梁俊昌
(山東省棗莊市市中區(qū)畜牧獸醫(yī)局,棗莊 277100)
魏氏梭菌是一種廣泛分布于土壤,水源以及動(dòng)物腸道內(nèi)的重要病原體,常常導(dǎo)致人和家畜感染出現(xiàn)多種疾病。由此可以看出,魏氏梭菌病是一種條件致病菌,通常情況下不會(huì)表現(xiàn)致病力。當(dāng)羊群受到外界刺激因素如飼養(yǎng)密度過(guò)大,羊舍高溫潮濕,通風(fēng)不良,糞便堆積,有毒有害氣體積累影響,而導(dǎo)致羊身體抵抗力下降,以及腸道有益菌群失調(diào)時(shí),就會(huì)為該種疾病傳播提供條件[1]。羊魏氏梭菌病是羊常見(jiàn)的高度接觸性、急性傳染性疾病,臨床上具有發(fā)病急,病程短,死亡率高的特點(diǎn),如果防控不及時(shí),將會(huì)給養(yǎng)殖戶乃至整個(gè)羊養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)造成難以估計(jì)的經(jīng)濟(jì)損失。因此了解該種疾病,并樹(shù)立正確的防控意識(shí),對(duì)控制該種疾病發(fā)生有著很大幫助。
2017年8月13日,山東省棗莊市一位養(yǎng)殖戶向當(dāng)?shù)孬F醫(yī)局報(bào)告,他養(yǎng)殖的羊群中出現(xiàn)了急性傳染性疾病。個(gè)別羊在沒(méi)有任何臨床癥狀前提下,突然倒地死亡。隨后羊群陸續(xù)出現(xiàn)患病羊,發(fā)病當(dāng)天死亡6只羊。接到養(yǎng)殖戶求助后,當(dāng)?shù)孬F醫(yī)站立即派遣獸醫(yī)到場(chǎng)診治。獸醫(yī)到場(chǎng)后,通過(guò)和飼養(yǎng)戶交流得知,該養(yǎng)殖場(chǎng)并未進(jìn)行嚴(yán)格的免疫,當(dāng)年只接種過(guò)一次羊口蹄疫和羊痘疫苗,尚未接種過(guò)其他種類(lèi)疫苗。通過(guò)對(duì)養(yǎng)殖環(huán)境檢查發(fā)現(xiàn),該養(yǎng)殖場(chǎng)地勢(shì)低洼,容易積水,且存在羊舍地面潮濕通風(fēng)不良,環(huán)境溫度較高,糞便堆積的現(xiàn)象,在羊舍中能夠聞到一股濃郁的刺鼻氣味。結(jié)合整個(gè)發(fā)病經(jīng)過(guò),獸醫(yī)懷疑是羊魏氏梭菌病[2]。確診之后,立即為該養(yǎng)殖戶制定了有效的防控措施,在較短時(shí)間內(nèi)控制了病情,避免疫情進(jìn)一步傳播而帶來(lái)更嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。
羊群表現(xiàn)為突然發(fā)病,發(fā)病急發(fā)病時(shí)間短,死亡率高。總共有11頭羊在沒(méi)有出現(xiàn)任何臨床癥狀的前提下,突然倒地死亡,死亡后從天然孔流出黑色鮮血。臨床癥狀較為緩和的患病羊表現(xiàn)為精神沉郁,食欲不振,嚴(yán)重的食欲廢絕。患病羊離群獨(dú)居,臥地不起。部分患病羊全身肌肉震顫,口腔鼻腔中流出泡沫狀內(nèi)容物。隨后出現(xiàn)腹瀉癥狀,排出棕褐色或者黑褐色粥樣稀便,體溫升高到40℃以上。注射青霉素和氨基比林無(wú)明顯效果,12頭癥狀較為緩和的患病羊通常在1 d內(nèi)死亡。
解剖3只病死羊,發(fā)現(xiàn)所有病死羊尸體嚴(yán)重脫水,打開(kāi)腹腔后有腥臭氣味,胃腸道內(nèi)充滿了帶有血液的內(nèi)容物,胃黏膜嚴(yán)重脫落,胃底部存在大小不一的黑色潰瘍病灶,腸道鼓氣嚴(yán)重,并且在腸粘膜上存在嚴(yán)重的出血性腸炎,盲腸漿膜明顯出血,呈現(xiàn)橫條狀。全身淋巴結(jié)腫大明顯,其中腸系膜淋巴結(jié)腫大尤為顯著。3頭患病羊腎臟出血嚴(yán)重,質(zhì)地軟爛。
無(wú)菌環(huán)境下采集上述病死羊腸道內(nèi)容物、病變淋巴結(jié)組織腎臟組織,帶回實(shí)驗(yàn)室后,制成觸片,用火焰固定,經(jīng)革蘭氏染色后干燥鏡檢。在可視區(qū)域內(nèi)發(fā)現(xiàn)大量陽(yáng)性革蘭氏染色大桿菌,兩端鈍圓,有莢膜,單一或成對(duì)排列。
