鹿茸在神經(jīng)性疾病治療中的作用

李晶峰，金 平，邊學(xué)峰，閆 偉，張 輝

（長春中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)藥與生物工程研發(fā)中心，長春 130117）

目前，鹿茸研究已進(jìn)入分子生物學(xué)階段，這對現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域神經(jīng)修復(fù)、再生醫(yī)學(xué)、器官退化與生長因子研究產(chǎn)生深遠(yuǎn)的影響。鹿茸豐富的氨基酸、多肽和蛋白質(zhì)是發(fā)揮生物活性的主要物質(zhì)[1-2]，鹿茸肽可能是治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的一種新物質(zhì)。

1 促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞的生長和分化

利用神經(jīng)干細(xì)胞技術(shù)治療神經(jīng)損傷疾病已成為一種可行的治療方法[3]。鹿茸肽已被報(bào)道能促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞的生長和分化，特別是神經(jīng)組織的發(fā)育。在鹿茸多肽培養(yǎng)基中培養(yǎng)成年大鼠三叉神經(jīng)細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)了幾個神經(jīng)軸突生長促進(jìn)劑，包括可溶性蛋白如神經(jīng)生長因子（NGF）和載脂蛋白A-1，以及細(xì)胞外基質(zhì)蛋白如骨膜和SPARC。體外分析確定骨膜和NGF之間的協(xié)同關(guān)系可能有助于鹿茸對神經(jīng)突起生長的促進(jìn)作用，綜合這些因素可能會促進(jìn)周圍神經(jīng)病變的患者周圍神經(jīng)高速再生[4]。研究[5]發(fā)現(xiàn)從E12-14大鼠腦組織中分離神經(jīng)干細(xì)胞，培養(yǎng)7 d，直到神經(jīng)干細(xì)胞聚集，產(chǎn)生神經(jīng)球。在不同濃度鹿茸肽的條件下培養(yǎng)神經(jīng)球，免疫細(xì)胞化學(xué)檢測神經(jīng)干細(xì)胞的分化，結(jié)果顯示鹿茸肽能顯著促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞的分化，大部分神經(jīng)干細(xì)胞在一定濃度的鹿茸肽作用下誘導(dǎo)分化為神經(jīng)元方向，為神經(jīng)系統(tǒng)的再生提供依據(jù)。有實(shí)驗(yàn)表明[6]在不同濃度鹿茸多肽培養(yǎng)基中培養(yǎng)大鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)干細(xì)胞，培養(yǎng)24 h發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的細(xì)胞核分裂，7 d后一些細(xì)胞延伸樹突突起并形成一個網(wǎng)絡(luò)。神經(jīng)元的特點(diǎn)是具有神經(jīng)元的形態(tài)結(jié)構(gòu)，能分泌NGF和膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（GDNF），表達(dá)特異性蛋白神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）。鹿茸多肽培養(yǎng)細(xì)胞與對照組NSE免疫組化水平的差異表明鹿茸多肽能促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞向神經(jīng)元分化。

當(dāng)神經(jīng)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)1 d時，可以停止細(xì)胞的生長，當(dāng)5%以上血清培養(yǎng)時，鹿茸肽可增加神經(jīng)干細(xì)胞的生長，當(dāng)2%～5%血清培養(yǎng)時，NSE可使神經(jīng)干細(xì)胞向神經(jīng)元分化。通過酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測定了培養(yǎng)基中的因子，并且通過免疫熒光染色檢測了特殊的神經(jīng)分子，在分化的神經(jīng)元中可以檢測到神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子、神經(jīng)生長因子等特殊因子[7]。鹿茸多肽的含藥血清可促進(jìn)肌源性干細(xì)胞的顯著增殖和向類雪旺細(xì)胞（雪旺細(xì)胞可以分泌多種神經(jīng)營養(yǎng)因子）分化，鹿茸多肽和肌源性干細(xì)胞的結(jié)合可對損傷的周圍神經(jīng)進(jìn)行修復(fù)[8]。

