戴文華,劉軍,張明輝,張曉峰,吳日峰
(山西省大同市動物衛(wèi)生監(jiān)督所,大同 037004)
瘦肉精屬β-激動劑類藥物。人食用含瘦肉精的豬肉后會出現(xiàn)頭暈、惡心、手腳顫抖、心跳加速甚至心臟驟停致昏迷死亡的現(xiàn)象,特別對心律失常、高血壓、青光眼、糖尿病和甲狀腺機能亢進等患者有極大的危害?!笆萑饩焖贆z測卡”因其使用方便、檢測時間短、靈敏度高、不需要特殊儀器設(shè)備和結(jié)果判斷直觀等優(yōu)點,被基層動物衛(wèi)生監(jiān)督隊伍和屠宰企業(yè)大量用于現(xiàn)場檢測,在瘦肉精專項整治中發(fā)揮了重要的作用。
1.1.1 種類繁雜
由于快速檢測卡被廣泛應(yīng)用于基層隊伍衛(wèi)生監(jiān)管工作和屠宰企業(yè)的自檢當(dāng)中,市場上不同生產(chǎn)廠家和不同品牌的檢測卡眾多,可謂魚目混珠。實際工作中常用的瘦肉精檢測卡主要為鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺和沙丁胺醇三種。生產(chǎn)上監(jiān)測卡有單卡和三聯(lián)卡,因此,在監(jiān)測卡的選擇上,易造成很多困惑。
1.1.2 監(jiān)測卡的評判標(biāo)準(zhǔn)不一
從目前市場出售的監(jiān)測卡來看,有農(nóng)業(yè)部備案的,有的廠家有1種或2種產(chǎn)品備案;也有沒有備案的。有農(nóng)業(yè)部測試推薦,經(jīng)農(nóng)業(yè)部組織測試產(chǎn)品的準(zhǔn)確率、假陽性率和檢測限值等指標(biāo)。有的既未通過農(nóng)業(yè)部備案,也未經(jīng)農(nóng)業(yè)部測試,評判標(biāo)準(zhǔn)不一。
1.1.3 檢測卡標(biāo)示的靈敏度、有效期不一
如鹽酸克倫特羅檢測卡,標(biāo)識檢測限值有1 ppb和3 ppb的;檢測卡的有效期有12個月和24個月,差異較大。沙丁胺醇檢測卡有5 ppb和3 ppb的。靈敏度、有效期標(biāo)示不一,不同靈敏度不同有效期的檢測卡市場上均有銷售。
1.2.1 同一檢測卡對不同畜種存在差異
瘦肉精檢測卡主要針對生豬開發(fā),一般應(yīng)用于牛、羊的監(jiān)測,往往出現(xiàn)跑帶慢、結(jié)果不準(zhǔn)等問題。
1.2.2 受外界環(huán)境溫度影響大
瘦肉精快速監(jiān)測一般在現(xiàn)場進行,在冬季溫度較低的環(huán)境下,反應(yīng)速度慢、判定結(jié)果難度大[1]。
監(jiān)測人員未認(rèn)真閱讀檢測卡說明書,監(jiān)測卡放置不平,一面高一面低,加樣后液體不能自由擴散,使反應(yīng)結(jié)果不準(zhǔn)。
加樣過多或過少,滴加樣品溶液時速度過快,溶液量過多,一般超過了5滴,使溶液從觀察窗的膜表面慢涌著流過,反應(yīng)失??;樣品中鹽離子濃度偏高或PH值偏酸偏堿,導(dǎo)致膠體金抗體受影響,不能順利反應(yīng)。使用檢測卡對加樣量有著精確的要求,應(yīng)嚴(yán)格按照說明書操作,樣本量太多或太少對結(jié)果有著重要的影響,樣本太多會增大沖擊力,導(dǎo)致樣本直接流到NC膜上或從檢測卡內(nèi)部滲漏而出現(xiàn)假陽性。樣本量太少不足以完成整個檢測,導(dǎo)致膠體金滯留也會出現(xiàn)假陽性結(jié)果[2]。
樣品采集的尿樣混入雜物,未采取離心或澄清措施,雜物影響樣本的擴散,導(dǎo)致反應(yīng)結(jié)果不準(zhǔn)。宜靜置或離心后取上清液,再進行監(jiān)測。