將上述病料組織粉碎后,80℃水浴15 min,然后將病料接種到皰肉基和普通肉湯中,37℃恒溫培養(yǎng)24 h,在普通肉湯中未發(fā)現(xiàn)細(xì)菌生長(zhǎng),肉湯未渾濁,不存在沉淀物。但在皰肉基中致病菌生長(zhǎng)十分迅速,呈現(xiàn)均勻混濁,產(chǎn)生大量氣體,在試管底部有少量灰白色沉淀生成,繼續(xù)培養(yǎng),4 h后在培養(yǎng)基的肉湯中出現(xiàn)略帶紅色的沉淀容物。革蘭氏染色鏡檢為陽(yáng)性染色大桿菌,兩端鈍圓,成對(duì)排列。將分離得到的致病菌接種到鮮血瓊脂培養(yǎng)基上,37℃厭氧條件培養(yǎng)24 h,在鮮血瓊脂培養(yǎng)基上生長(zhǎng)出圓形、中間隆起、表面濕潤(rùn)光滑、邊緣整齊的乳白色菌落,菌落周?chē)嬖陔p溶血環(huán),內(nèi)環(huán)為β溶血環(huán),外環(huán)為α溶血環(huán)。將該種致病菌接種到溴甲酚產(chǎn)牛乳培養(yǎng)基中,37℃恒溫培養(yǎng)10 h,在培養(yǎng)基中呈現(xiàn)爆裂時(shí)發(fā)酵,產(chǎn)酸產(chǎn)氣,并使培養(yǎng)基凝固、凍化。
生化實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),該種致病菌能夠分解麥芽糖、蔗糖、乳糖、木糖、葡萄糖,產(chǎn)酸產(chǎn)氣,不能夠發(fā)酵山梨醇、甘露醇、水楊苷、肌醇,靛基質(zhì)試驗(yàn)陰性,不能夠產(chǎn)生硫化氫。將病死羊小腸內(nèi)容物,經(jīng)過(guò)雙考滅菌處理后,制成5倍懸濁液,在離心機(jī)中離心15 min,取上層清液0.2 mL,腹腔接種到小白鼠體內(nèi),同時(shí)設(shè)置對(duì)照組,對(duì)照組小白鼠腹腔接種生理鹽水0.2 mL,實(shí)驗(yàn)組小白鼠接種10 h內(nèi)死亡,解剖小白鼠病變和上述病死羊基本一致,取小白鼠病變組織制成涂片后用革蘭氏染色鏡檢,為革蘭氏陽(yáng)性染色大桿菌。藥敏試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)該種致病菌對(duì)丁胺卡那霉素、諾氟沙星、萬(wàn)古霉素、頭孢哌酮、復(fù)方磺胺高敏,對(duì)慶大霉素、卡那霉素中敏,對(duì)鏈霉素、青霉素、環(huán)丙沙星、桿菌肽低敏。最終結(jié)合實(shí)驗(yàn)室診斷確診為羊魏氏梭菌病[3]。
本次診治過(guò)程中,共出現(xiàn)患病羊39頭,治療前死亡23頭,治療無(wú)效死亡11頭。因?yàn)檠蛭菏纤缶“l(fā)病急發(fā)病時(shí)間短,死亡率高,確診后應(yīng)該立即選擇高明抗生素對(duì)癥治療,以降低死亡率?;疾⊙蚓o急肌肉注射丁胺卡那霉素注射液,按照體重每公斤使用8 mg,每天2次,連續(xù)使用3 d為1個(gè)療程。為了預(yù)防患病,要出現(xiàn)嚴(yán)重脫水,使用5%的葡萄糖生理鹽水500 mL灌服,同時(shí)使用乳酶生,每只羊口服兩粒,每天2次,促進(jìn)胃腸道消化,恢復(fù)胃腸道功能。連續(xù)用藥5 d,因?yàn)?1頭患病羊病情嚴(yán)重,治療無(wú)效死亡,剩余5頭患病羊恢復(fù)健康[4]。在整個(gè)發(fā)病期間,要徹底清掃羊舍,羊舍地面使用2%的氫氧化鈉溶液噴灑消毒,要逐漸降低精飼料投喂量,增加粗飼料。連續(xù)跟蹤隨訪1個(gè)月羊群生長(zhǎng)良好,病情得到有效控制,未繼續(xù)出現(xiàn)發(fā)病羊。養(yǎng)殖場(chǎng)病情得到控制后,緊急免疫接種羊快疫、羊猝疽、羊腸毒血癥三聯(lián)疫苗,接種劑量按照四倍量免疫接種。日常要指導(dǎo)飼養(yǎng)戶加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,勤打掃圈舍,保持羊舍清潔干燥,飼養(yǎng)用具清潔衛(wèi)生。并做好通風(fēng)換氣工作,保持羊舍空氣新鮮。同時(shí),還要及時(shí)清理食槽,杜絕羊群吃剩草料,避免重復(fù)飼喂剩余飼料。飼料更換過(guò)程中,一定要有1周以上的過(guò)渡期,讓羊群逐漸適應(yīng)新飼料。注意確保飲用水源衛(wèi)生,及時(shí)清理羊舍糞便,避免糞便堆積發(fā)酵,產(chǎn)生更多有毒有害氣體。
由于羊魏氏梭菌病具有發(fā)病急,發(fā)病時(shí)間短,死亡率高的特點(diǎn),通常情況下,來(lái)不及治療,患病羊就會(huì)死亡[5]。發(fā)病之后,要及時(shí)將患病羊隔離,并做好環(huán)境消毒和防控工作。要及時(shí)將病死羊從羊舍中清理出去,運(yùn)送到指定位置,進(jìn)行無(wú)害化深埋或焚燒處理。同時(shí)針對(duì)有治療價(jià)值的患病羊,要選擇高敏抗生素對(duì)癥治療,以期降低死亡率,為養(yǎng)殖戶挽回最大的經(jīng)濟(jì)損失。
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