水牛繁殖生物技術(shù)的應(yīng)用

黃健，陳明棠，覃廣勝，譚正準(zhǔn)，李輝，趙朝步

（廣西水牛研究所，南寧 530001）

0 引言

現(xiàn)階段，國(guó)內(nèi)相關(guān)部門提高了對(duì)水牛業(yè)發(fā)展的重視，給予了水牛業(yè)較高的經(jīng)濟(jì)扶持，并且將擴(kuò)大水牛奶業(yè)規(guī)模來(lái)作為鄉(xiāng)鎮(zhèn)經(jīng)濟(jì)發(fā)展的新項(xiàng)目，從而為水牛業(yè)的持續(xù)穩(wěn)定發(fā)展提供了保障。然而因水牛本身生育能力的弱化，如晩發(fā)情、晚育、兩次生育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、受孕率不高等特點(diǎn)，致使國(guó)內(nèi)水牛雜交優(yōu)化過(guò)程體現(xiàn)出優(yōu)良受精卵缺失的情況，要改善這樣的情況，就應(yīng)該合理運(yùn)用先進(jìn)的生物技術(shù)，以強(qiáng)化水牛的生育能力，以此保證水牛業(yè)的良好發(fā)展。

1 人工授精技術(shù)

國(guó)內(nèi)對(duì)育齡水牛實(shí)行人工授精技術(shù)，早在20世紀(jì)40年代就已開始。相關(guān)資料顯示，國(guó)內(nèi)相關(guān)部門所實(shí)行的水牛雜交改良優(yōu)化模式，不僅提高了各地區(qū)水牛的產(chǎn)奶量，而且水牛的肉質(zhì)大大提高[1]。

2 超數(shù)排卵和同期發(fā)情

在通常狀態(tài)下，水牛在發(fā)情期都只會(huì)產(chǎn)生一個(gè)卵子，養(yǎng)殖者借助對(duì)外源激素的運(yùn)用，可以提高發(fā)情水牛的卵子產(chǎn)出個(gè)數(shù)，以促進(jìn)仔牛產(chǎn)出量的提高，同時(shí)借助胚胎移植來(lái)促進(jìn)良好基因類型的擴(kuò)散。相對(duì)于奶牛來(lái)說(shuō)，水牛發(fā)情時(shí)的卵泡數(shù)量往往會(huì)低30%，并且卵泡的閉鎖率也比奶牛高，更重要的是，水牛對(duì)促排卵激素的反應(yīng)也不明顯，所以仔牛產(chǎn)量的提升率也往往會(huì)低于奶?！，F(xiàn)階段，水牛的犢牛出生率盡管有明顯的提升，有效受精卵有時(shí)也會(huì)由原來(lái)的1個(gè)提升到3個(gè)，然而更多的情況下還是只有1個(gè)。常用于水牛超排的促性腺激素有PMSG（孕馬血清促性腺激素）和FSH （促卵胞素），F(xiàn)SH的超排效果優(yōu)于PMSG，每次超排獲得有效胚胎的數(shù)量是2.09∶0.56。同期發(fā)情技術(shù)便于掌握適時(shí)輸精，縮短發(fā)情配種時(shí)間，有利于提高人工授精配種受胎率和胚胎移植受胎率。我國(guó)相關(guān)部門對(duì)水牛同期發(fā)情技術(shù)的運(yùn)用進(jìn)行了全面的分析探索，并且將這種技術(shù)運(yùn)用到了強(qiáng)化水牛生育能力的環(huán)節(jié)中，如GnRH法、孕酮法、2次PGF2α法、孕酮和ECG方法等。經(jīng)諸多分析實(shí)踐得出，在一般情況下，高質(zhì)量卵子與黃體并存時(shí)，就會(huì)明顯強(qiáng)化受孕率，尤其是對(duì)水牛的同期發(fā)情會(huì)起到很大的作用，在水牛發(fā)情期借助對(duì)孕酮的運(yùn)用可強(qiáng)化生育能力。然而，從整體情況來(lái)分析，水牛同期發(fā)情技術(shù)的運(yùn)用程度還需要強(qiáng)化。因?yàn)樗?duì)促排卵反應(yīng)力較差，再加上其發(fā)情的征兆也不明顯，所以排卵數(shù)量和同期發(fā)情的效果也不明顯。所以，就應(yīng)該建立較長(zhǎng)時(shí)間的分析探索方案，以明確水牛排卵和發(fā)情的特點(diǎn)，以采取相應(yīng)的發(fā)情識(shí)別技巧[2]。

3 水牛胚胎體外生產(chǎn)

