OPN與VEGF在子宮腺肌病中的表達(dá)及意義

崔艷萍+薛潔好+劉群英

【摘要】 目的：檢測(cè)骨橋蛋白（osteopontin，OPN）及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）在子宮腺肌病病灶、子宮腺肌病在位內(nèi)膜、正常子宮肌層及正常子宮內(nèi)膜中的表達(dá)，從而探討OPN、VEGF在子宮腺肌病發(fā)生與發(fā)展中的作用及兩者的相關(guān)性。方法：采用免疫組織化學(xué)方法（S-P法）檢測(cè)50例子宮腺肌病患者子宮腺肌病病灶、在位內(nèi)膜及50例子宮肌瘤患者正常子宮肌層及正常子宮內(nèi)膜中的OPN與VEGF的PU值。比較兩組間OPN與VEGF表達(dá)水平差異。結(jié)果：OPN、VEGF在腺肌病在位內(nèi)膜分泌期中的PU值高于增生期（P<0.05）；OPN、VEGF在腺肌病在位內(nèi)膜增生期與分泌期的PU值均高于在正常內(nèi)膜增生期與分泌期的PU值（P<0.05）。OPN、VEGF在子宮腺肌病中的表達(dá)經(jīng)Pearson積差相關(guān)分析，無(wú)相關(guān)關(guān)系（r=0.014，P=0.920）。結(jié)論：OPN與VEGF在子宮腺肌病異位內(nèi)膜及在位內(nèi)膜中的過(guò)度表達(dá)，兩者可能參與了子宮腺肌病的發(fā)生與發(fā)展過(guò)程。OPN與VEGF兩者在子宮腺肌病中的表達(dá)無(wú)相關(guān)性，表明兩者在子宮腺肌病的發(fā)生與發(fā)展過(guò)程中可能各自獨(dú)立起到調(diào)控作用。

【關(guān)鍵詞】 子宮腺肌??； 骨橋蛋白； 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子

【Abstract】 Objective：To detect the expression of osteopontin（OPN） and vascular endothelial growth factor（VEGF） in adenomyosis focus，eutopic endometrium of adenomyosis，normal myometrium and normal endometrium to discuss the effect of OPN and VEGF in the occurrence and development of adenomyosis and the correlation between OPN and VEGF.Method：Immunohistochemical method（S-P method） was used to detect PU value of OPN and VEGF in adenomyosis focus，eutopic endometrium of adenomyosis of 50 patients with adenomyosis，and normal myometrium and normal endometrium of 50 patients with uterine fibroid.The differences regarding OPN and VEGF expression levels between two groups were compared.Result：PU value of OPN and VEGF in the proliferative and secretory phase of eutopic endometrium of adenomyosis was higher than that in normal proliferative phase，and the difference was significant （P<0.05）.PU values of OPN and VEGF in the proliferative and secretory phase of eutopic endometrium of adenomyosis were higher than those in the normal endometrial proliferative and secretory phase，there was a significant difference between two groups（P<0.05）.The expression of OPN and VEGF in adenomyosis was analyzed by Pearsons product-moment correlation analysis.There was no correlation （r=0.014，P=0.920）.Conclusion：The overexpression of OPN and VEGF in ectopic endometrium and eutopic endometrium of adenomyosis may be involved in the occurrence and development of adenomyosis.There is no correlation between OPN and VEGF in the expression of adenomyosis，indicating that both could play an independent role in the occurrence and development of adenomyosis.

