淺談優(yōu)化分離精液的冷凍保藏方法

陳 林

（遼寧省大連市畜牧總站，遼寧 大連 116037）

動(dòng)物的性別控制技術(shù)是通過對動(dòng)物的正常生殖過程進(jìn)行人為干預(yù)，使成年雌性動(dòng)物產(chǎn)出人們期望性別后代的一門生物技術(shù)?，F(xiàn)在一般多采用流式細(xì)胞儀進(jìn)行X、Y精子分離法，該技術(shù)是利用動(dòng)物含有X染色體和含有Y染色體的精液中DNA含量的差異，借助特異性染色劑染色，然后根據(jù)發(fā)出的熒光強(qiáng)度，通過計(jì)算機(jī)預(yù)測精子類別，再通過給精液液滴附加電荷，根據(jù)靜電原理，將含有X染色體的精液和Y染色體的精液分離，得到分離精液，如果得到的分離精液在短期內(nèi)不用，則需要將得到分離精液冷凍保藏，以保證其活力。我市相關(guān)企業(yè)通過優(yōu)化分離精液的冷凍保藏方法，實(shí)現(xiàn)了分離精液有效保藏的效果，顯著降低了整個(gè)保藏過程的成本。下面淺析優(yōu)化分離精液的冷凍保藏方法

1 常用分離精液的冷凍保藏方法

分離精液冷凍過程中，需要在其中加入乳化液以防止分離精液受到冷凍打擊，但是常見的乳化液中通常含有大量的蛋黃。因此，在配置乳化液的過程中需要將乳化液進(jìn)行離心、過濾等操作，離心的過程需要用到較多的離心管，過濾的過程需要利用特制的過濾膜，而離心管和特制的過濾膜的價(jià)格比較昂貴，進(jìn)而使得整個(gè)配置乳化液過程的成本增加。

2 優(yōu)化后分離精液的冷凍保藏方法

優(yōu)化方法，包括將分離精液在第一預(yù)定溫度進(jìn)行冷卻，得到初凍分離精液；在初凍分離精液中加入Tris B乳化液并在第一預(yù)定溫度下進(jìn)行乳化，混勻后得到乳化分離精液；再將乳化分離精液在第一預(yù)定溫度下離心，得到分離精液沉淀；將分離精液沉淀在第一預(yù)定溫度下通過懸混、計(jì)數(shù)以及灌裝后得到待冷凍的分離精液；將待冷凍的分離精液通過程序冷凍儀器進(jìn)行冷凍，得到冷凍分離精液；將冷凍分離精液轉(zhuǎn)移至液氮中，長期冷凍保藏。

本方法在將分離精液保藏的過程中，使用了由Tris B緩沖液和丙三醇組成Tris B乳化液作為乳化劑防止對初凍精液在后續(xù)冷凍的過程中受到冷凍打擊，進(jìn)而影響精子的活力；而Tris B乳化液的乳化初凍分離精液的過程中不需要經(jīng)過特制的過濾膜過濾，并且Tris B乳化液配置成本低，降低了整個(gè)保藏過程的成本，實(shí)現(xiàn)了將分離精液有效保藏的效果。

此外，這種分離精液的冷凍保藏方法通過初凍、乳化、離心、懸混、計(jì)數(shù)、灌裝以及程序冷凍儀器冷凍等流程，實(shí)現(xiàn)了將分離精液有效保藏的良好效果，冷凍保藏后的分離精液可應(yīng)用于動(dòng)物的繁育中，并按照生產(chǎn)需求人為的控制動(dòng)物后代的性別，實(shí)現(xiàn)了快速繁育高產(chǎn)家畜的預(yù)期效果。適合飼喂反芻動(dòng)物，因?yàn)樗鼈兊南滥軌蚋咝Ю眠@些物質(zhì)。因?yàn)檫@些糞污所含能量較低，所以比較適合用于維持需要或者飼喂妊娠奶牛，不適合飼喂泌乳牛和育成牛。動(dòng)物糞污通過青貯、脫水或其他方法處理后可適用于飼喂很多種動(dòng)物。飼喂過多的這種回收飼料可以導(dǎo)致飼料中纖維和礦物質(zhì)過高，從而降低奶牛的生產(chǎn)性能。正是因?yàn)檫@個(gè)原因，對高能量飼料，比如泌乳牛飼料，回收飼料所占比例不能超過10%。