最好在10~30 ℃的室溫下操作,如受條件限制,應(yīng)采取適當(dāng)?shù)谋卮胧?。待檢樣本在滴加到樣本孔中時的溫度應(yīng)控制在4~30 ℃之內(nèi),對于冷凍的樣本應(yīng)充分溶解混勻恢復(fù)至檢測溫度范圍,而剛從豬體內(nèi)取出的尿樣,一般溫度高于35 ℃,應(yīng)稍放置冷卻后再檢測。環(huán)境溫度主要是注意不能低于0 ℃,檢測卡的操作和保存均不能低于0 ℃,否則水份形成的冰晶會損壞抗體的活性,造成金標(biāo)抗體失效而出現(xiàn)假陽性結(jié)果[3]。
測試卡保存不當(dāng),在高濕度情況下或保存在0 ℃以下,特別是在高寒地區(qū),冬季將檢測卡放置于室外的車內(nèi),使試紙條上的抗體失效,無法進行免疫反應(yīng)。
檢測卡中試紙條的各組份對干燥程度要求很高,尤其是NC膜,他們的干燥程度直接影響著試紙條整體的吸水性能,而吸水性能是影響結(jié)果的重要標(biāo)志之一,如果檢測卡受潮,試紙條整體吸水性能下降,膠體金的涌動受到影響易停滯在NC膜上,從而造成假陽性率大大升高。所以在使用檢測卡時,打開包裝后應(yīng)立即使用,防止受潮。
出現(xiàn)陽性反應(yīng)時,應(yīng)考慮飼喂的飼料、用藥等因素進行綜合分析。應(yīng)采集同場仔畜或種畜常規(guī)、不加其它物質(zhì)的畜尿進行對照,進行綜合判定。不能用自來水作對照。因為檢測卡抗原、抗體反應(yīng)必須在電解質(zhì)環(huán)境下進行,水中電解質(zhì)濃度不夠或很少的情況下,抗原抗體反應(yīng)不能進行。
出現(xiàn)沖板,T、S線均不出現(xiàn)反應(yīng)的應(yīng)判為試驗失敗,重新監(jiān)測。對判為陽性樣品應(yīng)采集尿液采取氣相液相色譜分析復(fù)檢,以氣相或液相分析結(jié)果為準(zhǔn)[4]。
影響瘦肉精快速監(jiān)測結(jié)果的因素一般有檢測卡的選擇、監(jiān)測人員能力和環(huán)境影響等。
選擇檢測卡時,應(yīng)考慮監(jiān)測藥物類型是否經(jīng)濟、快速及是否便于現(xiàn)場操作,能否滿足監(jiān)督篩查的要求;同時還要考慮檢測卡的監(jiān)測限值即靈敏度、生產(chǎn)廠家的品牌和實際使用效果等因素。切忌只考慮價格便宜,從而導(dǎo)致監(jiān)測結(jié)果不準(zhǔn)或無效。
監(jiān)測人員能力是影響監(jiān)測結(jié)果的主要因素之一,監(jiān)測的準(zhǔn)確性、規(guī)范性也影響監(jiān)測結(jié)果,如操作的熟練程度,采樣、加樣、結(jié)果的判定等。應(yīng)加強對監(jiān)測人員的培訓(xùn),提高監(jiān)測操作技能。
樣品采集對監(jiān)測結(jié)果影響很大。在養(yǎng)殖環(huán)節(jié)進行監(jiān)測時,特別是規(guī)模養(yǎng)殖場,一般由飼養(yǎng)人員進行采樣,采樣對象應(yīng)為育肥畜,最好為育肥后期畜。如果采集仔畜或種畜尿液不能反映出欄動物的瘦肉精含量真實水平,監(jiān)測人員應(yīng)告知畜主,最好對采樣過程通過監(jiān)控設(shè)備全程監(jiān)督[5]。
第一,盡快出臺瘦肉精監(jiān)測卡生產(chǎn)的國家標(biāo)準(zhǔn)和操作規(guī)范,統(tǒng)一監(jiān)測卡的靈敏度標(biāo)準(zhǔn)和有效期。
第二,統(tǒng)一檢測卡的判定標(biāo)準(zhǔn)。如農(nóng)業(yè)部備案工作已經(jīng)數(shù)年未開展。
第三,加強瘦肉精檢測卡生產(chǎn)和銷售的監(jiān)督管理,進一步規(guī)范檢測卡市場,杜絕魚目混珠的現(xiàn)象發(fā)生。