【Key words】 Adenomyosis； Osteopontin； Vascular endothelial growth factor

First-authors address：Qingyuan Maternity & Child Healthcare Hospital，Qingyuan 511500，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2018.02.002

子宮腺肌?。╝denomyosis）是子宮內(nèi)膜細(xì)胞向肌層良性浸潤(rùn)的雌激素依賴性疾病。子宮腺肌病雖為一種“良性疾病”，但表現(xiàn)出的“侵襲、轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)”卻是惡性腫瘤所表現(xiàn)出的生物學(xué)行為，不容輕視，其發(fā)病率年輕化并且呈上升趨勢(shì)。目前許多研究表明雖發(fā)現(xiàn)有多種因素導(dǎo)致子宮腺肌病發(fā)病，但是相關(guān)研究理論對(duì)其很難做出較為理想的解釋。因此，目前臨床上對(duì)于子宮腺肌病的真正致病機(jī)制尚且沒(méi)有統(tǒng)一、明確的理論說(shuō)明。本研究通過(guò)免疫組織化學(xué)方法（S-P法）檢測(cè)骨橋蛋白（osteopontin，OPN）及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）在子宮腺肌病的異位內(nèi)膜、在位內(nèi)膜及正常內(nèi)膜中表達(dá)的PU值，探討OPN與VEGF的相關(guān)性，揭示OPN與VEGF在子宮腺肌病疾病發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的作用?，F(xiàn)報(bào)道如下。endprint

1 資料與方法

1.1 一般資料 此次研究選擇在本院住院擇期行手術(shù)治療的50例子宮腺肌病患者作為研究組，病例的納入時(shí)間為2014年1月-2016年12月，另選取同時(shí)期內(nèi)在本院進(jìn)行手術(shù)治療的50子宮肌瘤患者為對(duì)照組。參與本次研究的所有患者入院后均進(jìn)行腹腔鏡檢查，且經(jīng)病理學(xué)檢查，檢查后確診。并且，本次研究的100例患者中均無(wú)糖尿病、高血壓、腎病等慢性病史，均未接受免疫藥物及甾體類激素等治療。

1.2 方法

1.2.1 研究標(biāo)本分組如下：

1.2.2 所有標(biāo)本收集、石蠟切片制作及實(shí)驗(yàn)方法 所有標(biāo)本子宮切除后“Y”字形切開(kāi)子宮前壁或后壁子宮肌層至子宮腔。研究組標(biāo)本：切取腺肌病病灶（大小1 cm×1 cm×1 cm）、位內(nèi)膜（大小1 cm×1 cm×0.5 cm）；對(duì)照組標(biāo)本：距離肌瘤邊緣2 cm以外切取正常子宮肌層（大小1 cm×1 cm×1 cm）、子宮內(nèi)膜（大小1 cm×1 cm×0.5 cm）。制成石蠟塊后對(duì)每個(gè)制作標(biāo)本連續(xù)切成三片，每個(gè)標(biāo)本的切片厚度為4 μm。其中，第一張標(biāo)本使用HE進(jìn)行染色處理，通過(guò)染色確定病理診斷，子宮內(nèi)膜組織切片，通過(guò)病理組織進(jìn)行增生期診斷和分泌期診斷。另外兩張均采用免疫組織化學(xué)方法進(jìn)行檢測(cè)，分別對(duì)樣本組織的OPN、VEGF進(jìn)行檢測(cè)。完成上述操作后，將石蠟切片放在恒溫箱內(nèi)進(jìn)行烤片，使組織標(biāo)本與載玻片緊密貼合在一起，避免石蠟切片脫落。放入恒溫箱后，設(shè)定恒溫箱的溫度，溫度設(shè)定為70 ℃，放置0.5 h。

1.2.3 實(shí)驗(yàn)試劑 本次研究使用福州邁新公司生產(chǎn)銷售的兔抗人OPN單克隆抗體（抗體效價(jià)1∶100）為主要試劑產(chǎn)品，產(chǎn)品編號(hào)為sd-148，本研究使用的兔抗人VEGF多克隆抗體（即用型抗體）是由福州邁新公司提供的（產(chǎn)品編號(hào)：RAB-0157）。DAB顯色液試劑盒購(gòu)自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。

