張萬有
(海東市樂都區(qū)農(nóng)業(yè)綜合執(zhí)法大隊 810799)
豬支原體肺炎主要是由于支原體聚集并黏連在支氣管、細支氣管及支氣管上皮細胞上,從而造成細胞出現(xiàn)病理性變化及損傷,一旦肺部受到感染,會逐漸發(fā)展為豬支原體肺炎而影響肺的正常功能。受感染的豬會出現(xiàn)精神抑郁、呼吸加快、豬生長發(fā)育出現(xiàn)緩慢、常呈犬坐式呼吸等?,F(xiàn)在我國已經(jīng)研制出兩種弱毒菌苗來預(yù)防這種疾病,一種是豬氣喘病凍干化弱毒菌苗,另一種則是豬氣喘病168株弱毒菌苗,雖然這兩種疫苗作用緩慢且治療范圍具有局限性,但是預(yù)防效果佳,是極佳的預(yù)防疫苗。不僅可以應(yīng)用疫苗預(yù)防,還可以通過控制傳播途徑而抑制感染,從而減少感染率。
豬支原體肺炎屬于一種地方性肺炎,又稱為豬喘氣病,是豬肺炎支原體引起豬的一種慢性呼吸道傳染病,其是多形性的微生物,主要表現(xiàn)為環(huán)狀、點狀、球狀、桿狀以及兩極狀等。此病多發(fā)于豬,乳豬、斷乳豬發(fā)病率最高,其次為懷孕的母豬和哺乳期的母豬。此病主要分為三種類型,包括豬急性支原體肺炎、豬慢性支原體肺炎以及豬隱性支原體肺炎。豬急性支原體肺炎常見于疫區(qū)和新感染的豬群,豬會出現(xiàn)呼吸困難呈腹式呼吸病有喘氣,咳嗽次數(shù)少、痙攣性陣咳,此類支原體肺炎病死率極高,豬在進食時咳嗽的癥狀表現(xiàn)的較平常更加明顯;其次為豬慢性支原體肺炎,經(jīng)常會出現(xiàn)咳嗽,且持續(xù)時間較長,病程較長,主要為2~3個月,甚至更久,豬一般都較為瘦弱,生長發(fā)育緩慢;豬隱性支原體肺炎,其中咳嗽、喘氣等癥狀表現(xiàn)的不會太明顯,全身狀況良好,生長發(fā)育幾乎沒有出現(xiàn)什么異常,但是如果不及時預(yù)防或者豬的生長環(huán)境不好,會使隱性變?yōu)轱@性,且癥狀逐漸加深,甚至造成豬的死亡。
對可能受支原體感染的豬進行活體取血(大約為4~5mL),包括母豬、豬仔以及較肥胖的豬,其次收集豬的呼吸道分泌物,然后采集確診感染的豬的支氣管和肺部組織,將分泌物以及組織放入-80℃的冰箱中,對正常的豬采集血液(4~5mL)。
按照規(guī)范的操作步驟采取適當?shù)慕M織樣品,然后將收集的組織樣品進行適當?shù)奶幚?,包括組織樣品處理、全血樣品處理、陽性對照品處理以及陰性對照處理,然后將這些組織樣品的DNA提取出來,然后將其進行PCR擴增,擴增后電泳,凝膠成像,通過拍照查看結(jié)果,然后進行分析。通過紫外燈查看,可以看到在陽性對照組出現(xiàn)了188bp擴增條帶、陰性對照組則沒有出現(xiàn)條帶;其中出現(xiàn)了188bp擴增條帶為豬支原體肺炎陽性,其他則為陰性,此主要為病原檢測的方式。
將收集的全血樣品進行適當?shù)奶幚?,然后用低溫高速冷凍離心機進行離心,獲得血清,然后將獲得的血清進行稀釋、加樣,其次進行洗板,加入酶結(jié)合物然后進行洗板,然后用顯色劑進行顯色,完成以上步驟,然后用酶標儀進行判定。空白孔調(diào)零,在酶標儀上測各孔的OD630值,如果測得的樣品OD630≥0.42,則屬于支原體肺炎感染豬;如果測得的樣品OD630<0.38,則此豬不屬于支原體肺炎感染豬;如果測得的樣品0.38≤OD630<0.42,則判定豬可能為支原體肺炎感染。需要進行再次檢測,如果檢測結(jié)果仍然介于此范圍內(nèi),則屬于支原體肺炎感染豬。
對病豬進行組織感染分析,可知支原體感染主要集中在豬的肺部。急性感染的豬肺部主要表現(xiàn)為高度膨脹,腫脹幾乎充滿豬的整個肺部組織,且取出的肺部組織具有不同程度的水腫以及炎性細胞,感染嚴重的豬的肺主要有氣泡以及黑色的感染區(qū)域,正常的肺部組織主要為粉紅色以及淡紅色,且沒有出現(xiàn)有氣泡的細胞。而慢性支原體感染的豬,肺的各個組織部位表現(xiàn)為鮮肉樣的顏色的病變,可以看出有灰色的泡沫狀的氣泡,擠壓后會出現(xiàn)灰白色的粘稠樣液體;對選取的3000頭豬的肺部進行觀察,其中有1200頭豬出現(xiàn)肺部異常的情況,且都為急性支原體感染;而1120頭豬表現(xiàn)為慢性肺部支原體感染,病變豬主要占調(diào)研豬的大約2/3左右。
對血清、支氣管黏液進行檢測,其中感染支原體肺炎的豬主要為1894頭,還有一些豬的感染情況不能被明確檢測出來,且其中母豬以及仔豬的感染率較肥胖豬的感染率要高。
從結(jié)果中可知,支原體肺炎感染豬中,母豬以及仔豬的感染率要高于肥胖豬,具有顯著性差異(P<0.05);且應(yīng)用組織檢測結(jié)果精確率要高于應(yīng)用血清、支氣管黏液進行檢測的方式,方面比較具有顯著性差異(P<0.05)。
從調(diào)研中可知,對豬支原體肺炎應(yīng)用合適的方式進行檢測,能夠提高檢測準確率,進行早期預(yù)防,對于豬支原體肺炎感染疾病的治療具有極大的優(yōu)勢。除此之外,支原體肺炎感染與豬生活的環(huán)境、氣溫等具有很大的相關(guān)性,豬群一般非常擁擠,不易通風(fēng),滋養(yǎng)細菌生長,從而使病菌感染率增加,此類疾病主要以冬春寒冷季節(jié)多發(fā),氣候驟變及其他疾病影響時,會加重患豬的病情。