劉建博,鄭 雪,馬麗娟
益生菌也叫益生素、促生素、生菌劑、活菌制劑,是由微生物產(chǎn)生的能夠加速其他微生物增殖的一種物質(zhì),能夠?qū)?dòng)物產(chǎn)生有益作用的微生態(tài)制劑,是由Lilly和Stillwell于1965年首先引入并定義的[1]。之后被Fuller(1989)[2]修正完善,將益生菌定義為能夠促進(jìn)平衡腸道內(nèi)的菌群生態(tài),對(duì)動(dòng)物機(jī)體發(fā)揮有益作用的活的微生物制劑。同時(shí),還具有無(wú)毒無(wú)害,無(wú)殘留,無(wú)不良反應(yīng),能夠替代抗生素以及成本低、使用方便等特點(diǎn)[3]。能夠滿足人們?nèi)找嬖鲩L(zhǎng)的對(duì)綠色動(dòng)物性產(chǎn)品的需要,是目前公認(rèn)的綠色添加劑之一,已被廣泛應(yīng)用于動(dòng)物生產(chǎn)中。本文簡(jiǎn)要對(duì)益生菌的種類,功能,作用機(jī)制,以及在鹿科動(dòng)物上的研究進(jìn)展和應(yīng)用前景作一綜述。
根據(jù)益生菌的微生物種類可分為乳酸菌類益生菌、芽孢桿菌類益生菌、酵母菌類益生菌及光合細(xì)菌類益生菌等。
1.1.1 乳酸菌類益生菌 乳酸菌為厭氧或兼性厭氧菌,能夠分解糖類生成乳酸,使腸道中 pH 值降低,有效阻止腐敗菌增殖;生成細(xì)菌素,抑制病原菌,維持腸道菌群的動(dòng)態(tài)平衡;與此同時(shí),乳酸菌還能合成或分泌一些物質(zhì),如維生素和消化酶類,促進(jìn)腸道消化食物,提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收率,降低宿主血液中膽固醇含量[4],是動(dòng)物腸道中的優(yōu)勢(shì)菌群。目前,乳酸桿菌、鏈球菌、腸球菌和片球菌等是主要應(yīng)用于實(shí)踐生產(chǎn)的益生菌。
1.1.2 芽孢桿菌類益生菌 芽孢桿菌是一種非治病的需氧芽孢桿菌,動(dòng)物腸道中以內(nèi)孢子形式少量寄居,在生長(zhǎng)繁殖過(guò)程中能夠產(chǎn)生多種有效的酶促反應(yīng)。當(dāng)前,枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、短小芽孢桿菌等主要被用于實(shí)際工業(yè)化生產(chǎn)[5-6]。
1.1.3 酵母菌類益生菌 酵母菌類益生菌一般是先培養(yǎng)特定的酵母菌株,然后干燥酵母細(xì)胞并與培養(yǎng)基混合。酵母菌也是零星存在于動(dòng)物腸道的微生物群落,能夠?yàn)閯?dòng)物提供蛋白質(zhì),刺激有益菌的生長(zhǎng),提高機(jī)體免疫力。目前可用于生產(chǎn)益生菌的酵母菌有假絲酵母、釀酒酵母、紅油酵母等。
1.1.4 光合細(xì)菌類益生菌 光合細(xì)菌是地球上最早出現(xiàn)、普遍存在的原核生物,能夠在厭氧條件下進(jìn)行不放氧光合作用。其菌體營(yíng)養(yǎng)豐富,氨基酸組成較齊全,同時(shí)還含有多種維生素、類胡蘿卜素、輔酶 Q 等生理活性物質(zhì)。光合細(xì)菌能夠刺激腸道蠕動(dòng),促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收和毒物廢物的排泄,對(duì)腸道原菌具有拮抗作用。目前可用于生產(chǎn)益生菌的光合細(xì)菌有沼澤紅假單胞菌等。
根據(jù)益生菌的菌種組成可分為單一益生菌和復(fù)合益生菌。
復(fù)合益生菌是由多種益生菌復(fù)合配制而成,具有調(diào)節(jié)腸道菌群平衡,提高飼料轉(zhuǎn)化率,增強(qiáng)機(jī)體免疫力和促進(jìn)生長(zhǎng)的作用。研究表明,給斷奶仔豬飼喂復(fù)合益生菌能夠顯著提高仔豬的平均日增重[7-8]。
根據(jù)益生菌的功能可分為生長(zhǎng)促進(jìn)劑型益生菌和微生態(tài)治療劑型益生菌。生長(zhǎng)促進(jìn)劑型益生菌也稱為添加劑型益生菌,主要添加于幼齡動(dòng)物飼料中,加強(qiáng)營(yíng)養(yǎng),提高飼料轉(zhuǎn)化率,促進(jìn)其生長(zhǎng)。微生態(tài)治療劑型益生菌也稱獸用藥品型益生菌,主要針對(duì)于治療動(dòng)物的消化道疾病[9]。
