弗賴森草螺菌RE3-3合成生長素及其促生作用的研究

程懷月， 石先陽

(安徽大學(xué) 資源與環(huán)境工程學(xué)院，安徽 合肥 230039)

生長素(Auxin)是一類含有吲哚環(huán)結(jié)構(gòu)的植物內(nèi)源激素，可調(diào)節(jié)植物細(xì)胞的生長、根莖葉的分化及果實(shí)發(fā)育，在植物生長發(fā)育的各階段發(fā)揮著重要作用[1-2]。吲哚-3-乙酸(Indole-3-acetic acid，IAA)是植物體內(nèi)主要的生長素形式，植物細(xì)胞IAA庫的填充主要通過以L-色氨酸(L-tryptophan，L-trp)為前體的生物合成[3]。這種合成途徑同樣也在一些植物內(nèi)生細(xì)菌體內(nèi)發(fā)現(xiàn)[4-5]。具有分泌IAA活性的內(nèi)生細(xì)菌可通過調(diào)節(jié)植物內(nèi)源激素含量或提供外源激素，促進(jìn)宿主植物的生長和發(fā)育[6-7]。草螺菌(Herbaspirillum)是一類廣宿主內(nèi)生固氮菌，已從甘蔗、玉米、高粱、水稻和多種牧草的根、莖、葉和種子器官內(nèi)成功分離[8-9]。除了具有典型的固氮酶活性進(jìn)行生物固氮，草螺菌還可通過產(chǎn)生IAA類物質(zhì)而具有使宿主植物增產(chǎn)的潛能[10]。已有的草螺菌對植物促生作用研究主要集中于提高農(nóng)作物產(chǎn)量[11-12]，而對濕地植物研究很少。隨著城市化的日益劇增，蘆葦(Phragmites)和香蒲(Typhaceae)等濕地植物的自然群落正在大面積減少[13-14]，因此對其量的增產(chǎn)研究是有必要的。本研究通過對菌株RE3-3產(chǎn)IAA的功能鑒定，深入解析營養(yǎng)物質(zhì)和環(huán)境條件因素對菌株合成IAA的影響，優(yōu)化其培養(yǎng)條件以便迅速且大量合成IAA。在最佳培養(yǎng)條件的基礎(chǔ)上，研究該菌株合成IAA對水生植物蘆葦及香蒲生長的影響，從而為合理利用該菌株提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌種來源 弗賴森草螺菌(Herbaspirillumfrisingense)RE3-3菌株，由本課題組成員從蘆葦根中分離篩選并鑒定。

1.1.2 培養(yǎng)基(g/L) 營養(yǎng)培養(yǎng)基(Nutrient Broth，NB)用于活化菌株RE3-3：牛肉膏 1.0，酵母粉 2.0，蛋白胨 5.0，NaCl 5.0，pH 7.2；基礎(chǔ)培養(yǎng)基(Minimal Medium，MM)用于檢測IAA的形成：NH4Cl 0.25，MgSO4·7H2O 0.226，KH2PO43.0，NaHPO4·12H2O 15.12，pH 7.0；植物生長所需的基本培養(yǎng)基為1/2 MS(Murashige and Skoog)，根據(jù)文獻(xiàn)提供的MS培養(yǎng)基配方[15]，配制本實(shí)驗(yàn)所需的1/2 MS培養(yǎng)基(即所有試劑濃度相對于MS培養(yǎng)基減半)。

1.2 方法

1.2.1 菌株RE3-3產(chǎn)IAA的鑒定 將菌株RE3-3接種到NB培養(yǎng)液中，150 r/min、30 ℃培養(yǎng)24 h。取0.1 mL菌液(OD600為1.0)接種到含0.05% L-trp的MM培養(yǎng)液中，以1%葡萄糖為碳源，150 r/min、30 ℃培育48 h。將所得菌液12 000 r/min離心5 min，上清液保存?zhèn)溆?。? mL上清液與Salkowski′s顯色液[16](H2SO4∶ddH2O∶0.5 mol/L FeCl3·6H2O=150∶250∶7.5)以1∶2(體積比)的比例進(jìn)行混勻，IAA標(biāo)準(zhǔn)液作為陽性對照，室溫避光靜置30 min后，觀察其顏色變化，若有紅色生成則表明有IAA的形成。