胚胎體外生產(chǎn)包括卵母細(xì)胞體外成熟、體外受精和體外胚胎培養(yǎng)。通過(guò)IVP可大量生產(chǎn)良種胚胎，是解決水牛品種改良過(guò)程中胚胎來(lái)源困難的一個(gè)有效途徑。胚胎體外生產(chǎn)的卵母細(xì)胞來(lái)源主要分為屠宰場(chǎng)卵巢和活體采卵。屠宰場(chǎng)卵巢容易獲得，但是由于系譜不明確，而且絕大部分為沼澤型水牛卵巢，因此對(duì)水牛品種改良的意義不大。OPU通過(guò)B型超聲波引導(dǎo)，經(jīng)子宮壁采集卵母細(xì)胞，可重復(fù)從遺傳價(jià)值高的水牛采集卵母細(xì)胞，與體外受精技術(shù)相結(jié)合可生產(chǎn)大量系譜明確的胚胎，從而充分利用優(yōu)良母畜的遺傳潛力。OPU與體外胚胎生產(chǎn)技術(shù)相結(jié)合，生產(chǎn)的可移植胚胎為超數(shù)排卵的2～3倍，每頭供體每月可生產(chǎn)更多的可移植胚胎（2.0±0.6枚），并可克服母畜生殖道疾病對(duì)胚胎質(zhì)量的影響。體外胚胎生產(chǎn)雖然也取得了一定的成績(jī)，但是水牛胚胎體外生產(chǎn)所需條件較高，需要專業(yè)的儀器設(shè)備進(jìn)行操作，實(shí)質(zhì)上仍處于研究階段，還未能真正應(yīng)用于生產(chǎn)中。今后應(yīng)降低胚胎體外生產(chǎn)的成本，提高體外生產(chǎn)效率。目前正由專業(yè)的單位進(jìn)行良種胚胎體外生產(chǎn)，而后將胚胎冷凍保存，提供給基層的水牛養(yǎng)殖戶進(jìn)行移植生產(chǎn)[3]。

4 水牛胚胎移植

實(shí)行胚胎移植屬于提供排卵數(shù)量、人工授精以及體細(xì)胞移植的后續(xù)流程，對(duì)高素質(zhì)水牛的繁衍會(huì)起到不可替代的保障作用。那么在具體行動(dòng)中，所要考慮的首要項(xiàng)目就是緩解供卵個(gè)體與受卵個(gè)體的同期發(fā)情的矛盾，廣泛運(yùn)用的措施與供卵水牛發(fā)情期處理過(guò)程幾乎是一致的。胚胎移植的操作關(guān)鍵是將胚胎準(zhǔn)確地輸入到卵巢有黃體的子宮角中。因水牛本身黃體表現(xiàn)征兆較為淡化，為后續(xù)促孕環(huán)節(jié)帶來(lái)了難度，更為受精卵的移植過(guò)程帶來(lái)較大難度。在通常情況下，水牛宮頸在發(fā)情時(shí)，就會(huì)封閉，為移植受精卵管線的插入帶來(lái)難度，并很有可能導(dǎo)致子宮明顯的損傷，從而弱化胚胎移植質(zhì)量和水平。如果要想改善這樣的局面，強(qiáng)化水牛的受孕能力，就應(yīng)該選取具備2次以上生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)的水牛來(lái)作為受體接受胚胎移植。需要強(qiáng)調(diào)的是，如果所選的水牛，其本身素質(zhì)不符合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，則很有可能會(huì)導(dǎo)致胚胎移植失敗的不良后果?，F(xiàn)階段，國(guó)內(nèi)水牛胚胎移植的成功率通常僅達(dá)到10%左右，即使各方面基礎(chǔ)條件完備時(shí)，其成功率也只有40%～60%，更重要的是受體水牛在懷孕初期往往會(huì)出現(xiàn)較高的流產(chǎn)率，具體會(huì)達(dá)到50%左右。所以，就必須要制定并落實(shí)標(biāo)準(zhǔn)的母牛飼喂、養(yǎng)護(hù)方案，不僅如此，還需要實(shí)行受精卵相互影響和受精卵發(fā)育的分析探索，以強(qiáng)化水牛的受孕能力。

5 水牛胚胎冷凍

現(xiàn)代的受精卵冷凍技術(shù)完全能夠脫離時(shí)間和空間的制約，緩解母牛分娩與移植在時(shí)間以及空間受限的情況，達(dá)到對(duì)水牛受精卵進(jìn)行異地移植的目標(biāo)，并且還會(huì)對(duì)高質(zhì)量種源進(jìn)行長(zhǎng)久的貯存，有利于受精卵的傳遞，為水牛生物技術(shù)的廣泛宣傳和運(yùn)用奠定了堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。然而現(xiàn)階段，水牛受精卵冷凍技術(shù)還沒(méi)能得到較大范圍的運(yùn)用，在未來(lái)還必須要進(jìn)行更大規(guī)模的水牛受精卵冷凍工作，并且以狀態(tài)維護(hù)劑、冷凍措施以及受精卵成長(zhǎng)時(shí)期等環(huán)節(jié)作為著重點(diǎn)，明顯強(qiáng)化水牛受精卵的成活能力，強(qiáng)化對(duì)受精卵冷凍技術(shù)的運(yùn)用程度[4]。

6 結(jié)束語(yǔ)

水牛業(yè)屬于人們實(shí)現(xiàn)經(jīng)濟(jì)目標(biāo)的新項(xiàng)目，有著非常廣闊的發(fā)展前景。但是水牛的受孕期往往會(huì)有明顯的季節(jié)性，并且其發(fā)情表現(xiàn)也較為淡化，為發(fā)情識(shí)別提高了難度，并且在一定時(shí)期內(nèi)，發(fā)情次數(shù)少、受孕率小，這些客觀因素限制著水牛生育能力的強(qiáng)化。即使這樣，國(guó)內(nèi)相關(guān)部門還是對(duì)水牛的內(nèi)分泌進(jìn)行了分析、探索，并且對(duì)水牛的各種繁殖技術(shù)進(jìn)行了充分的探索，從而為水牛生育能力的強(qiáng)化提供了保障。