1.2.4 技術(shù)路線 技術(shù)路線如下：

1.2.5 HE染色切片結(jié)果判斷

1.2.5.1 子宮腺肌病病灶 對(duì)HE染色切片情況和內(nèi)膜中腺體的表現(xiàn)情況進(jìn)行觀察，重點(diǎn)觀察兩者是否存在不同步的問(wèn)題，從子宮肌層中可以看到島狀的子宮內(nèi)膜腺體和子宮內(nèi)膜間質(zhì)分布，伴有暗紅色的出血量，但難以準(zhǔn)確鑒別子宮內(nèi)膜腺體是分泌期或增生期，見(jiàn)圖1。

1.2.5.2 正常子宮肌層 HE染色下，切片組織中可見(jiàn)平滑肌束和結(jié)締組織，組織肌層出現(xiàn)漿膜下層、中間層和黏膜下層，其中，中間層的厚度相對(duì)大于其他漿膜和黏膜下層，而兩個(gè)下層組織表現(xiàn)出縱行平滑肌束，血管斷面頗為豐富，見(jiàn)圖2。

1.2.5.3 子宮內(nèi)膜增生期 HE染色下，兩組患者的病理組織結(jié)構(gòu)并不存在顯著差異，間質(zhì)組織的致密度較高，螺旋動(dòng)脈呈現(xiàn)主彎曲增長(zhǎng)的趨勢(shì)，且在動(dòng)脈上可以看到柱狀的腺上皮細(xì)胞，內(nèi)膜腺體的數(shù)量相對(duì)較多，生長(zhǎng)形態(tài)為彎曲，見(jiàn)圖3。

1.2.5.4 子宮內(nèi)膜分泌期 HE染色下，切片組織的腺腔內(nèi)有腺細(xì)胞分泌物，腺腔呈現(xiàn)出膨脹的狀態(tài)，內(nèi)膜的腺體呈現(xiàn)主不斷增大、彎曲的狀態(tài)。內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞增大，間質(zhì)組織有水腫性增大，螺旋小動(dòng)脈增長(zhǎng)，且呈現(xiàn)出彎曲狀態(tài)，見(jiàn)圖4。

1.2.6 實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定 OPN陽(yáng)性表達(dá)顏色為棕黃色，形態(tài)為顆粒狀，定位在內(nèi)膜細(xì)胞的細(xì)胞漿中，間質(zhì)細(xì)胞膜上的表達(dá)水平相對(duì)較低，且平滑肌細(xì)胞中不存在明確陽(yáng)性表達(dá)。在位內(nèi)膜增生期、在位內(nèi)膜分泌期、子宮腺肌病病灶以及上皮細(xì)胞膜中均有不同程度的表達(dá)水平（圖5、6、7）。VEGF陽(yáng)性表達(dá)顏色為黃色，形態(tài)為顆粒狀，主要定位在內(nèi)膜細(xì)胞的細(xì)胞漿中，與OPN的陽(yáng)性表達(dá)相同，間質(zhì)細(xì)胞膜上的表達(dá)水平相對(duì)較低。并且，在病灶、增生期、分泌期、正常增生及分泌期均有不同水平表達(dá)（圖8、9、10）。

本次研究中涉及的圖像均采用Leica QW550圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行分析，采用陽(yáng)性單位表達(dá)免疫組化結(jié)果，用來(lái)表達(dá)反應(yīng)免疫組化的陽(yáng)性表達(dá)水平。具體如下：選擇進(jìn)行免疫組織化學(xué)法測(cè)定的切片組織進(jìn)行隨機(jī)測(cè)試，測(cè)試共包括五個(gè)視場(chǎng)，每個(gè)視場(chǎng)需要測(cè)定的細(xì)胞為20個(gè)。將切片標(biāo)本自身存在的影響因素取出，根據(jù)圖像的灰度對(duì)其進(jìn)行分級(jí)，共分為256個(gè)等級(jí)，所分的每一個(gè)等級(jí)代表一個(gè)陽(yáng)性表達(dá)單位，陽(yáng)性值與陽(yáng)性反應(yīng)程度呈現(xiàn)正比例的關(guān)系。由圖像分析系統(tǒng)對(duì)背景平均灰度值和待測(cè)結(jié)構(gòu)的灰度值進(jìn)行測(cè)定，最大值設(shè)置為256，具體計(jì)算方法如下：陽(yáng)性值=

