雞的動(dòng)物疫病檢測方法

劉凱歌　陳培娟

摘 要：使用疫病檢測技術(shù)能夠促進(jìn)雞類養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展。基于此，本文闡述了雞的動(dòng)物疫病檢測方法，包括血清中和實(shí)驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)、熒光抗體等血清學(xué)檢測方法，同時(shí)，提出了核酸探針方法、熒光實(shí)時(shí)定量檢測方法、寡核苷酸指紋圖譜方法等分子生物學(xué)診斷方法，通過論述以上方法，為檢測人員提供一些參考。

關(guān)鍵詞：雞新城疫??；血清學(xué)檢測方法；分子生物學(xué)檢測方法

新城疫等疫病能夠威脅雞的生存，具有發(fā)病速度快、死亡率高、傳染性強(qiáng)等特點(diǎn)，是阻礙雞類養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展的主要原因。通過對新城疫等疫病進(jìn)行正確的診斷是控制疾病發(fā)展、蔓延的重要前提?，F(xiàn)如今，雞的疫病檢測方法主要包括血清學(xué)檢測方法及分子生物學(xué)檢測方法，通過研究這兩種檢測方法，對于防治雞疫病具有重要意義。

一、血清學(xué)檢測方法

1.酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)

酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)是現(xiàn)如今較為廣泛的檢測方法，是通過物理原理將血清中的抗體吸附在載體上，來實(shí)現(xiàn)免疫檢測。它具有靈敏、快速、簡便等優(yōu)點(diǎn)，將其應(yīng)用在新城疫病檢測中，能夠有效的檢測出疫病病毒。

2.熒光抗體方法

熒光抗體方法是將熒光性的染料結(jié)合抗體免疫球蛋白，成為標(biāo)記抗體，將此類抗體和相抗源結(jié)合，能夠發(fā)生特異性變化。此時(shí)用紫外線進(jìn)行照射，可以在顯微鏡下看到由抗原激發(fā)出來紅色或是藍(lán)色的光纖，確定感染源。熒光抗體方法具有簡單、便捷、準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)，可以用在快速檢測中。

二、分子生物學(xué)診斷方法

1.核酸探針方法

核酸探針方法是在獲得特異病毒片段基礎(chǔ)上，增加生物素，來作為一種分子雜交的檢測方法。其可以應(yīng)用在病毒原位雜交，來確定病毒的分布順序，同時(shí)，使用探針還能夠區(qū)分病毒的強(qiáng)弱，具有極高的應(yīng)用價(jià)值。

2.熒光實(shí)時(shí)定量檢測方法

熒光實(shí)時(shí)定量檢測方法是在PCR反應(yīng)系統(tǒng)中增加熒光，使用信號(hào)來檢測整個(gè)PCR流程，最后通過曲線來描繪整個(gè)定量分析的方法。熒光實(shí)時(shí)定量檢測方法主要分為兩種：一是Taq Man；二是Green 1熒光染料?？梢哉f，熒光實(shí)施定量檢測方法是基因檢測方法的飛躍。

3.寡核苷酸指紋圖譜方法

寡核苷酸指紋圖譜方法是將提純的RNA病毒進(jìn)行酶切，形成大小不一的片段，然后采用放射型光線定位，進(jìn)行雙向電泳，再通過顯影功能，得到光照圖譜。指紋圖譜可以顯示出病毒不同株的變異效果，因此，在防治雞疾病中具有非常突出的作用。

三、雞的動(dòng)物疫病檢測方法具體應(yīng)用

1.將檢測方法用在雞的疾病檢測中

血清學(xué)檢測方法及分子生物學(xué)診斷方法是我國標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)，如今已經(jīng)成為雞疾病診斷和控制必不可少的手段，將它們應(yīng)用在大型雞類養(yǎng)殖場中，能夠有效防治雞疫病，提高養(yǎng)殖效益。

（1）雞類養(yǎng)殖場需要主動(dòng)配合血清學(xué)檢測技術(shù)，來對雞群進(jìn)行免疫檢測。通過定期開展血清學(xué)及生物分子檢測方法，分階段、分群監(jiān)控雞群的健康，來提高免疫效果。比如面對新城疫病，很多成年的雞或者攜帶抗體的雞，總是最后感染，而生長期的雞卻最先發(fā)病；

