肺結(jié)核患者Th1、Th2、Treg、Th17免疫應(yīng)答的臨床研究

馬晨光 樸陽(yáng)

肺結(jié)核疾病是因?yàn)榛颊叻尾堪l(fā)生結(jié)核分枝桿菌感染而引起的呼吸道系統(tǒng)傳染性疾病，患者肺部感染結(jié)核分枝桿菌的數(shù)量以及毒力決定了患者病情轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)歸的實(shí)際情況[1-2]。CD4+T淋巴細(xì)胞作為介導(dǎo)抗結(jié)核免疫應(yīng)答的重點(diǎn)細(xì)胞群體，依據(jù)其分泌的細(xì)胞因子各不相同，可以進(jìn)一步的劃分為T(mén)h1、Th2、Treg及Th17等。Th1、Th2、Treg及Th17在正常情況之下都是處于動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)，對(duì)機(jī)體完成抗結(jié)核的免疫應(yīng)答有較好的促進(jìn)作用，但是當(dāng)Th1與Th2、Th17與Treg處于失衡情況時(shí)，會(huì)導(dǎo)致抗結(jié)核免疫應(yīng)答失衡，而且會(huì)影響機(jī)體對(duì)結(jié)核分枝桿菌清除[3]。我院此次研究主要分析肺結(jié)核患者病情變化與Th1、Th2、Treg、Th17免疫應(yīng)答的具體相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年5月—2017年5月在我院進(jìn)行體檢的健康志愿者40例為對(duì)照組，另選取同期在我院進(jìn)行治療的肺結(jié)核患者40例為研究組。對(duì)照組男20例，女20例，年齡20～50歲，平均年齡（37.5±1.5）歲，研究組男24例，女16例，年齡22～52歲，平均年齡（37.5±2.5）歲。兩組均知情同意本研究，一般資料差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性，同時(shí)經(jīng)過(guò)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法

1.2.1 兩組臨床標(biāo)本采集 對(duì)照組在進(jìn)行體檢時(shí)采集6 ml外周血標(biāo)本，研究組在進(jìn)行抗結(jié)核治療前采集6 ml外周血標(biāo)本。兩組所采集的外周血標(biāo)本分別分為兩份，一份血清離心分離之后置入－80℃冰柜中存放，另一份將淋巴細(xì)胞分離液加入后進(jìn)行離心，將外周血單個(gè)核細(xì)胞吸收后使用流式細(xì)胞檢測(cè)術(shù)檢測(cè)[4]。

1.2.2 流式細(xì)胞檢測(cè)術(shù) 選取外周血的單個(gè)核細(xì)胞，對(duì)CD4、CD25、Foxp3、IFN-γ、IL-4、IL-17的熒光抗體進(jìn)行避光孵育，使用PBS緩沖液洗滌后將破膜劑加入，避光孵育5 min之后使用流式細(xì)胞檢測(cè)儀檢測(cè)Th1、Th2、Treg及Th17細(xì)胞含量[5]。

1.3 觀(guān)察指標(biāo)

對(duì)兩組研究對(duì)象進(jìn)行外周血中的Th1、Th2、Treg及Th17免疫應(yīng)答檢測(cè)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 18.0進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料采用（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用（±s）表示，采用t 檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

兩組研究對(duì)象外周血中Th1、Th2、Treg及Th17免疫應(yīng)答檢測(cè)對(duì)比，研究組外周血中的Th1為（19.2±3.5）、Th17為（3.0±0.5）對(duì)照組外周血中的Th1為（30.2±5.5）、Th17為（6.3±0.8），研究組含量低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），研究組外周血中的Th2為（1.8±0.3）、Treg為（2.4±0.8），對(duì)照組外周血中的Th2為（0.7±0.2），Treg為（1.2±0.3）研究組Th2、Treg高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

3 討論

患者肺部免疫功能低下是結(jié)核分枝桿菌出現(xiàn)感染的主要危險(xiǎn)因素。CD4+T淋巴細(xì)胞是發(fā)揮抗結(jié)核免疫應(yīng)答的關(guān)鍵細(xì)胞群，可以通過(guò)進(jìn)一步分化為T(mén)h1、Th2、Treg及Th17等亞群并將發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用[6]。Th1會(huì)分泌TNF-α、IFN-γ及IL-2等細(xì)胞因子，Th2則會(huì)分泌IL-4及IL-5等細(xì)胞因子并且會(huì)參與到對(duì)體液免疫應(yīng)答的調(diào)控過(guò)程中。我院通過(guò)對(duì)肺結(jié)核患者臨床研究分析肺結(jié)核患者體內(nèi)Th1、Th2免疫應(yīng)答情況發(fā)現(xiàn)，肺結(jié)核患者Th1的細(xì)胞含量下降，而Th2的細(xì)胞含量則升高，證明Th1抑制及Th2的增強(qiáng)不單是同肺結(jié)核發(fā)生有密切關(guān)系，還同肺結(jié)核治療之后復(fù)發(fā)也有一定關(guān)聯(lián)性[7]。Treg和Th17則最近幾年被越來(lái)越關(guān)注及重視的CD4+T淋巴細(xì)胞亞群。Th17能夠分泌IL-7，而IL-7在抗感染病毒及抗細(xì)菌感染中的作用及意義重大。結(jié)核分支桿菌感染的發(fā)生過(guò)程當(dāng)中，Th17對(duì)機(jī)體形成結(jié)核保護(hù)性免疫有促進(jìn)作用，并且還能夠促進(jìn)結(jié)核菌的第二次免疫應(yīng)答，從而達(dá)到促進(jìn)結(jié)核分支桿菌的清除速度。Treg則是屬于免疫抑制活性的CD4+T淋巴細(xì)胞，對(duì)Th1和Th17所介導(dǎo)的抗結(jié)核免疫應(yīng)答有抑制功效[8]。我院此次研究結(jié)果顯示，兩組研究對(duì)象外周血中Th1、Th2、Treg及Th17免疫應(yīng)答檢測(cè)對(duì)比，研究組外周血中的Th1、Th7含量低于對(duì)照組（P＜0.05），而Th2、Treg則高于對(duì)照組（P＜0.05）。由研究結(jié)果可知，研究對(duì)象外周血中的Th1、Th2、Treg及Th17免疫應(yīng)答情況發(fā)生失衡同肺結(jié)核疾病的發(fā)生和病情的繼續(xù)發(fā)展變化之間關(guān)系密切，Th1和Th17抑制，Treg和Th17增強(qiáng)都會(huì)對(duì)抗結(jié)核的免疫應(yīng)答情況產(chǎn)生一定影響，最終造成肺結(jié)核疾病的發(fā)生及病情的持續(xù)發(fā)展。同時(shí)也更進(jìn)一步證明Th1、Th2、Treg及Th17免疫應(yīng)答紊亂同肺結(jié)核的病情發(fā)展關(guān)系密切。

綜上所述，通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，肺結(jié)核患者的疾病變化情況同Th1、Th2、Treg及Th17免疫應(yīng)答失衡關(guān)系緊密。

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