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 本次研究涉及的所有數(shù)據(jù)均納入Excel表格和SPSS 13.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用（x±s）表示，兩兩比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用F檢驗(yàn)；變量相關(guān)性數(shù)據(jù)采用Pearson積差相關(guān)分析。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組基線資料比較 觀察組50例患者，年齡35～70歲，平均（45.20±4.65）歲。對(duì)照組50例患者，年齡38～57歲，平均（46.54±5.23）歲。兩組患者一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 子宮腺肌病病灶與正常子宮肌層中OPN、VEGF的表達(dá)水平分析 在子宮腺肌病病灶和正常子宮肌層中均有OPN表達(dá)，兩者OPN表達(dá)陽(yáng)性值對(duì)比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。在子宮腺肌病病灶和正常子宮肌層中均有VEGF表達(dá)，兩者陽(yáng)性值對(duì)比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表1。

2.3 腺肌病病灶與在位內(nèi)膜增生期、分泌期中OPN及VEGF的表達(dá)情況 OPN在腺肌病在位內(nèi)膜增生期、分泌期表達(dá)陽(yáng)性值比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。腺肌病病灶中OPN與在位內(nèi)膜增生期表達(dá)的PU值比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），但與在位內(nèi)膜分泌期比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。VEGF在腺肌病在位內(nèi)膜增生期與分泌期表達(dá)的PU值比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；而腺肌病病灶中VEGF的陽(yáng)性表達(dá)與在位內(nèi)膜增生期、分泌期的PU值相比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表2。endprint

2.4 正常內(nèi)膜與在位內(nèi)膜增生期、分泌期的OPN及VEGF表達(dá)水平 正常內(nèi)膜增生期OPN陽(yáng)性表達(dá)的PU值明顯低于腺肌病在位內(nèi)膜增生期，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），正常內(nèi)膜分泌期OPN陽(yáng)性表達(dá)的PU值與腺肌病在位內(nèi)膜分泌期表達(dá)比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。相對(duì)于腺肌病在位內(nèi)膜增生期表達(dá)，正常內(nèi)膜增生期VEGF陽(yáng)性表達(dá)的PU值更低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），VEGF在正常內(nèi)膜分泌期的陽(yáng)性表達(dá)與在位內(nèi)膜分泌期相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表3。

