豬鏈球菌病的研究進(jìn)展

(山西省太谷縣畜牧獸醫(yī)中心 范村鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站， 山西 太谷 030800)

0 引言

豬鏈球菌病是一種非常重要的人畜共患病，其主要的病原是豬鏈球菌(SS)[1]。SS根據(jù)其莢膜抗原的不同可分為35種血清型，其中，血清型SS2的致病性最強(qiáng)，傳播范圍最廣，在過(guò)去被認(rèn)為是D群，現(xiàn)歸為R群。豬鏈球菌病最早被發(fā)現(xiàn)并報(bào)道是在20世紀(jì)50年代的英國(guó)和荷蘭，之后在其他國(guó)家和地區(qū)也陸續(xù)出現(xiàn)了本病，經(jīng)實(shí)驗(yàn)室分析比較，病原主要為SS2[2]，侵害豬群的同時(shí)也可感染人，嚴(yán)重制約了養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展，威脅人民的生命健康。

1 病原

SS革蘭氏染色呈陽(yáng)性，在顯微鏡下可看到圓形或橢圓形球菌，多呈短鏈狀排列，少有單獨(dú)存在[3]。當(dāng)SS經(jīng)過(guò)反復(fù)的傳代培養(yǎng)之后，有幾率發(fā)生突變，革蘭氏染色表現(xiàn)為陰性，致病力會(huì)明顯降低，細(xì)菌形態(tài)也會(huì)發(fā)生改變，由本來(lái)的球狀可變?yōu)闂U狀。SS需要用含血的培養(yǎng)基培養(yǎng)18～24 h，在不同動(dòng)物的血平板上會(huì)出現(xiàn)不同種類的溶血環(huán)，如在馬血平板上出現(xiàn)β溶血環(huán)，在羊血平板上為α溶血環(huán)[4]。SS的生存能力較強(qiáng)，可在不同的適宜環(huán)境中長(zhǎng)期存在，其對(duì)常規(guī)消毒劑敏感，如使用氯仿等處理1～2 min即可滅菌。因此，豬場(chǎng)、屠宰廠要建立并健全消毒機(jī)制，保證全進(jìn)全出，有效降低該病的暴發(fā)。

2 毒力因子

SS2的致病力最強(qiáng)，其毒力與毒力因子密切相關(guān)，包括莢膜多糖(CPS)、溶血素(SLY)、胞外因子( EF)、谷氨酸脫氫酶( GDH)、溶菌酶釋放蛋白(MRP)、3一磷酸甘油醛脫氫酶( GAPDH )、ORF2毒力因子等[5]。其中，CPS是唯一被證實(shí)的，CPS的缺失或突變會(huì)直接影響SS2的毒力強(qiáng)弱。CPS的特異性可用于SS的血清型鑒定和PCR特異性引物設(shè)計(jì)，可用于臨床診斷和流行病學(xué)調(diào)查。

3 發(fā)病機(jī)理

SS可通過(guò)傷口感染或消化道傳播，其自然感染部位主要是在扁桃體。SS經(jīng)扁桃體后進(jìn)入血液循環(huán)，被單核細(xì)胞吞噬并轉(zhuǎn)移至大腦-中樞神經(jīng)系統(tǒng)，在傳遞過(guò)程中，細(xì)菌會(huì)與脈絡(luò)膜叢上皮細(xì)胞發(fā)生相互作用。SS可刺激巨噬細(xì)胞或單核細(xì)胞產(chǎn)生毒素和相關(guān)細(xì)胞因子，在血液或腦脊液中造成炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，引起菌血癥。SS還可在呼吸道大量繁殖增殖，破壞上皮細(xì)胞的保護(hù)屏障，引起肺部病變，同時(shí)利于SS通過(guò)血液循環(huán)進(jìn)行全身性感染，出現(xiàn)全身性出血性敗血癥，可穿過(guò)血腦屏障(BBB)，引起腦水腫[6]。以上都是豬感染SS后的發(fā)病機(jī)理，目前，尚無(wú)法確定人患病后的致病機(jī)理，有待進(jìn)一步研究和探索。