2 相關(guān)疾病

2.1 帕金森 帕金森?。≒D）是中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，其特征在于黑質(zhì)、紋狀體區(qū)中的多巴胺能神經(jīng)元進(jìn)行性退化，多巴胺含量降低。左旋多巴通常被用作多巴胺治療藥物。 首烏方（含鹿茸）能減緩左旋多巴的消除，增加血中的吸收量，減少藥物濃度的波動。首烏方與左旋多巴合用可使細(xì)胞外液多巴胺濃度長時間維持在較高水平，減少多巴胺水平的波動，這種協(xié)同作用與首烏方對左旋多巴藥代動力學(xué)的影響密切相關(guān)[9]。口服鹿茸蛋白能夠在一定程度上減輕多巴胺能神經(jīng)元的損傷，實(shí)現(xiàn)對腦脊液中多巴胺和5-羥色胺代謝水平的改善，并能使腦組織中多巴胺和5-羥色胺的含量增加。鹿茸蛋白能將模型大鼠腦脊液與腦組織中興奮性氨基酸（谷氨酸）的含量降低。鹿茸蛋白的應(yīng)用可以不同程度的使腦脊液或腦組織紋狀體內(nèi)多巴胺、二羥苯乙酸、高香草酸、5-羥色胺等神經(jīng)遞質(zhì)的含量及其代謝水平得到恢復(fù)，進(jìn)而達(dá)到治療PD的目的[10]。

2.2 輕度認(rèn)知功能障礙 鹿茸多肽可以改善輕度認(rèn)知障礙大鼠行為學(xué)指標(biāo)，如鹿茸多肽組大鼠跳臺回避反應(yīng)與模型組（輕度認(rèn)知障礙）比較，錯誤次數(shù)明顯減少；水迷宮實(shí)驗(yàn)表明，鹿茸多肽組大鼠逃避潛伏期不同程度的縮短，單位時間內(nèi)穿過平臺所在位置次數(shù)、有效區(qū)停留時間明顯增加，表明鹿茸多肽對大鼠學(xué)習(xí)記憶能力有一定的改善作用[11]。

2.3 腦缺血 鹿茸多肽在腦缺血/再灌注（I/R）誘導(dǎo)的大腦缺血模型中可顯著降低腦梗塞面積，抑制腦水腫，減少神經(jīng)功能缺損，可降低丙二醛（MDA）含量，恢復(fù)血清和腦組織超氧化物歧化酶（SOD）活性。蛋白質(zhì)印跡實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明， PAP上調(diào)Nrf-2和HO-1的表達(dá)，阻斷了IKKα和IKKβ激酶的磷酸化，抑制IκBα、NF-κBp65的表達(dá)。推測PAP通過調(diào)節(jié)Nrf-2、HO-1 /NF-κB通路有效減輕I/R誘導(dǎo)的腦缺血引起的神經(jīng)功能損傷[12]。

2.4 阿爾茲海默癥 阿爾茨海默癥（老年癡呆癥）患者腦部的Tau蛋白異常，表現(xiàn)為過度磷酸化，每分子Tau蛋白含5～9個磷酸基，導(dǎo)致正常生物功能喪失。磷酸化Tau蛋白的表達(dá)呈棕黃色顆粒，鹿茸多肽組與模型組（岡田酸損傷）比較，細(xì)胞中棕黃色顆粒明顯減少，且各濃度鹿茸多肽組細(xì)胞中Tau蛋白、Tau mRNA表達(dá)水平明顯降低，鹿茸多肽組細(xì)胞中Bcl-2、 Bcl-2mRNA表達(dá)水平明顯升高[13]，鹿茸多肽可明顯抑制β淀粉樣蛋白誘導(dǎo)的脊髓神經(jīng)元細(xì)胞凋亡現(xiàn)象，使caspase-3、caspase-3mRNA的表達(dá)量下降[14]。推測鹿茸多肽是通過抑制Tau過度磷酸化與上調(diào)Bcl-2、下調(diào)caspase-3的表達(dá)對神經(jīng)細(xì)胞損傷起到保護(hù)作用。孟令文[15]對鹿茸瑪咖藥的乙酰膽堿酯酶活性部位進(jìn)行篩選，乙酸乙酯層具有抑制乙酰膽堿酯酶活性，有抗老年癡呆的潛在作用，并推測出兩個鹿茸寡肽結(jié)構(gòu)。李志成[16]對鹿茸韭菜子藥的乙酰膽堿酯酶抑制活性進(jìn)行配伍研究，各樣品組均具有活性，其中鹿茸總寡肽為鹿茸有效組分。

3 小結(jié)

目前，在臨床上有多種中藥用于治療神經(jīng)相關(guān)疾病。通過對多種中藥及其活性成分的體內(nèi)外篩選，證實(shí)了中藥在多方面對神經(jīng)干細(xì)胞均有不同程度的作用[17]，鹿茸肽可以促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞的生長發(fā)育，誘導(dǎo)神經(jīng)干細(xì)胞分化為神經(jīng)元，并能抑制神經(jīng)元凋亡，對神經(jīng)細(xì)胞損傷的修復(fù)也有很好的效果，鹿茸蛋白可以不同程度的使神經(jīng)遞質(zhì)的含量及其代謝

水平得到恢復(fù)，具有促進(jìn)神經(jīng)損傷修復(fù)新藥的潛能。

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