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    小兒氨酚烷胺顆粒中人工牛黃含量測(cè)定及質(zhì)量分析

    2018-01-26 08:36:29田運(yùn)佳楊鳳巧王群葆
    關(guān)鍵詞:牛黃三氯甲烷膽紅素

    田運(yùn)佳,楊鳳巧,曹 旭,劉 濤,王群葆,李 斌

    (邢臺(tái)市食品藥品檢驗(yàn)所 化學(xué)室,邢臺(tái) 054000)

    小兒氨酚烷胺顆粒是兒童常用感冒藥,處方主要由對(duì)乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、人工牛黃、咖啡因、馬來(lái)酸氯苯那敏及輔料組成。其中人工牛黃由膽紅素、膽酸、豬去氧膽酸、膽固醇、無(wú)機(jī)鹽等配制而成[1]。膽紅素作為人工牛黃主要有效成分之一,是評(píng)價(jià)人工牛黃質(zhì)量的重要指標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定含膽紅素不得少于0. 63%[1]。全國(guó)現(xiàn)有15家生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)該藥,主要質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[2]未對(duì)藥品中人工牛黃的含量加以檢測(cè)。

    本文參考文獻(xiàn)報(bào)道的膽紅素含量測(cè)定方法[3-5],并經(jīng)方法學(xué)驗(yàn)證后對(duì)來(lái)自流通領(lǐng)域的共11個(gè)生產(chǎn)企業(yè)的26批小兒氨酚烷胺顆粒的人工牛黃膽紅素含量進(jìn)行檢測(cè),進(jìn)而評(píng)價(jià)該品種中人工牛黃膽紅素的質(zhì)量現(xiàn)狀。

    1 儀器與試藥

    儀器: Waters e2695高效液相色譜儀。

    膽紅素對(duì)照品(來(lái)源:中國(guó)藥品生物制品檢定所,批號(hào):100077-200805),甲醇為色譜純,水為超純水,其余試劑為分析純。

    2 方法與結(jié)果

    2.1 色譜條件及系統(tǒng)適用性

    色譜柱為Waters C18(4.6mm×250mm,5μm);流動(dòng)相為甲醇-三氯甲烷-0.1%磷酸(88:6:6);柱溫為30℃;檢測(cè)波長(zhǎng)為449 nm;流速為0.8mL/min;進(jìn)樣量:10μl。在上述條件下膽紅素能與樣品中其他成分達(dá)到基線分離,分離度大于1.5,結(jié)果見(jiàn)圖1。

    A. 對(duì)照品溶液;B. 供試品溶液圖1 HPLC色譜圖

    2.2 溶液的制備

    (1)供試品溶液:取本品5袋內(nèi)容物,置100mL錐形瓶中,精密加三氯甲烷-甲醇-水-鹽酸(90:10:0.3:0.03)混合液25mL,稱定重量,振搖使充分溶出,補(bǔ)足重量,濾過(guò)待測(cè)。

    (2)對(duì)照品溶液:稱取膽紅素對(duì)照品11.98mg,置100mL棕色量瓶中,加三氯甲烷適量,振搖溶解并稀釋至刻度,搖勻,再量取5mL,置100mL棕色量瓶中,用三氯甲烷稀釋至刻度,搖勻。

    2.3 線性關(guān)系

    稱取膽紅素對(duì)照品,按“2.2(2)項(xiàng)下方法”配制成每1mL含膽紅素0.6~24μg的溶液,依法測(cè)定。以峰面積(Y)與進(jìn)樣濃度(X)計(jì)算回歸方程,結(jié)果表明膽紅素在此范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系,回歸方程為:Y=50776X-7032.1 R=0.9997 (n=6)。

    2.4 穩(wěn)定性試驗(yàn)

    取“2.3”項(xiàng)下6μg/mL的對(duì)照溶液分別室溫下避光放置1~8h,依法測(cè)定。計(jì)算峰面積的RSD為0.8%(n=5),表明膽紅素對(duì)照品溶液在8h內(nèi)穩(wěn)定。

    2.5 精密度試驗(yàn)

    按“2.2(2)”項(xiàng)下方法配制每1ml約含膽紅素5μg的對(duì)照品溶液,依法測(cè)定,連續(xù)進(jìn)樣6次,計(jì)算峰面積的RSD為0.3%(n=6),結(jié)果見(jiàn)表3.。

    2.6 重復(fù)性試驗(yàn)

    取某批藥品按“2.2(1)”項(xiàng)下的方法制備供試品溶液,獨(dú)立測(cè)定6份。結(jié)果膽紅素含量的RSD為1.8%,表明方法具有良好的重復(fù)性。