2.5 OPN與VEGF的相關(guān)性 經(jīng)分析，OPN與VEGF在子宮腺肌病中的表達(dá)無(wú)明顯相關(guān)性（r=0.014，P=0.920>0.05），見(jiàn)圖11。

3 討論

子宮腺肌病是婦科臨床上的常見(jiàn)病，主要是在各種因素的作用和影響下，子宮內(nèi)膜間質(zhì)、子宮腺體出現(xiàn)侵入子宮肌層的情況，并呈現(xiàn)出彌漫性增長(zhǎng)趨勢(shì)。該病的首要癥狀主要表現(xiàn)為月經(jīng)過(guò)多、漸進(jìn)性痛經(jīng)、不孕不育，少數(shù)患者可能有性交痛的現(xiàn)象。近年來(lái)，子宮腺肌病的發(fā)病率呈現(xiàn)逐年遞增的發(fā)展趨勢(shì)，且以中年女性、經(jīng)產(chǎn)婦為主要患病人群，對(duì)廣大女性的身體健康和心理健康均造成了不同程度的負(fù)面影響。在子宮腺肌病患者中，約有25%的患者可能無(wú)明顯癥狀，診斷往往是在其他原因切除子宮后做病理檢查才得到診斷，導(dǎo)致此疾病的確切發(fā)病率不易統(tǒng)計(jì)[1]。子宮腺肌病的發(fā)病原因尚不清楚，異位子宮內(nèi)膜來(lái)源至今尚未闡明，有學(xué)者認(rèn)為機(jī)械性損傷是造成子宮肌層薄弱及子宮內(nèi)膜-子宮肌層連接帶出現(xiàn)病理改變導(dǎo)致子宮內(nèi)膜基底內(nèi)陷內(nèi)膜細(xì)胞向肌層浸潤(rùn)生長(zhǎng)的原因之一；其二有可能是女性卵巢功能失調(diào)導(dǎo)致發(fā)病，女性的卵巢功能失調(diào)，體內(nèi)的雌激素含量過(guò)多，可能會(huì)對(duì)子宮內(nèi)膜向子宮肌壁的生長(zhǎng)起到刺激性影響，在位內(nèi)膜細(xì)胞則會(huì)表現(xiàn)出更強(qiáng)的粘附性、浸潤(rùn)性、侵襲性，同時(shí)刺激血管形成；免疫學(xué)說(shuō)則認(rèn)為，免疫細(xì)胞數(shù)量功能異常，引起分泌細(xì)胞因子發(fā)生變化，免疫功能失衡或免疫調(diào)節(jié)異常是導(dǎo)致異位在子宮肌層內(nèi)的異位內(nèi)膜細(xì)胞繼續(xù)存活和異位種植的關(guān)鍵環(huán)節(jié)[2-3]。

OPN是一種分泌型磷酸化糖蛋白的組織細(xì)胞因子，參與細(xì)胞遷移粘附，介導(dǎo)細(xì)胞免疫應(yīng)答，抑制細(xì)胞凋亡、促進(jìn)細(xì)胞增殖、活躍新生血管形成而發(fā)揮其重要生物學(xué)功能[4]。VEGF是一種特異性最高的絡(luò)氨酸激酶受體蛋白的多肽類細(xì)胞因子，借助細(xì)胞間的介導(dǎo)傳遞功能，加速內(nèi)皮細(xì)胞的繁殖和生長(zhǎng)速度，對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖功能起到了刺激性作用，可誘導(dǎo)新生血管形成而發(fā)揮重要生物學(xué)功能[5]。

