農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留檢測(cè)能力驗(yàn)證問(wèn)題和技巧分析

張建忠 吳 瑤 周沫瑤

（江蘇省儀征市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢測(cè)中心，江蘇儀征 211400）

1 農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留檢測(cè)能力驗(yàn)證的準(zhǔn)備工作

1.1 人員檢測(cè)人員具備農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)的能力，具備上崗證書(shū)，選擇專(zhuān)業(yè)技術(shù)水平較高、試驗(yàn)操作技能強(qiáng)、工作態(tài)度好的人員參加能力驗(yàn)證工作。同時(shí)領(lǐng)導(dǎo)要重視，至少有兩三人協(xié)同進(jìn)行檢測(cè)，主要和關(guān)鍵步驟應(yīng)由同一人操作，檢測(cè)全過(guò)程及關(guān)鍵步驟需由另一人監(jiān)督和確認(rèn)，遇到疑問(wèn)要沉著應(yīng)對(duì)、團(tuán)結(jié)協(xié)作、群策群力。

1.2 設(shè)備儀器設(shè)備必須是檢定合格設(shè)備。調(diào)試至最佳狀態(tài)，因氣相色譜只有1臺(tái)，中途要換襯管、色譜柱，有機(jī)磷有時(shí)出峰不太穩(wěn)定，因此需先檢測(cè)有機(jī)磷后檢測(cè)菊酯類(lèi)，早開(kāi)機(jī)平衡。

1.3 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)能力驗(yàn)證前要及時(shí)采購(gòu)新的標(biāo)樣，配成單標(biāo)和混標(biāo)，提前上機(jī)檢測(cè)。最好與省農(nóng)檢中心采購(gòu)相同單位生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。

1.4 玻璃器皿和試劑耗材三角瓶、刻度試管、高型燒杯、刻度試管和容量瓶等，色譜純乙腈、丙酮、正己烷、甲醇和二氯甲烷等，以及Florisil固相萃取小柱、氨基固相萃取小柱。

1.5 操練通過(guò)添加回收試驗(yàn)，確保儀器設(shè)備、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、檢測(cè)方法等檢測(cè)全過(guò)程沒(méi)有問(wèn)題，發(fā)現(xiàn)問(wèn)題可提前解決。能力驗(yàn)證時(shí)即可沉著應(yīng)對(duì)。

2 能力驗(yàn)證檢測(cè)基本流程

一是領(lǐng)樣品，領(lǐng)回考核樣品后靜置一段時(shí)間。二是取空白樣和一個(gè)考核樣進(jìn)行前處理并上機(jī)檢測(cè)。三是初步定性和定量（圖譜分析），即配置每種農(nóng)藥選擇一種濃度的混合農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液，判斷樣品中含有哪幾種農(nóng)藥，根據(jù)峰高和峰面積推算出農(nóng)藥的含量。四是根據(jù)定性結(jié)果配置對(duì)應(yīng)農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)曲線。五是質(zhì)量控制。根據(jù)推算的含量，確定質(zhì)控樣品加標(biāo)濃度。六是定量。對(duì)2個(gè)平行樣和質(zhì)控樣進(jìn)行前處理并上機(jī)檢測(cè)，數(shù)據(jù)分析得出目標(biāo)農(nóng)藥的濃度。

3 能力驗(yàn)證問(wèn)題和技巧

3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線要求曲線全覆蓋農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)曲線配置，不需要配置所有農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)曲線，可以根據(jù)初步定性的結(jié)果，配置對(duì)應(yīng)農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)曲線，標(biāo)準(zhǔn)曲線至少5個(gè)點(diǎn)，而且要覆蓋樣品濃度，濃度范圍不易過(guò)窄，可以參考農(nóng)藥的限量值，高濃度點(diǎn)是限量值的5～10倍，低濃度點(diǎn)是限量值的1/10。

3.2 凈化過(guò)程出現(xiàn)的問(wèn)題在氣相色譜測(cè)定菊酯類(lèi)農(nóng)藥、液相色譜測(cè)定吡蟲(chóng)啉和多菌靈農(nóng)藥過(guò)程中都需要凈化。一方面注意凈化要完全，防止部分農(nóng)藥未被完全洗脫，可以加大洗脫液的用量，如液相色譜測(cè)定多菌靈回收率偏低，原因就是凈化過(guò)程中洗脫不完全，后增加洗脫液用量至10mL，回收率正常；另一方面比較不同公司凈化柱的凈化效果，筆者發(fā)現(xiàn)不同公司去除色素等雜質(zhì)效果有區(qū)別，部分公司同一批次產(chǎn)品質(zhì)量不一致。選擇高質(zhì)量品牌的凈化柱，去除不必要的干擾，可更準(zhǔn)確地對(duì)農(nóng)藥進(jìn)行定性鑒別或定量測(cè)定。