    2.7 回收率試驗(yàn)

    稱取9份空白輔料,分別向輔料中加入三個(gè)不同濃度的膽紅素對(duì)照品溶液,每個(gè)濃度做3份,照“2.2(1)”項(xiàng)下的方法制備溶液,依法測(cè)定,結(jié)果見(jiàn)表1。

    表1 回收率實(shí)驗(yàn)(n=9)

    2.8 樣品測(cè)定結(jié)果

    小兒氨酚烷胺顆粒中人工牛黃為4mg/袋[2],若參考其它有效成分含量限度下限90%,并且人工牛黃中膽紅素含量應(yīng)不低于0.63%[1],即膽紅素理論標(biāo)示量應(yīng)不低于4×0.9×0.63%=0.0227mg/袋,參考膽紅素應(yīng)不得少于標(biāo)示量的90%要求[1],即膽紅素理論值應(yīng)不小于0.020mg/袋。本文對(duì)11個(gè)廠家26批樣品進(jìn)行測(cè)定。統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn),26批樣品中有3批次樣品中膽紅素含量略低于理論下限值,總數(shù)約12%的產(chǎn)品中膽紅素含量低于理論下限值。

    3 討論

    (1)膽紅素作為人工牛黃的主要有效成分[1],含量過(guò)高或過(guò)低直接影響藥效甚至人體健康,膽紅素能清除超氧陰離子自由基,在防御氧化毒性方面起著重要作用,同時(shí)它也有一定的毒性,可對(duì)大腦和神經(jīng)系統(tǒng)引起不可逆的損害[6-7],因此增加對(duì)小兒氨酚烷胺顆粒中人工牛黃膽紅素的考察很有意義。人工牛黃成分多[1],難以全面測(cè)定其成分含量,本文通過(guò)方法學(xué)驗(yàn)證,能準(zhǔn)確的檢測(cè)小兒氨酚烷胺顆粒中膽紅素的含量,進(jìn)而可以衡量藥品中人工牛黃的含量。

    (2)在“2.8”中,3批次藥品膽紅素含量略低于理論下限值可能是以下幾點(diǎn)原因。

    膽紅素是一個(gè)直鏈的四吡咯化合物,遇熱不穩(wěn)定易分解,在加工、運(yùn)輸、儲(chǔ)藏等過(guò)程中,可受熱或光照等因素發(fā)生分解[6-7];因標(biāo)準(zhǔn)中未要求對(duì)人工牛黃含量測(cè)定,可能會(huì)導(dǎo)致企業(yè)投料隨意性大,按下限投料導(dǎo)致含量偏低;因人工牛黃原料來(lái)源、生產(chǎn)工藝不同,所含的膽紅素也不盡相同,原料人工牛黃中膽紅素偏低,也會(huì)造成藥品企業(yè)成品藥膽紅素偏低。

    綜上所述, 現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)中沒(méi)有對(duì)小兒氨酚烷胺顆粒中人工牛黃的檢測(cè),而實(shí)際復(fù)方制劑藥品中的人工牛黃確有低于理論最小值的情況存在,因此建議加入對(duì)人工牛黃中膽紅素的測(cè)定來(lái)更好的控制藥品的質(zhì)量。

    [1] 中國(guó)藥典[S].2015年版.一部.5-6.

    [2] 國(guó)家藥典委員會(huì).化學(xué)藥品地方標(biāo)準(zhǔn)上升國(guó)家標(biāo)準(zhǔn):第十二冊(cè) WS-10001-(HD-1115)-2002[S].北京:國(guó)家藥典委員會(huì),2002:54

    [3] 黃海萍,譚桂山,人工牛黃中膽紅素研究進(jìn)展[J]. 中國(guó)藥事,2005,19(2):114-116.

    [4] 陳劍,劉頻健,王曉一,HPLC法測(cè)定復(fù)方制劑中人工牛黃的膽紅素含量[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué), 2009,37(21) :9839 -9840.

    [5] 曹流,孫冶,曹瀾,人工牛黃中膽紅素含量測(cè)定的影響因素[J]. 中國(guó)衛(wèi)生工程學(xué),2005,4(2):91-92.

    [6] 黃海萍,譚桂山,人工牛黃中膽紅素研究進(jìn)展[J].中國(guó)藥事,2005,19 (2):114-115.

    [7] 范麗艷,徐酉華,新生兒膽紅素腦病的研究進(jìn)展[J]. 兒科藥學(xué)雜志,2016,22(9):50-54.

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