1.2.2 培養(yǎng)條件對菌株RE3-3合成IAA的影響 下述實(shí)驗(yàn)中若無特別說明，則pH為7.0，溫度30 ℃，L-trp含量為0.05%，以葡萄糖為碳源，培養(yǎng)48 h。分別研究pH、溫度、L-trp含量、碳源及培養(yǎng)時間對菌株RE3-3合成IAA的影響，通過優(yōu)化培養(yǎng)條件從而得到IAA的合成最大量。pH：3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0；溫度：15、20、25、30、35、40 ℃；L-trp含量：0.03%、0.04%、0.05%、0.06%、0.07%、0.08%、0.09%、0.10%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))；碳源：蔗糖、淀粉、果糖、甘露醇、葡萄糖，添加量為1%；培養(yǎng)時間：24、48、72、96、120、144、168 h。

1.2.3 IAA對蘆葦及香蒲的促生作用 以1/2 MS培養(yǎng)基為負(fù)對照，培養(yǎng)基中加入IAA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)為正對照，觀察菌株RE3-3合成IAA對蘆葦及香蒲幼苗生根的誘導(dǎo)現(xiàn)象[17]。選取生長狀態(tài)良好、植株莖高相似的4周齡蘆葦與香蒲無菌幼苗作為實(shí)驗(yàn)樣本，將這些幼苗進(jìn)行無菌切根處理，處理后的幼苗移栽到無菌培養(yǎng)皿中生長，并在培養(yǎng)皿中分別加入IAA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)及菌株合成IAA，每種IAA的濃度設(shè)定分別為0.5、1.0、1.5 mg/L，每個濃度有5組平行，每板培養(yǎng)皿中均有6株植株。培養(yǎng)2周后觀察蘆葦及香蒲生長情況，并記錄在不同濃度IAA條件下蘆葦和香蒲再生根及莖葉長度。

1.2.4 分析方法 通過測定培養(yǎng)液在600 nm處的吸光度來表征菌體細(xì)胞的生長量。培養(yǎng)液在12 000 r/min下離心5 min后，用Salkowski′s比色法在λ=530 nm下定量測吸光值。將1 g/L IAA標(biāo)液稀釋為系列濃度，與測樣品相同方法測定吸光值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，參考標(biāo)準(zhǔn)曲線確定IAA含量[16]。采用液相色譜分析進(jìn)一步證實(shí)IAA的產(chǎn)生：將備用上清液的pH值用1 mol/L HCl調(diào)至2.5，用等量的乙酸乙酯將溶液中的生成物質(zhì)置換出來，重復(fù)3次，將乙酸乙酯層置于空氣中干燥。用甲醇溶解干燥殘留物作為高效液相色譜(AGILENT1260)及質(zhì)譜(SATUKN2200)分析的試樣[18]。其中以C18柱為高效液相色譜(HPLC)的固定相，流動相為V(甲醇)∶V(水)=75∶25。根長、莖長測量參照文獻(xiàn)方法[19]，以游標(biāo)卡尺為測量工具。在促生實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，從每個培養(yǎng)皿中選取30株長勢較均勻的蘆葦和香蒲幼苗，用游標(biāo)卡尺測量根長和莖長。利用ORIGIN 8.0和SPSS 20.0軟件對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理和差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 菌株RE3-3合成IAA的定性檢測

2.1.1 標(biāo)液對照檢測 為了分析菌株RE3-3是否具有產(chǎn)IAA能力，實(shí)驗(yàn)以MM培養(yǎng)液為對照，不同濃度(10、50、100 mg/L)IAA標(biāo)準(zhǔn)溶液為參照，對其產(chǎn)IAA能力進(jìn)行分析[16]。結(jié)果發(fā)現(xiàn)菌株RE3-3培養(yǎng)液的顯色液呈紅色(圖1)，即初步判定菌株RE3-3能夠合成IAA。

圖1 菌株產(chǎn)IAA的定性檢測Fig.1 Qualitative test of IAA production of bacterial isolates