3.3 能力驗(yàn)證定性過(guò)程中出現(xiàn)的問(wèn)題出峰時(shí)間相近的農(nóng)藥都應(yīng)單獨(dú)配置標(biāo)準(zhǔn)溶液，同時(shí)通過(guò)軟件解析，進(jìn)行圖譜比對(duì)，仔細(xì)鑒別。例如，殺螟硫磷、馬拉硫磷、對(duì)硫磷出峰時(shí)間相近，要仔細(xì)鑒別，甲基對(duì)硫磷和馬拉硫磷出峰時(shí)間相近，同時(shí)檢出，漏報(bào)馬拉硫磷。

3.4 能力驗(yàn)證定量過(guò)程中出現(xiàn)的問(wèn)題菊酯類(lèi)農(nóng)藥很多都有同分異構(gòu)體，如氯氟氰菊酯等，如果與考核機(jī)構(gòu)購(gòu)買(mǎi)完全一致的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)時(shí)，可以用其中一個(gè)或多個(gè)峰積分計(jì)算結(jié)果，如果不一致，用其中一個(gè)峰計(jì)算可能導(dǎo)致結(jié)果出錯(cuò)，因不同檢測(cè)機(jī)構(gòu)的同分異構(gòu)體比例可能不一樣，所以需要各組分加和積分，結(jié)果才準(zhǔn)確。

3.5 圖譜保留時(shí)間存在的問(wèn)題液相樣品保留時(shí)間2min以內(nèi)，肯定不對(duì)，都是雜峰，液相檢測(cè)樣品至少30min以上。氣相色譜ECD檢測(cè)時(shí)間20min太短，正常45min，防止上下樣品出峰重疊，程序升溫過(guò)程中避開(kāi)樣品出峰時(shí)間。有的圖譜縱坐標(biāo)設(shè)置太大，峰看起來(lái)太小。

3.6 結(jié)果輸出注意事項(xiàng)3個(gè)平行樣相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差過(guò)大的，肯定錯(cuò)誤，至少小于15%。3個(gè)平行樣并非完全一致的樣品，有時(shí)把平行樣認(rèn)為是完全相同的樣品，選擇多次測(cè)定中最相近的數(shù)據(jù)也是錯(cuò)誤的。材料裝訂要有序，必須要有圖譜，一般包含能力驗(yàn)證結(jié)果上報(bào)表、標(biāo)準(zhǔn)曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線單點(diǎn)圖譜、樣品圖譜等材料。

4 能力驗(yàn)證過(guò)程中的質(zhì)量控制

4.1 氣相色譜測(cè)定中的質(zhì)量控制氣相色譜測(cè)定有機(jī)磷類(lèi)或菊酯類(lèi)農(nóng)藥殘留，有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥基質(zhì)效應(yīng)明顯，必須用相同基質(zhì)農(nóng)藥配置標(biāo)準(zhǔn)溶液，菊酯類(lèi)農(nóng)藥不需要。配置標(biāo)準(zhǔn)溶液時(shí)，應(yīng)選擇相同的基質(zhì)配置標(biāo)準(zhǔn)溶液。制備質(zhì)量控制樣時(shí)，可根據(jù)初步定性和定量的結(jié)果，在自行采購(gòu)的與考核樣相同的蔬菜中添加相近濃度的農(nóng)藥制備質(zhì)控樣，采購(gòu)的蔬菜最好不含有農(nóng)藥。

4.2 液相色譜測(cè)定中的質(zhì)量控制液相色譜對(duì)質(zhì)控樣基質(zhì)匹配要求更嚴(yán)，必須選擇完全相同的空白樣品做添加回收試驗(yàn)，可提供空白樣品需要完成多項(xiàng)檢測(cè)，所以可以選擇吸取部分空白提取液做添加回收試驗(yàn)，可根據(jù)初步定性和定量的結(jié)果，取考核空白樣靜置的分層的乙腈10mL，添加相近濃度的農(nóng)藥制備質(zhì)控樣，將質(zhì)控樣和考核樣品中另外2個(gè)平行樣一起進(jìn)行前處理操作、上機(jī)。