4 流行病學(xué)

豬是SS的主要傳染源，該細(xì)菌廣泛存在于健康豬的呼吸道部位，正常情況下不發(fā)病，多為隱形攜帶者。發(fā)病豬會(huì)通過(guò)排泄物持續(xù)向外界排毒，SS可通過(guò)受損的皮膚、消化道或呼吸道感染健康豬群，潛伏期短則數(shù)小時(shí)，長(zhǎng)則1周[7]。各個(gè)年齡段的豬群都可發(fā)病，以低日齡的仔豬最易感，發(fā)病最為嚴(yán)重，很難救治。

豬鏈球菌病全年都可發(fā)生，不同地區(qū)略有差異，我國(guó)北方發(fā)病多集中于7-10月，南方是4-5月較為嚴(yán)重。禽、牛、犬等接觸發(fā)病豬后也不會(huì)發(fā)病，人對(duì)本病普遍易感，尤其是從事豬養(yǎng)殖和屠宰的工作人員，感染風(fēng)險(xiǎn)是普通人群的數(shù)千倍以上，多處于亞臨床感染狀態(tài)。

5 臨床癥狀

5.1 最急性型

豬突然發(fā)病且短時(shí)間內(nèi)死亡，無(wú)前驅(qū)癥狀，死前體溫明顯升高，皮膚發(fā)紫。

5.2 亞急性或慢性型

發(fā)病豬未及時(shí)治療或治療不徹底多會(huì)轉(zhuǎn)為亞急性型或慢性型，臨床表現(xiàn)以各組織、器官的炎癥為主，癥狀較為緩和，病程較長(zhǎng)。

5.3 急性敗血型

該型發(fā)病突然，癥狀明顯且嚴(yán)重，病程較短，病死率高達(dá)80%以上。臨床表現(xiàn)主要為稽留熱，精神沉郁，厭食，身體各部位有明顯的充血、紫斑等癥狀，可視黏膜潮紅，口鼻內(nèi)有黏液液體流出，后期表現(xiàn)為后肢無(wú)力，無(wú)法正常站立，呈犬坐式，呼吸困難，出現(xiàn)一系列的神經(jīng)癥狀[8]。

5.4 腦膜腦炎型

該型的病豬癥狀主要表現(xiàn)在腦部，腦充血、出血、溢血，少數(shù)病豬還會(huì)出現(xiàn)腦積液。

6 診斷

6.1 鏡檢

無(wú)菌采集病豬的組織或器官，涂片后進(jìn)行革蘭氏染色，在顯微鏡下觀察其菌體形態(tài)和排列方式[9]。

6.2 分離培養(yǎng)與生化鑒定

用接種環(huán)取少量病料劃線接種于添加有血清的改良培養(yǎng)基，在37℃ 的恒溫條件下培育18～24 h，應(yīng)長(zhǎng)出直徑細(xì)小、邊緣整齊、光滑圓潤(rùn)的灰白色或透明的菌落，有溶血環(huán)。挑取單菌落進(jìn)行液體搖菌培養(yǎng)，用生化試管試劑盒進(jìn)行生化特性鑒定，應(yīng)符合其所對(duì)應(yīng)的生化特性標(biāo)準(zhǔn)。

6.3 ELISA法

用SS的莢膜多糖進(jìn)行抗原包被，2%的明膠封閉，檢測(cè)待檢血清，操作簡(jiǎn)單，但存在一定的交叉反應(yīng)，特異性較差。改良后的雙抗夾心法特異性好，結(jié)果更為準(zhǔn)確。

6.4 PCR檢測(cè)

針對(duì)SS的cps和epf基因設(shè)計(jì)特異性的引物，建立多重PCR進(jìn)行SS的樣品檢測(cè)，特異性強(qiáng)，敏感性好，可用于大量臨床樣品的檢測(cè)，有助于流行病學(xué)調(diào)查[10]。