2.1.2 色譜檢測 通過色譜法分析發(fā)現(xiàn)草螺菌GSF30T及Mb11均可在L-trp存在的前提下合成IAA[20]。而在本研究中IAA標(biāo)準(zhǔn)物的HPLC圖譜顯示主峰保留時間為6.093 min(圖2A)，菌株培養(yǎng)液代謝產(chǎn)物的主峰保留時間則為6.157 min(圖2B)，2個主峰保留時間幾乎相同，誤差在可接受范圍(±0.2 min)內(nèi)，即草螺菌RE3-3在L-trp存在的條件下，其培養(yǎng)液中代謝產(chǎn)物同樣為IAA。通過質(zhì)譜分析發(fā)現(xiàn)最強(qiáng)離子峰的m/z值為174(圖2C)，生成物質(zhì)的分子量為175(M+H+)，通過查找NIST數(shù)據(jù)庫可進(jìn)一步驗(yàn)證該物質(zhì)是IAA。

2.2 不同培養(yǎng)條件對菌株RE3-3合成IAA的影響

2.2.1 pH的影響 菌株RE3-3在酸性(pH值3.0～6.0)與堿性(pH值8.0～10.0)條件下，IAA合成量都很少；但在酸性條件下，其合成量隨著pH的增大而增大，而在堿性條件下其變化趨勢相反(圖3A)；pH在(7.0±1.0)范圍內(nèi)，IAA合成量先增至最大值(60 mg/L)再迅速下降，這一系列結(jié)果表明菌株RE3-3 IAA的合成對pH的適應(yīng)能力弱。為了菌株RE3-3更好地合成IAA，與成團(tuán)泛菌(Pantoeaagglomerans)PVM合成IAA對pH的要求一致[17]，后續(xù)實(shí)驗(yàn)中pH值設(shè)定為7.0。

2.2.2 溫度的影響 溫度不僅直接影響IAA的合成，還通過影響菌體量的生成從而間接影響菌株合成IAA[21]。溫度為15 ℃時，菌株RE3-3的生長緩慢，其IAA的合成量也很少(1.5 mg/L)；隨著溫度升高，菌株RE3-3合成的IAA量也隨之快速增長；溫度到達(dá)30 ℃時，IAA的合成量達(dá)到最大值(61 mg/L)；之后IAA合成量隨著溫度的繼續(xù)升高而下降，但變化較為平緩(圖3B)。說明溫度30 ℃是菌株RE3-3在pH 7.0培養(yǎng)條件下合成最大量IAA的最佳溫度。

2.2.3 L-trp含量的影響 L-trp作為IAA合成的前體物質(zhì)，其濃度過高或過低都會導(dǎo)致IAA合成量的減少(圖3C)。當(dāng)L-trp濃度為0.07%，IAA合成量達(dá)最大為74 mg/L；當(dāng)L-trp濃度超過0.07%時，其合成量會受到抑制，這是因?yàn)長-trp過量時會形成鄰氨基苯甲酸而對IAA的合成產(chǎn)生抑制作用，從而導(dǎo)致IAA合成量降低[22]。大多數(shù)弗賴森草螺菌屬的細(xì)菌合成IAA的L-trp最適濃度為0.05%[20]，而本研究菌株RE3-3對L-trp的最適濃度則為0.07%。

圖2 IAA譜圖分析Fig.2 The spectrogram analysis of IAAA：工業(yè)合成IAA的液相色譜圖；B：菌株合成IAA的液相色譜圖；C：菌株合成IAA的質(zhì)譜分析圖A：HPLC analysis of standard IAA；B：HPLC analysis of synthetic IAA；C：mass spectroscopy analysis of synthetic IAA

2.2.4 碳源的影響 在5種碳源中，菌株RE3-3利用葡萄糖為碳源時最有利于IAA的合成(圖3D)。不同碳源下產(chǎn)生的IAA量大小依次為葡萄糖(74 mg/L)>甘露醇(64 mg/L)>果糖(18 mg/L)>淀粉(1.2 mg/L)。蔗糖作為碳源，菌株RE3-3幾乎不生長。這是由于草螺菌屬不含有分解蔗糖的相應(yīng)糖苷酶，從而不能利用蔗糖[23]。與固氮菌屬根瘤菌(Rhizobiaceae)合成IAA對碳源的要求一樣[24]，菌株RE3-3為了合成最大量IAA，后續(xù)實(shí)驗(yàn)要以1%葡萄糖為最佳碳源。