根據(jù)相關(guān)研究報(bào)道[10],正常動(dòng)物體內(nèi)的微生物區(qū)系處于平衡狀態(tài),益生菌是起主導(dǎo)作用的優(yōu)勢(shì)菌群,但是當(dāng)動(dòng)物機(jī)體受到疾病等因素干擾時(shí),體內(nèi)的微生物區(qū)系失去平衡狀態(tài),當(dāng)致病菌數(shù)量占優(yōu)勢(shì)時(shí),有害產(chǎn)物大量生成,毒素累積,導(dǎo)致動(dòng)物發(fā)病。在正常狀態(tài)下,動(dòng)物腸道內(nèi)的優(yōu)勢(shì)菌群絕大多數(shù)是厭氧菌,占 99%以上。動(dòng)物體內(nèi)的厭氧菌種類主要包括消化桿菌、雙歧桿菌、擬桿菌、乳酸乳桿菌和真桿菌等。此優(yōu)勢(shì)菌群若發(fā)生變化,專性厭氧菌數(shù)量明顯降低,而兼性、需氧菌數(shù)量顯著增加,腸道微生態(tài)失去平衡,輕則擾亂消化機(jī)能和干擾生長(zhǎng)發(fā)育,使生產(chǎn)性能下降,重則誘發(fā)疾病。此時(shí)適當(dāng)補(bǔ)充益生菌,使其在數(shù)量和作用強(qiáng)度占絕對(duì)優(yōu)勢(shì),這些有益菌通過(guò)增殖和代謝,與有害菌群競(jìng)爭(zhēng)氧氣或創(chuàng)造厭氧環(huán)境,使需氧性致病菌群的生長(zhǎng)繁殖受到限制,防止動(dòng)物機(jī)體發(fā)生菌群失調(diào)性疾病。乳酸菌在腸道內(nèi)可產(chǎn)生抑菌物質(zhì),發(fā)掘宿主生長(zhǎng)潛力,并使機(jī)體膽固醇含量和腹瀉率降低[11]?;A(chǔ)日糧中添加乳酸菌能夠使腸道中致病性腸桿菌數(shù)量顯著減少[12]。
益生菌在動(dòng)物消化道內(nèi)能夠分泌一定數(shù)量有益的代謝產(chǎn)物,包括有機(jī)酸、酶類、抑菌物質(zhì)和H2O2等[13]。相關(guān)研究證明[14],乳酸、乙酸、丙酸等揮發(fā)性脂肪酸通過(guò)降低腸道pH,促進(jìn)礦物質(zhì)吸收,形成有活力的胃蛋白酶來(lái)促進(jìn)蛋白質(zhì)類飼料消化;刺激腸道蠕動(dòng),促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收,促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng),提高生產(chǎn)性能。乳酸菌能夠促進(jìn)鈣、鐵、鋅等常量或微量元素吸收,分解木質(zhì)素。能夠講解飼料中脂肪和蛋白質(zhì)等化合物的消化酶和水解酶等,促進(jìn)動(dòng)物的消化吸收,提高飼料轉(zhuǎn)化率。芽孢桿菌在動(dòng)物消化道內(nèi)產(chǎn)生脂肪酶、蛋白酶和淀粉酶,能消解飼糧中的某些抗?fàn)I養(yǎng)因子,提高飼料轉(zhuǎn)化率[15]。仔豬通過(guò)采食含有雙歧桿菌的日糧,可提高腸道內(nèi)的乳糖酶、三肽酶和蔗糖酶的活性[14]。
益生菌在動(dòng)物體內(nèi)能夠一定程度上拮抗病原微生物,協(xié)同消化道內(nèi)的天然菌群形成生物防御屏障,抑制或防止生疏菌、侵?jǐn)_菌在消化道內(nèi)生長(zhǎng)繁殖。益生菌能夠競(jìng)爭(zhēng)性抑制病原微生物附著于腸粘膜上皮細(xì)胞,與病原微生物爭(zhēng)奪有限的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生物靶點(diǎn),阻止病原微生物生長(zhǎng)繁殖。飼喂含芽孢桿菌的日糧,其在動(dòng)物消化道內(nèi)消耗大量氧氣,使胃腸道單位體積內(nèi)氧數(shù)量降低,有利于動(dòng)物消化道內(nèi)的優(yōu)勢(shì)菌群(厭氧菌)生長(zhǎng)繁殖,從而使菌群恢復(fù)平衡,達(dá)到治病抑菌促進(jìn)生長(zhǎng)的目的[16]。乳酸菌能拮抗產(chǎn)氣莢膜梭菌,并能夠抑制沙門氏菌、金黃色葡萄球菌和霍亂弧菌等致病菌的生長(zhǎng)繁殖,其作用與新霉素、四環(huán)素及土霉素等抗生素一樣[17]。
