CD47在胃癌組織中的表達(dá)及意義

412000湖南省株洲市中心醫(yī)院普外一科

胃癌是最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，約90%胃癌患者就診時(shí)已是進(jìn)展期，根治性手術(shù)后5年生存率僅為10%～49%[1]。隨著對(duì)腫瘤免疫治療的研究，腫瘤的發(fā)生發(fā)展與機(jī)體的免疫功能密切相關(guān)，腫瘤細(xì)胞能夠被巨噬細(xì)胞吞噬，但在腫瘤免疫中，腫瘤細(xì)胞可逃避機(jī)體的免疫監(jiān)視，得以發(fā)生發(fā)展[2]。CD47是一種廣泛表達(dá)于細(xì)胞膜表面的蛋白質(zhì)，使腫瘤細(xì)胞表達(dá)“別吃我”信號(hào)逃避免疫監(jiān)視。本研究檢測(cè)CD47在胃癌中的表達(dá)及與臨床參數(shù)關(guān)系，以探討其在胃癌發(fā)生發(fā)展的中的意義。

資料與方法

2013年6月-2015年5月選擇因胃癌行胃癌根治術(shù)后的病理標(biāo)本50例，同時(shí)選取癌旁正常組織(安全界外1 cm)病理標(biāo)本作為對(duì)照。其中男28例，女22例；年齡45～81歲，平均(60.5±14.2)歲；其中胃竇癌36例，胃體癌14例，均為胃腺癌；其中高分化14例，中分化16例，低分化20例。根據(jù)美國(guó)癌癥聯(lián)合委員會(huì)公布的胃癌TNM分期，T1期3例，T2期12例，T3期19例，T4期16例。

檢測(cè)方法：在胃癌組織及癌旁組織石蠟標(biāo)本上取材、切片，免疫組化法檢測(cè)切片中CD47蛋白的表達(dá)水平。CD47單克隆抗體是美國(guó)Abcam公司產(chǎn)品，配置CD47抗體濃度1∶300。按實(shí)驗(yàn)說(shuō)明操作，切片脫蠟至水，浸于0.01 mol/L枸櫞酸緩沖液中加熱煮沸修復(fù)，冷卻，滴入內(nèi)源性過(guò)氧化物酶阻斷劑，水洗，置入磷酸鹽緩沖液浸泡，分別滴入CD47抗體，低溫下過(guò)夜，再滴酶標(biāo)羊抗鼠/兔IgG聯(lián)合物，37℃溫箱中孵育，經(jīng)顯色、復(fù)染、脫水、透明處理，封片、鏡檢。

判斷標(biāo)準(zhǔn)：由兩位高年資病理科醫(yī)師雙盲評(píng)分，在每張切片上隨機(jī)選取10個(gè)(×400)視野范圍下計(jì)數(shù)，據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)、染色強(qiáng)度區(qū)分陽(yáng)性等級(jí)。①陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)＞51%為3分，11%～50%為2分，1%～10%為1分，＜1%為0分；②染色強(qiáng)度：強(qiáng)陽(yáng)性3分，中等陽(yáng)性2分，弱陽(yáng)性1分，陰性為0分。得分為①+②。3～6分為陽(yáng)性，＜3分為陰性。

統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：采用SPSS 17.0分析數(shù)據(jù)，計(jì)量資料采用(±s)表示，采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用%表示，采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

CD47在胃癌組織中陽(yáng)性表達(dá)率達(dá)56.0%，癌旁組織中陽(yáng)性表達(dá)率為28.0%，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。研究分析CD47與患者年齡、性別、腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤分化程度、腫瘤浸潤(rùn)深度(T分期)的關(guān)系，結(jié)果顯示CD47陽(yáng)性表達(dá)與胃癌分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤浸潤(rùn)深度相關(guān)。

討 論

免疫系統(tǒng)通過(guò)識(shí)別并清除腫瘤細(xì)胞，對(duì)抑制腫瘤的發(fā)生發(fā)展有重要作用。巨噬細(xì)胞能維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)、防御病原體及參與免疫應(yīng)答等[3]，其直接殺傷腫瘤細(xì)胞，或通過(guò)呈遞腫瘤相關(guān)抗原誘導(dǎo)機(jī)體免疫應(yīng)答清除腫瘤細(xì)胞，在腫瘤免疫中發(fā)揮重要作用。隨著腫瘤免疫治療研究迅速進(jìn)展，有望從根本上治愈腫瘤，胃癌的免疫治療是一個(gè)治療的熱點(diǎn)。CD47在胃癌細(xì)胞的凋亡和免疫逃逸中扮演重要角色，本研究通過(guò)探索CD47在胃癌組織表達(dá)情況，探討其與胃癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系。

CD47又稱整合素相關(guān)蛋白[4]，廣泛表達(dá)于細(xì)胞膜表面，是免疫球蛋白超家族的一員。CD47的配體為信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白α鏈(SIRPα)，是一種跨膜蛋白，CD47與SIRPα的結(jié)合產(chǎn)生抑制抗性信號(hào)，下調(diào)巨噬細(xì)胞的吞噬作用，對(duì)免疫系統(tǒng)產(chǎn)生抑制作用，使腫瘤細(xì)胞逃避巨噬細(xì)胞的吞噬，表達(dá)“別吃我”信號(hào)。本研究檢測(cè)CD47顯示，胃癌組織中CD47表達(dá)明顯高于癌旁組織，說(shuō)明胃癌細(xì)胞較胃正常細(xì)胞高表達(dá)CD47，通過(guò)下調(diào)巨噬細(xì)胞對(duì)胃癌細(xì)胞吞噬，產(chǎn)生免疫逃逸。CD47表達(dá)與胃癌組織分化程度、浸潤(rùn)深度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，研究發(fā)現(xiàn)CD47表達(dá)陽(yáng)性，胃癌組織分化程度低、浸潤(rùn)程度深、淋巴結(jié)有轉(zhuǎn)移，病期晚，預(yù)后差，說(shuō)明CD47陽(yáng)性表達(dá)與胃癌惡性程度呈正相關(guān)[5]，促進(jìn)了胃癌的發(fā)生和發(fā)展。

CD47在胃癌組織中高表達(dá)，促使胃癌細(xì)胞免疫逃避，導(dǎo)致腫瘤浸潤(rùn)深、淋巴轉(zhuǎn)移等不良預(yù)后。CD47成為胃癌潛在治療靶點(diǎn)來(lái)消除胃癌細(xì)胞[6]，采用抗體或拮抗劑阻斷CD47-SIRPα信號(hào)通路，恢復(fù)免疫細(xì)胞功能，清除腫瘤，成為胃癌免疫治療的新策略。

綜上所述，CD47在胃癌組織中的表達(dá)與胃癌發(fā)生、生長(zhǎng)相關(guān)，是有潛在價(jià)值的腫瘤相關(guān)標(biāo)志物，可能為胃癌治療中使用針對(duì)性的免疫抑制劑提供潛在靶點(diǎn)。