2.2.5 時間的影響 圖3E給出了隨著培養(yǎng)時間的遞增，菌株RE3-3 IAA合成量先增至最大值而后隨著時間的變化保持不變。即所有培養(yǎng)條件最優(yōu)化后，培養(yǎng)24 h該菌合成IAA的量為41 mg/L，最大IAA合成量在48 h處，其值為74 mg/L。在最佳培養(yǎng)條件下，肺炎克雷伯菌(Klebsiellapneumonia)合成IAA最大量為22.7 mg/L[25]，鏈霉菌(Streptomycessp.)3s、熒光假單胞菌(Pseudomonasfluorescens)540 以及植物短小桿菌(Curtobacteriumplantarum)6-I合成IAA最大量分別為20、67、78 mg/L[26]，對比其他菌屬IAA合成量，菌株RE3-3的IAA合成能力明顯較強(qiáng)。

2.3 IAA促進(jìn)蘆葦及香蒲生長

在培養(yǎng)條件最優(yōu)的基礎(chǔ)上，菌株RE3-3合成IAA為水生植物蘆葦及香蒲提供外源生長物質(zhì)。不同于對照組的蘆葦及香蒲苗在生長過程中的莖葉出現(xiàn)枯黃，再生根生長長勢極為緩慢，根部逐漸腐爛(圖4b、圖5b)。實(shí)驗(yàn)組兩種形式IAA作用的植株生長長勢良好，莖葉面積大，葉色濃綠，根系發(fā)達(dá)(圖4、圖5)，其中又以菌株合成IAA促生效果最好。IAA濃度的過高或過低對植株根系生長都存在不同程度的影響[27]，1.0 mg/L菌株合成IAA對蘆葦及香蒲的促生效果最好，但I(xiàn)AA濃度為1.5 mg/L時則對植株的生長有著抑制作用(表1、表2)。

圖3 菌株RE3-3合成IAA的影響因素Fig.3 The influence factors of strain RE3-4 synthesize IAA

圖4 IAA對蘆葦苗生長的影響Fig.4 Affecting Phragmites seedling growth by IAA a為正常培養(yǎng)且切根的蘆葦苗；c、d、e分別為0.5、1.0、1.5 mg/L IAA標(biāo)準(zhǔn)物；b為對照組；f、g、h分別為0.5、1.0、1.5 mg/L菌株合成IAAa：meant normal culture and root pruning reed seedlings;c，d，e was 0.5，1.0，1.5 mg/L of standard IAA, respectively;b：meant control group; f，g，h was 0.5，1.0，1.5 mg/L of synthetic IAA, respectively

圖5 IAA對香蒲苗生長的影響Fig.5 Affecting Typhaceae seedling growth by IAAa為正常培養(yǎng)且切根的香蒲苗；c、d、e分別為0.5、1.0、1.5 mg/L IAA標(biāo)準(zhǔn)物；b為對照組；f、g、h分別為0.5、1.0、1.5 mg/L合成IAAa：meant normal culture and root pruning cattail seedlings；c,d,e was 0.5，1.0，1.5 mg/L of standard IAA, respectively；b：meant control group;f,g,h was 0.5，1.0，1.5 mg/L of synthetic IAA, respectively

不同植物器官組織對IAA的敏感程度不同，植株根、莖組織在IAA的作用下其伸長率也不同[28]。對比相同濃度IAA標(biāo)準(zhǔn)物的作用效果，蘆葦及香蒲苗在1.0 mg/L菌株合成IAA的作用下根系伸長最明顯，分別增長27.78%、34.59%(表1)，莖高也分別增長了66.46%、40.88%(表2)。

表1 IAA標(biāo)準(zhǔn)物及菌株合成IAA對蘆葦及香蒲再生根的影響Table 1 Effect of Phragmites and Typhaceae root by standard IAA and biosynthetic IAA

注：數(shù)據(jù)表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差，每次實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次，小樣本個數(shù)為30；不同的小寫字母表示在不同IAA濃度水平中的(在同一種IAA中)顯著性差異(P≤0.05)，*表示在IAA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)與菌株合成IAA兩個水平中的(在同一濃度IAA中)顯著性差異(P≤0.05)；下表同