（2）要開展雞疫病的病原監(jiān)測和流行病學(xué)調(diào)查，掌握疫病產(chǎn)生的規(guī)律及多發(fā)季節(jié)，來把握疫情。如果雞類養(yǎng)殖場受到了病原攻擊，要使用血清學(xué)檢測方法及分子生物學(xué)檢測方法進(jìn)行免疫檢測，并將結(jié)果和養(yǎng)殖場的雞群發(fā)病、用藥等方面進(jìn)行結(jié)合，做出最科學(xué)的檢測報(bào)告及分析，從控制疫病的發(fā)展，確保雞群的存活率。

2.將檢測方法用在雞疾病預(yù)警中

（1）各級(jí)疾病監(jiān)控站需要對本地區(qū)的雞養(yǎng)殖場逐一進(jìn)行免疫監(jiān)督，確保防疫落實(shí)到位，發(fā)現(xiàn)疫情要趁早；雞疫病種類很多，在進(jìn)行接種時(shí)，需使用血清學(xué)檢測，來確定疫病的種類及程度；在檢測過程中，要建立免疫檢測制度，切實(shí)做好雞疾病的防疫檢測工作。

（2）在采血清時(shí)，要保證標(biāo)本采取的準(zhǔn)確性及全面性；在相關(guān)部門發(fā)布疫情信息后，要及時(shí)檢測雞群是否發(fā)生疫情現(xiàn)象，做好防疫準(zhǔn)備，購買藥品及藥具設(shè)備，來做到早診斷、早治療；在開展預(yù)警工作中時(shí)，疫病防控中心也要使用血清學(xué)等科學(xué)的檢測方法，來確定地區(qū)疫病情況，交代流行病特點(diǎn)及疫病防控方法，進(jìn)而將雞疫病控制在一定范圍內(nèi)，來開展針對化的檢測工作。

（3）很多雞類養(yǎng)殖場都配備了血清學(xué)檢測實(shí)驗(yàn)室，來開展抗體檢測工作。實(shí)驗(yàn)室主要采用血凝實(shí)驗(yàn)及ELISA實(shí)驗(yàn)，血凝實(shí)驗(yàn)操作簡便，比如試管凝聚試驗(yàn)、禽流感及新城疫病等；ELISA實(shí)驗(yàn)可以檢測雞瘟、禽流感等檢測中。ELISA檢測具有敏感、重復(fù)性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。因此，雞類養(yǎng)殖場可以使用凝血試驗(yàn)及免疫技術(shù)來檢測雞的抗體滴度，進(jìn)而真正推動(dòng)血清學(xué)及分子生物學(xué)檢測技術(shù)進(jìn)步。

3.將檢測方法用在雞的免疫評估中

（1）監(jiān)測免疫效果。使用血清學(xué)檢測方法來監(jiān)測雞群的免疫抗體，可以得知雞的抗體水平及疫情來確定疫苗。分析雞群的疫情，能夠?yàn)閺V大養(yǎng)殖人員提供一些針對性的方法，及時(shí)關(guān)注疫病隱患，進(jìn)而采取有效措施。

（2）修訂免疫程序?，F(xiàn)如今，很多雞類養(yǎng)殖人員的檢測方法都是借鑒他人的，由于地區(qū)不同，并非適合所有養(yǎng)殖戶。而使用血清學(xué)檢測方法及分子生物學(xué)檢測方法，定期開展檢測，能夠確定雞群的免疫接種時(shí)間。在使用疫苗時(shí)，充分考慮MDA的影響，測定出母源抗體的消長水平，來確定首次免疫時(shí)機(jī)。檢測標(biāo)本中的母源抗體在一定時(shí)間內(nèi)，會(huì)產(chǎn)生變化，抗體水平過高會(huì)導(dǎo)致免疫失??；抗體水平過低，會(huì)導(dǎo)致免疫空白期，給雞群帶來潛在威脅，因此，通過定期開展雞群血清學(xué)檢測及分支生物學(xué)檢測，能夠制定合理的免疫程序。

四、結(jié)語

綜上所述，通過血清學(xué)及分子生物學(xué)檢測方法，能夠有效預(yù)防雞疫病，在此基礎(chǔ)上，雞在接種時(shí)，使用血清學(xué)檢測方法，能夠確定疫病的種類及程度，選取正確的疫苗；同時(shí)，通過定期使用血清學(xué)生物分子檢測方法，分階段監(jiān)控雞群健康，能夠提高免疫效果。因此，合理使用血清學(xué)及分子生物檢測方法能夠提高雞的存活率。

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