7 防治

SS對(duì)大多數(shù)抗生素都較為敏感，可以先對(duì)分離得到的菌株進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室的藥敏試驗(yàn)，選擇敏感的藥物進(jìn)行臨床治療，在進(jìn)行藥物治療的過(guò)程中要保證劑量充足，連續(xù)用藥，確保徹底治愈。雖然使用敏感性的抗生素可以起到較好的治療效果，但長(zhǎng)期使用會(huì)導(dǎo)致SS產(chǎn)生嚴(yán)重的耐藥性，容易產(chǎn)生多重耐藥菌株，嚴(yán)重的會(huì)突變出超級(jí)細(xì)菌。因此，針對(duì)本病，選用合適的藥物對(duì)癥治療是一方面，重點(diǎn)還應(yīng)放于防控工作，主要包括以下幾個(gè)方面。

(1)豬場(chǎng)要建立健全防控和消毒工作，消毒必須徹底，保證圈舍全進(jìn)全出，適當(dāng)通風(fēng)，尤其是在寒冷季節(jié)。

(2)豬場(chǎng)要確保飼料的質(zhì)量，日糧搭配要合理，杜絕使用霉變飼料。

(3)在引進(jìn)外來(lái)種豬時(shí)，進(jìn)行嚴(yán)格的隔離檢疫，至少要觀察15 d以上，確定無(wú)外來(lái)病原后方可入群飼養(yǎng)。

(4)豬群的飼養(yǎng)密度要保持在合理范圍內(nèi)，盡可能的減少豬群間的交叉感染，一旦出現(xiàn)病豬，要及時(shí)隔離，對(duì)其所在的圈舍，包括用具、食槽等進(jìn)行嚴(yán)格消毒。

(5)對(duì)于病死豬要進(jìn)行焚燒或深埋，嚴(yán)禁進(jìn)行屠宰，防治二次污染。

(6)疫苗預(yù)防是主要的防控措施，國(guó)內(nèi)的疫苗有多價(jià)滅活苗、弱毒凍干苗等，按照免疫程序進(jìn)行免疫接種，可以起到很好的免疫保護(hù)效果。

參考文獻(xiàn)

[1]張秀芬. 淺談豬鏈球菌病的診斷與防制措施[J]. 豬業(yè)觀察, 2006(10):19-20.

[2] 黃毓茂, 黃引賢. 2型豬鏈球菌病的初步研究[J]. 中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào), 1993(5):1-3.

[3] 何孔旺, 倪艷秀, 王繼春,等. 豬鏈球菌2型的分子流行病學(xué)研究[J]. 中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào), 2002, 18(5):45-47.

[4] 何孔旺, 陸承平. 豬鏈球菌2型的致病特性與毒力因子[J]. 中國(guó)獸醫(yī)科學(xué), 2000, 30(9):17-20.

[5] Charland N, Nizet V, Rubens C E, et al. Streptococcus suis Serotype 2 Interactions with Human Brain Microvascular Endothelial Cells[J]. Infection & Immunity, 2000, 68(2):637-643.

[6] 唐家琪, 楊瑞馥. 2型豬鏈球菌致病機(jī)理的研究進(jìn)展[D].湖北:2007年中國(guó)微生物學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì), 2009.

[7] 吳超. 豬鏈球菌流行病學(xué)特征和hp0197基因多態(tài)性研究[D].湖北:華中農(nóng)業(yè)大學(xué), 2013.

[8] 何宏魁, 孫小美, 康超,等. 豬鏈球菌流行病學(xué)及其耐藥性研究[C]// 全國(guó)微生物資源學(xué)術(shù)暨國(guó)家微生物資源平臺(tái)運(yùn)行服務(wù)研討會(huì)會(huì)議. 2011.

[9] 牛桂玲, 徐淑華, 殷國(guó)良. 豬鏈球菌病的診斷和防治[J]. 中國(guó)獸醫(yī)雜志, 2001, 37(12):24-25.

[10] 劉紅露, 張守印, 楊小蓉,等. 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)診斷2型豬鏈球菌[J]. 預(yù)防醫(yī)學(xué)情報(bào)雜志, 2005, 21(4):388-390.