通過顯著性差異分析(表1、表2)可看出，與成團(tuán)泛菌(P.agglomerans)合成IAA促進(jìn)煙草葉片生根效果優(yōu)于IAA標(biāo)準(zhǔn)物作用的結(jié)果相似[17]，菌株合成IAA作用的蘆葦及香蒲再生根長度都顯著高于IAA標(biāo)準(zhǔn)物作用的，尤其是香蒲再生根根系明顯發(fā)達(dá)、壯碩。則菌株RE3-3合成IAA以其自身合成快速、經(jīng)濟(jì)劃算、促生效果明顯等優(yōu)點(diǎn)，有望應(yīng)用于濕地生態(tài)系統(tǒng)植被增產(chǎn)等領(lǐng)域。

表2 IAA標(biāo)準(zhǔn)物及菌株合成IAA對蘆葦及香蒲莖長的影響Table 2 Effect of Phragmites and Typhaceae stem length by standard IAA and biosynthetic IAA

3 討 論

近年來，植物內(nèi)生菌產(chǎn)生IAA對農(nóng)作物促生作用的報(bào)道不斷增多，但多集中于固氮螺菌和假單胞菌屬等種屬，弗賴森草螺菌作為一類常見的植物內(nèi)生細(xì)菌，其合成IAA作用于水生植物的研究還鮮有報(bào)道。本研究結(jié)果表明弗賴森草螺菌RE3-3在L-trp存在的條件下合成的代謝產(chǎn)物是IAA。菌株RE3-3合成IAA的能力與培養(yǎng)基營養(yǎng)成分以及某些環(huán)境因素有直接的關(guān)系。在最優(yōu)培養(yǎng)條件(培養(yǎng)基中含0.07% L-trp及1%葡萄糖，pH 7.0，溫度30 ℃，培養(yǎng)時間48 h)的基礎(chǔ)上，可使該菌產(chǎn)生較多的IAA，為水生植物蘆葦及香蒲提供外源生長物質(zhì)，促進(jìn)蘆葦及香蒲的生長和發(fā)育。這也意味著可將菌株RE3-3合成IAA有效地應(yīng)用于濕地生態(tài)系統(tǒng)植被增產(chǎn)等領(lǐng)域，使該菌種具有一定的應(yīng)用性價(jià)值。

[1] 呂劍，喻景權(quán). 植物生長素的作用機(jī)制[J]. 植物生理學(xué)通訊，2004，40(5)：624-628.

[2] Khamna S，Yokota A，Peberdy JF，et al. Indole-3-acetic acid production byStreptomycessp. isolated from some Thai medicinal plant rhizosphere soils[J]. Eurasian Journal of Biosciences，2010，4(4)：23-32.

[3] BB布坎南，W格魯依森姆，RL瓊斯. 植物生物化學(xué)與分子生物學(xué)[M]. 北京：科學(xué)教育出版社， 2004，720.

[4] Jasim B，Jimtha John C，Shimil V，et al. Studies on the factors modulating indole-3-acetic acid production in endophytic bacterial isolates fromPipernigrumand molecular analysis ofipdcgene[J]. Journal of Applied Microbiology, 2014，117(3)：786-799.

[5] Pedraza RO，Ramírez-Mata A，Xiqui ML，et al. Aromatic amino acid aminotransferase activity and indole-3-acetic acid production by associative nitrogen-fixing bacteria[J]. FEMS Microbiology Letters，2004，233(1)：15-21.

[6] Spaepen S，Vanderleyden J，Remans R. Indole-3-acetic acid in microbial and microorganism-plant signaling[J]. FEMS Microbiology Reviews，2007，31(4)：425-448.

[7] Bulgarelli D，Schlaeppi K，Spaepen S，et al. Structure and functions of the bacterial microbiota of plants[J]. Annual Review of Plant Biology，2013，64：807-838.

[8] 羅明，盧云. 植物內(nèi)生固氮菌研究進(jìn)展[J]. 微生物學(xué)雜志，2005，25(1)：82-88.

[9] Straub D，Yang HY，Liu Y，et al. Root ethylene signalling is involved inMiscanthussinensisgrowth promotion by the bacterial endophyteHerbaspirillumfrisingenseGSF30T[J]. Journal of Experimental Botany，2013，64(14)：4603-4615.

