiàn)為頭部腫大，雞冠、肉髯腫大為原來1～2倍。皮下組織存在淡黃色的膠樣浸潤，皮下組織出血明顯。將胸腔腹腔打開后，可以發(fā)現(xiàn)脂肪表面存在紫紅色的出血病斑。心包內(nèi)存在大量積液，心外膜存在點(diǎn)狀或條狀出血壞死，心肌柔軟。肌胃角質(zhì)層下出血明顯，腺胃和肌胃交界處能看到帶狀或環(huán)狀的出血。病死雞腸道充血出血，主要表現(xiàn)為十二指腸、盲腸、扁桃體、泄殖腔充血出血，肝臟、脾臟、腎臟充血腫大，在臟器表面還能發(fā)現(xiàn)白色的壞死組織。呼吸道表面存在大量炎性分泌物，胸腺萎縮，在表面有不同程度的點(diǎn)狀斑塊狀出血。法氏囊萎縮明顯，外觀呈現(xiàn)黃色，充血出血。產(chǎn)蛋雞卵泡充血出血，卵黃液稀薄，有的病死雞因卵黃破裂出現(xiàn)卵黃性腹膜炎，將胸腔打開后，發(fā)現(xiàn)內(nèi)部充滿稀薄的卵黃。輸卵管打開后，表面水腫充血，內(nèi)部存在漿液性、粘液性或干酪樣物質(zhì)。

4 診斷

禽流感亞型眾多且基因突變、重組、重排，使其變異極快，導(dǎo)致毒株的變異性也千差萬別，早期快速診斷和血清學(xué)檢測無疑是預(yù)防、控制禽流感的前提條件。我國動(dòng)物流感研究中心（ARIC）在近年相繼建立了禽流感瓊脂擴(kuò)散（AGP）、血凝抑制試驗(yàn)（HI）、神經(jīng)氨酸酶抑制試驗(yàn)（NI）、間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）等血清學(xué)診斷技術(shù)及分子診斷技術(shù)（RIPCR），滿足了我國禽流感流行病學(xué)監(jiān)測及現(xiàn)地診斷與防治的迫切要求。

4.1 臨床診斷

禽流感的臨床癥狀和剖檢變化因禽的日齡、種類和發(fā)病感染情況不同而異。高致病性AIV感染主要表現(xiàn)為暴發(fā)型，發(fā)病率和病死率較高，均可達(dá)到100%。低致病性AIV感染基本無特征性的臨床癥狀，病死率為5%～15%。本病僅根據(jù)臨床癥狀和剖檢變化很難做出準(zhǔn)確的診斷，必須依靠病原的分離與鑒定。

4.2 病毒的分離培養(yǎng)

AIV在雞胚中生長良好，將疑似病料經(jīng)適當(dāng)處理接種其中，分離培養(yǎng)病毒。若檢測出有凝血活性，可進(jìn)一步確定分型；若為陰性，則認(rèn)為病毒分離陰性。

4.3 毒力的測定

目前，常用的方法是靜脈接種致病指數(shù)（IVPI）和腦內(nèi)接種致死指數(shù)（ICPI）的測定。若IVPI＞1.2，可判定為高致病性毒株；ICPI＜0.5為緩發(fā)型毒株，ICPI＞1.5為高致病力毒株。

5 防治

禽流感發(fā)病急，死亡快，一旦發(fā)生損失較大，應(yīng)重視對(duì)該病的預(yù)防，因此要加強(qiáng)飼養(yǎng)管理。管理人員進(jìn)出養(yǎng)殖場時(shí)，應(yīng)該更換消毒服裝。進(jìn)出養(yǎng)殖場的車輛進(jìn)行定期消毒。養(yǎng)殖場內(nèi)部消毒劑可以選擇使用二氯異氰尿酸鈉或二氧化氯，輪換交替消毒，避免產(chǎn)生耐藥性。及時(shí)將養(yǎng)殖場內(nèi)部的糞便、污染的墊料清理出養(yǎng)殖場，集中無害化處理。另外，應(yīng)該制定嚴(yán)格的檢疫制度，科學(xué)引種，引種的雞必須進(jìn)行嚴(yán)格的檢疫，確保健康后才能進(jìn)入養(yǎng)殖場。同時(shí)，還要嚴(yán)格控制養(yǎng)殖環(huán)境，控制養(yǎng)殖密度，強(qiáng)化雞舍通風(fēng)換氣，防寒保暖，降低多種不良因素的影響，提高雞群抵抗能力[3]。

6 結(jié)束語

禽流感一年四季均可能發(fā)病，其高致病性、烈性傳染性危害嚴(yán)重，會(huì)帶來較大的經(jīng)濟(jì)損失。因此，要加強(qiáng)對(duì)該病的防控，強(qiáng)化飼養(yǎng)管理，制定嚴(yán)格的檢疫制度，保證良好的養(yǎng)殖環(huán)境，降低禽流感的發(fā)病率。