益生菌是一類能夠激活動(dòng)物機(jī)體免疫活性的菌群,其產(chǎn)生的非特異性免疫調(diào)節(jié)因子,提高動(dòng)物的免疫力。大量試驗(yàn)證明,飼喂含有益生菌的飼料,產(chǎn)生的有機(jī)酸及其代謝產(chǎn)物對(duì)一些病原菌有抑制作用,并能提高動(dòng)物機(jī)體內(nèi)抗體水平和巨噬細(xì)胞的活性[18], 增強(qiáng)機(jī)體抵抗力[19]。試驗(yàn)結(jié)果表明,小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的Ca 離子濃度能夠被雙歧桿菌的全肽聚糖提高,使巨噬細(xì)胞活性增強(qiáng)并吞噬細(xì)胞毒素和分泌活性因子[20]。在一定條件下,雙歧桿菌細(xì)胞壁肽聚糖具有免疫原性,體液免疫應(yīng)答反應(yīng)被激活,進(jìn)而克制腫瘤細(xì)胞的增殖和致癌物質(zhì)的生成[21]。給小白鼠灌胃乳酸桿菌,可增加其SIgA漿細(xì)胞數(shù)量,激活腸道淋巴細(xì)胞免疫活性[22]。給仔豬飼喂乳酸桿菌后,顯著提高其血液中的白細(xì)胞和嗜中性細(xì)胞數(shù)量[23]。研究表明,具有免疫調(diào)劑作用的益生菌包括嗜酸乳桿菌、嗜熱鏈球菌、雙歧桿菌[24]。
王全凱等[25]研究表明,益生菌通過(guò)調(diào)節(jié)鹿瘤胃內(nèi)微生物菌群區(qū)系,改善母鹿機(jī)體營(yíng)養(yǎng)代謝能力,提高母鹿泌乳量,促進(jìn)初生仔鹿生長(zhǎng),并且在消化道內(nèi)形成微生物屏障,降解毒性物質(zhì),提高鹿的機(jī)體免疫力。金立明等[26]通過(guò)對(duì)梅花鹿飼喂乳酸菌的試驗(yàn)證明,可提高鹿的采食量,促進(jìn)其生長(zhǎng)發(fā)育和發(fā)揮生產(chǎn)性能;乳酸菌過(guò)真胃后在盲腸和結(jié)腸大量增殖,形成優(yōu)勢(shì)菌群進(jìn)而抑制有害菌增殖。張曉勇[27]研究表明,在 6月齡梅花鹿飼養(yǎng)中添加適量的乳酸菌飼料添加劑能提高梅花鹿的采食量、氮沉積和小腸微生物氮流量。
隨著我國(guó)綜合國(guó)力的高速發(fā)展,人民生活水平的不斷提高,人們的安全和環(huán)保意識(shí)逐漸增強(qiáng),作為綠色飼料添加劑的益生菌克服了抗生素所帶來(lái)的負(fù)面影響,研究人員對(duì)其重視程度越來(lái)越高。近年來(lái),歐美等發(fā)達(dá)國(guó)家相繼頒布法律禁止動(dòng)物飼喂抗生素,而作為抗生素替代品之一的益生菌,其可發(fā)掘的潛力很大。鹿是我國(guó)具有悠久歷史的肉食來(lái)源,藥食兼顧,深受我國(guó)人民的喜愛,消費(fèi)潛力極大。益生菌的開發(fā)和應(yīng)用可促進(jìn)我國(guó)養(yǎng)鹿業(yè)的發(fā)展,但益生菌在鹿科動(dòng)物上的應(yīng)用尚屬起步階段,部分作用機(jī)制尚不明確,但其能夠促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)和提高動(dòng)物機(jī)體免疫能力已經(jīng)得到驗(yàn)證。隨著益生菌作為飼料添加劑的研究進(jìn)一步深入,在鹿飼料中添加益生菌比例逐漸增加,在養(yǎng)鹿生產(chǎn)實(shí)踐中應(yīng)用越來(lái)越多。
參考文獻(xiàn):
[1] Lilly D.M & Stillwell R.H. Probiotics:growth promoting factors produced by micro-organism [J].Science,1965,(147):747-748.
[2] Fuller R. Probiotics in man and animals [J]. Journal of Applied Bacteriology,1989,(66):365-378.
[3] 朱丹,文宇,張佩華.益生菌的功能及其在畜禽生產(chǎn)中的應(yīng)用[J]. 現(xiàn)代畜牧獸醫(yī),2014, 8:27-33.