在此次研究中，子宮腺肌病病灶中的OPN、VEGF表達(dá)水平均高于正常子宮肌層，而腺肌病在位內(nèi)膜增生期中的OPN、VEGF PU值分別為（19.29±8.05）和（29.79±4.58），而在正常內(nèi)膜增生期中PU值分別為（11.41±4.36）和（16.58±6.47）；同樣OPN、VEGF在腺肌病在位內(nèi)膜分泌期中的PU值[（25.82±6.48）和（27.86±4.31）]明顯高于正常內(nèi)膜分泌期中PU值[（13.06±3.28）和（13.76±3.09）]，兩者比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。在位內(nèi)膜中OPN的表達(dá)上調(diào)促使子宮內(nèi)膜細(xì)胞侵入子宮肌層；機(jī)體自身存在一定的應(yīng)激機(jī)制，VEGF的介導(dǎo)或分泌是通過(guò)局部組織合成適當(dāng)缺氧誘導(dǎo)因子而進(jìn)行的，局部組織中會(huì)形成大量的新生血管，這些新生血管會(huì)重新排布，保障侵入肌層的子宮內(nèi)膜細(xì)胞具備充足營(yíng)養(yǎng)，這也就導(dǎo)致子宮內(nèi)膜上更容易出現(xiàn)種植、遷移和增值的現(xiàn)象，侵襲性更強(qiáng)，從某種程度上對(duì)子宮腺肌病的進(jìn)展起到了促進(jìn)作用[6-8]。此外，本次研究中還對(duì)宮腺肌病在位內(nèi)膜增生期與分泌期中的OPN表達(dá)情況進(jìn)行了系統(tǒng)化研究，從研究結(jié)果中可以看出，增殖期的OPN陽(yáng)性表達(dá)的PU值要低于分泌期。這說(shuō)明OPN陽(yáng)性表達(dá)在分泌期若出現(xiàn)上調(diào)，則會(huì)對(duì)相關(guān)細(xì)胞因子產(chǎn)生激活性作用，可能導(dǎo)致孕激素分泌量過(guò)多[9-12]。子宮內(nèi)膜增殖期向分泌期轉(zhuǎn)變，在此過(guò)程中，子宮內(nèi)膜細(xì)胞的特性會(huì)受到孕激素等因素的影響，受到影響后自然發(fā)生變化，遷移性和增值性也會(huì)明顯增強(qiáng)，這就導(dǎo)致分泌期內(nèi)膜細(xì)胞進(jìn)入子宮肌層的可能性更大，患者的患病率也就更高[13-15]。此外，在腺肌病在位內(nèi)膜增生期與分泌期的VEGF表達(dá)對(duì)比上，增值期的PU值為（29.79±4.58），而分泌期的PU值為（27.86±4.31），雖然兩個(gè)時(shí)期的PU值存在一些差異，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。通過(guò)對(duì)腺肌病病灶中VEGF的陽(yáng)性表達(dá)與在位內(nèi)膜增生期和分泌期中VEGF陽(yáng)性表達(dá)的PU值進(jìn)行分別對(duì)比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。從該結(jié)果中可以看出，增生期或分泌期，在位內(nèi)膜組織中VEGF均高于正常組織，出現(xiàn)此種結(jié)果的原因可能是在位內(nèi)膜中VEGF的表達(dá)上調(diào)，而子宮腺肌病是在內(nèi)膜間質(zhì)中，有新生血管，且原有血管進(jìn)行重新分布，這就導(dǎo)致子宮內(nèi)膜細(xì)胞的遷移速度不斷加快，為肌層浸潤(rùn)提供更多的可能性[16-20]。

在本組研究中，對(duì)OPN、VEGF與子宮腺肌病的相關(guān)性進(jìn)行了研究，但兩者在疾病的發(fā)生和進(jìn)展過(guò)程中是否存在協(xié)同作用，或者兩者是獨(dú)立發(fā)揮作用的，本研究中并未提及。本組研究結(jié)果顯示，雖然兩者的生物學(xué)功能相似性較高，但兩者之間并不存在明顯的相關(guān)性，說(shuō)明兩者在疾病的進(jìn)展過(guò)程中極有可能是獨(dú)立存在并發(fā)揮作用的，這與文獻(xiàn)[9-10]報(bào)道的研究結(jié)果存在異議，出現(xiàn)此種現(xiàn)象的原因可能是本次研究與以往報(bào)道中的原發(fā)病類型不同。因此，OPN與VEGF的相互作用及具體的機(jī)制仍需繼續(xù)研究。

參考文獻(xiàn)

[1]張巖，佟盛春，魏力，等.子宮內(nèi)膜腺癌中OPN和VEGF-C的表達(dá)及意義[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2013，23（33）：37-41.

[2] Liu N，Zhou C，Chen Y，et al.The involvement of osteopontin and β3 integrin in implantation and endometrial receptivity in an early mouse pregnancy model[J].European Journal of Obstetrics，Gynecology and Reproductive Biology：An International Journal，2013，170（1）：171-176.endprint

[3]陳曼詩(shī)，王冰，陳燦，等.子宮內(nèi)膜異位癥中OPN、VEGF的表達(dá)及意義[J].中國(guó)現(xiàn)代藥物應(yīng)用，2016，10（18）：30-31.