[10] Monteiro RA，Balsanelli E，Wassem R，et al.Herbaspirillum-plant interactions: microscopical, histological and molecular aspects[J]. Plant and Soil，2012，356(1)：175-196.

[11] Bastián F，Cohen A，Piccoli P，et al. Production of indole-3-acetic acid and gibberellins A1 and A3 byAcetobacterdiazotrophicusandHerbaspirillumseropedicaein chemically-defined culture media[J]. Plant Growth Regulation，1998，24(1)：7-11.

[12] 張鑫. 烏頭內(nèi)生菌Herbaspirillumsp. Aconite 5-28的分離鑒定及其基因組學(xué)研究[D]. 西安：陜西師范大學(xué)，2015.

[13] 蘆曉峰，蘇芳莉，周林飛，等. 蘆葦濕地生態(tài)功能及恢復(fù)研究[J]. 西北林學(xué)院學(xué)報(bào)，2011，26(4)：53-58.

[14] 項(xiàng)學(xué)敏，宋春霞，李彥生，等. 濕地植物蘆葦和香蒲根際微生物特性研究[J]. 環(huán)境保護(hù)科學(xué)，2004，30(124)：35-38.

[15] 沈惠娟. 木本植物組織培養(yǎng)技術(shù)[M]. 北京：中國農(nóng)業(yè)科技出版社，1992.

[16] Shahab S，Ahmed N，Khan NS. Indole acetic acid production and enhanced plant growth promotion by indigenous PSBs[J]. African Journal of Agricultural Research，2009，4(11)：1312-1316.

[17] Apine OA，Jadhav JP. Optimization of medium for indole-3-acetic acid production usingPantoeaagglomeransstrain PVM[J]. Journal of Applied Microbiology，2011，110(5)：1235-1244.

[18] Goswami D，Thakker JN，Dhandhukia PC. Simultaneous detection and quantification of indole-3-acetic acid (IAA) and indole-3-butyric acid (IBA) produced by rhizobacteria from L-tryptophan (Trp) using HPTLC[J]. Journal of Microbiological Methods，2015，110：7-14.

[19] 魯如坤. 土壤農(nóng)業(yè)化學(xué)分析方法[M]. 北京：中國農(nóng)業(yè)科技出版社，2000.

[20] Rothballer M，Eckert B，Schmid M，et al. Endophytic root colonization of gramineous plants byHerbaspirillumfrisingense[J]. FEMS Microbiology Ecology，2008，66(1)：85-95.

[21] Malhotra M，Srivastava S. Stress-responsive indole-3-acetic acid biosynthesis byAzospirillumbrasilenseSM and its ability to modulate plant growth[J]. European Journal of Soil Biology，2009，45(1)：73-80.

[22] Okon Y，Kapulnik Y. Development and function ofAzospirillum-inoculated roots[J]. Plant and Soil，1986，90(1)：3-16.

[23] 王婷，楊升，陳亞雪，等. 兩株茶樹內(nèi)生草螺菌的微生物學(xué)特性[J]. 微生物學(xué)報(bào)，2014，54(4)：424-432.

[24] Datta C，Basu PS. Indole acetic acid production by a Rhizobium species from root nodules of a leguminous shrub[J]. Microbiological Research，2000，155(2)：123-127.

[25] Sachdev DP，Chaudhari HG，Kasture VM，et al. Isolation and characterization of indole acetic acid (IAA) producingKlebsiellapneumoniaestrains from rhizosphere of wheat (Triticumaestivum) and their effect on plant growth[J]. Indian Journal of Experimental Biology，2009，47(12)：993-1000.

[26] Merzaeva OV，Shirokikh IG. The production of auxins by the endophytic bacteria of Winter Rye[J]. Applied Biochemistry and Microbiology，2010，46(1)：44-50.

[27] Hoffman MT，Gunatilaka MK，Wijeratne K，et al. Endohyphal bacterium enhances production of indole-3-acetic acid by a foliar fungal endophyte[J]. PloS One，2013，8(9)：1-8.

[28] 田會會，蔡春響，李莉，等. 抗鎘并且產(chǎn)吲哚乙酸的細(xì)菌的篩選鑒定及其植物促生作用[J]. 基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué)，2014，33(4)：888-896.