[4] 張麗芳.仔豬腸道益生菌的分離篩選及生物學(xué)特性研究[D]. 河北 保定:河北農(nóng)業(yè)大學(xué),2005.
[5] 張以芳.微生物飼料的應(yīng)用現(xiàn)狀及前景[J]. 中國(guó)飼料,2001,3:12-13.
[6] 張日俊.動(dòng)物胃腸道菌群與其免疫功能和健康的關(guān)系[J]. 飼料廣角,2002,(21):17-20.
[7] 孫媛.液態(tài)復(fù)合型微生態(tài)制劑的研制及在仔豬生產(chǎn)上的應(yīng)用[D]. 吉林 長(zhǎng)春:吉林農(nóng)業(yè)大學(xué),2006.
[8] 戴榮國(guó),曹國(guó)文.不同益生菌組合對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能的影響[J]. 黑龍江畜牧獸醫(yī),2005,10:35-36.
[9] 金立明,劉忠軍.益生素研究進(jìn)展[J]. 經(jīng)濟(jì)動(dòng)物學(xué)報(bào),2004,8(3):181-184.
[10] 范利霞.復(fù)合微生態(tài)制劑的研制及其對(duì)反芻動(dòng)物免疫技能的影響[D].內(nèi)蒙古呼和浩特:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué),2010.
[11] Thanantong N,Edwards S,Sparagano OA.Characterization of lactic acid bacteria and othergut bacteria in pigs by a macroarraying method[J].Ann N Y Acad Sci,2006,1081:9-276.
[12] De Angelis M,Siragusa S,Caputo L,et al.Survival and persistence of Lactobacillus plantarum4.1 and Lactobacillus reuteri 3S7 in the gastrointestinal tract of pigs[J].Vet Microbiol,2007,123(1-3):44-133.
[13] 王曉旭.圍產(chǎn)期奶牛瘤胃微生物區(qū)系的變化及微生態(tài)制劑的調(diào)控作用[D].吉林長(zhǎng)春:吉林大學(xué),2012.
[14] 劉燕,王靜慧.微生態(tài)理論和我國(guó)動(dòng)物微生態(tài)制劑研究現(xiàn)狀[J].中國(guó)獸藥雜志2002,36(8):35~38.
[15] Risiey C.Pelletingdirect fed microbial[J].Feed Inter,1992.
[16] 孫明梅,李洪龍.動(dòng)物微生態(tài)制劑的研究進(jìn)展[J].飼料研究,2006,(3):28-29.
[17] Kim PI,Jung MY,Chang YH,et al.Probiotic properties of Lactobacillus and Bifidobacterium strains isolated from porcine gastrointestinal tract[J].Appl Microbiol Biotechnol,2007,74(5):1101-1103.
[18] Fuller,R.Probiotics in man and animals[J].J.Appl.Bacteriol.1989,66,365-378
[19] 苗德偉. 飼用微生態(tài)制劑的研究進(jìn)展及其在動(dòng)物生產(chǎn)中的應(yīng)用[J].農(nóng)業(yè)科技與裝備,20136:94-96.
[20] 王立生,潘令嘉.雙歧桿菌的全肽聚糖對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞游離 Ca 離子水平的影響[J].中華微生態(tài)學(xué)和免疫學(xué)雜志,2000,20(3):247.
[21] 孫明梅,李洪龍.淺析動(dòng)物微生態(tài)制劑[J].上海畜牧獸醫(yī)通訊,2006,(2):60-61.
[22] Vinderola G,Matrac.Milkfermentedb by actobacillushelveacus and its non ~bacteiral fractionc onferenhanced protection against salmonella enteritidisserovar typhimurium infection in mice[J].Immunobiology,2007,212(2):107-111.
[23] Herich R,Revajova V,Levkut M.The effect of Lactobacillus paracase and Raftilose P95 upon thenon~ specific immune response of oialets[J].Food and Agricultural Immunologv.2002.14;171-179.
[24] Matsuzaki T,Yamazaki R.The effect of oral feeding of Lactobacillu casei strain shirota onirnmunoglobulinproduction in mice[J].Journ of Diary Science,1998,81;48-53.
[25] 王全凱,宮莉,劉文輝,等.母鹿飼喂益生素效果初報(bào)[J].經(jīng)濟(jì)動(dòng)物學(xué)報(bào),2003,7(2):24- 27.
[26] 金立明,趙全民,車亮,等.益生素對(duì)梅花鹿仔鹿和羔羊日糧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響[J].經(jīng)濟(jì)動(dòng)物學(xué)報(bào),2004,8(2):68-73.
[27] 張曉勇.不同酸度的乳酸菌飼料添加劑對(duì) 6月齡梅花鹿消化率及小腸微生物氮流量的影響[J].飼料工業(yè),2012,17(33):48-52.