[4] Atala A.Re：Both osteopontin-c and osteopontin-b splicing isoforms exert pro-tumorigenic roles in prostate cancer cells[J].The Journal of Urology，2013，189（6）：2392-2392.

[5] Lin Y M，McKinnon K E，Ha S W，et al.Inorganic phosphate induces cancer cell mediated angiogenesis dependent on forkhead box protein C2（FOXC2） regulated osteopontin expression[J].Molecular Carcinogenesis，2015，54（9）：926-934.

[6]陳莉，王秋偉，虞斌，等.白細(xì)胞介素-1對(duì)子宮腺肌病內(nèi)膜微血管發(fā)生調(diào)節(jié)因子表達(dá)的影響[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2012，22（4）：40-44.

[7] Ramachandran S，Kwon K Y，Shin S J，et al.Regulatory role of osteopontin in malignant transformation of endometrial cancer[J].Molecular Biology Reports，2013，40（5）：3623-3629.

[8]劉志敏，申艷梅，劉素巧，等.血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子在子宮腺肌病患者內(nèi)膜-肌層界面的表達(dá)[J].天津醫(yī)藥，2013，41（9）：928-929.

[9]楊靜，楊蘇安，段智，等.CD44v6及VEGF在子宮腺肌病中的表達(dá)及意義[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2012，22（10）：52-55.

[10] Zhexiang Wang，Bin Sun，Min Zhang，et al.Functionalization of electrospun poly（s-caprolactone） scaffold with heparin and vascular endothelial growth factors for potential application as vascular grafts[J].Journal of Bioactive and Compatible Polymers，2013，28（2）：154-166.

[11] Wallace B K，Jelks K A，ODonnell M E.Ischemia-induced stimulation of cerebral microvascular endothelial cell Na-K-CI

cotransport involves p38 and JNK MAP kinases[J].American Journal of Physiology-Cell Physiology，2012，302（3）：C505-C517.

[12]伍靚，吳奇，李晶，等.COX-2、VEGF及MVD在宮頸癌中的表達(dá)及意義[J].海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2014，20（2）：172-176.

[13]張穎，劉艷霞，李靈燕，等.血漿骨橋蛋白水平變化對(duì)宮頸癌復(fù)發(fā)預(yù)測(cè)的價(jià)值[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2015，12（6）：44-46.

[14]施文瑤，錢(qián)小泉，鄭小丹，等.COX-2與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子在子宮腺肌病中的表達(dá)及相關(guān)性分析[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2014，24（18）：45-47.

[15]吳健波，刁力，閻其濤，等.血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子-C與基質(zhì)金屬蛋白酶-2在肺腺癌中表達(dá)的研究[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2011，8（12）：13-15.

[16]鄭芹林，王明明，李宗恒，等.子宮腺肌病組織中PRL-3、VEGF的表達(dá)變化及意義[J].山東醫(yī)藥，2013，53（34）：10-12.

[17]王小霞，康佳麗，邵雪飛，等.GnRHa對(duì)子宮腺肌病在位內(nèi)膜細(xì)胞凋亡及VEGF分泌的影響[J].細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志，2012，28（1）：72-75.

[18]王家美，肖淑蘭.COX-2和VEGF與子宮腺肌病的相關(guān)性[J].河北醫(yī)藥，2016，38（22）：3382-3384.

[19]賈晨陽(yáng)，段華，汪沙，等.子宮腺肌病EMI區(qū)VEGF與b-FGF的表達(dá)及其與MVD的相關(guān)性分析[J].中國(guó)計(jì)劃生育和婦產(chǎn)科，2017，9（4）：60-64，67.

[20]付先蕓，魏紹斌，馮婷婷，等.丹莪婦康煎膏對(duì)子宮腺肌瘤小鼠在位及異位內(nèi)膜MMP-2及VEGF表達(dá)的不同影響[J].中成藥，2013，35（11）：2523-2525.

（收稿日期：2017-08-03） （本文編輯：程旭然）endprint