間接血凝法檢測(cè)藏系羊棘球蚴病的研究探索

（青海省海南藏族自治州農(nóng)牧局，青海海南 813000）

1 前言

棘球蚴病，也可以稱為棘球蚴病，是一種非常嚴(yán)重的人畜共患病，而我國(guó)又是這種疾病的高發(fā)國(guó)家之一。尤其需要注意的是，近幾年以來，藏系羊的疾病感染率急劇上升，帶來了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。因此，如何切實(shí)做好檢測(cè)，進(jìn)而為做好綜合防控提供一定的依據(jù)和參考尤為重要。間接血凝法憑借其自身的特點(diǎn)，在疾病的檢測(cè)方面有著獨(dú)到之處。

2 關(guān)于間接血凝法檢測(cè)藏系羊棘球蚴病的研究分析

2.1 間接血凝法實(shí)驗(yàn)

在材料的準(zhǔn)備方面，主要就是需要包囊液、血清、試劑以及相關(guān)的實(shí)驗(yàn)儀器。

首先，包囊液的來源主要就是屠宰場(chǎng)中已經(jīng)遭受感染的、呈現(xiàn)陽(yáng)性羊的肝臟包囊，將包囊液抽取出來，在零下20攝氏度的條件下放置，留以備用。

其次，關(guān)于血清，血清的準(zhǔn)備主要就是陽(yáng)性的血清、陰性的血清以及待檢測(cè)的血清三種。

陽(yáng)性血清的主要來源就是剖檢呈現(xiàn)陽(yáng)性、已經(jīng)感染了的藏系羊的血清；而陰性血清則是健康藏系羊的血清；待檢測(cè)的血清就是在無菌條件下進(jìn)行靜脈采血，采血的劑量大約在10ml左右，等到在自然條件下凝固了以后，再對(duì)血清樣本進(jìn)行離心和分離處理。

第三，關(guān)于實(shí)驗(yàn)所用的試劑，主要就是阿氏液、濃度為0.01mol/L、pH值是7.2的磷酸緩沖液以及戊二醛等。

第四，關(guān)于實(shí)驗(yàn)所用的儀器，主要就是高速的離心機(jī)、紫外檢測(cè)儀、蠕動(dòng)泵以及電子天平等。

第五，關(guān)于實(shí)驗(yàn)的方法

實(shí)驗(yàn)的第一步就是要制備棘球蚴抗原，具體的方法就是從有棘球蚴包囊的肝臟中，通過注射器進(jìn)行包囊液的抽取，然后將其放置在零下20攝氏度的條件下進(jìn)行冰凍與融化，最好是能夠反反復(fù)復(fù)進(jìn)行，五次為最為合適，然后再用超聲波進(jìn)行處理，處理的時(shí)間在十分鐘左右，之后進(jìn)行離心處理，處理的時(shí)間半小時(shí)，最好是能夠在15000轉(zhuǎn)/min的離心速度下進(jìn)行，將上清液取出來，就是包囊的粗抗原，再將其放置在-20℃的條件下進(jìn)行保存。

實(shí)驗(yàn)的第二步就是要完成致敏血球的制備，主要包括收集紅細(xì)胞、對(duì)紅細(xì)胞進(jìn)行醛化處理、之后再對(duì)經(jīng)過醛化處理的紅細(xì)胞進(jìn)行鞣化處理，然后經(jīng)過紅細(xì)胞的致敏處理之后，這個(gè)步驟就算完成了。

實(shí)驗(yàn)的第三步就是制備非致敏紅細(xì)胞懸液，相對(duì)于其他過程，就是需要用生理鹽水代替包囊抗原，將其放置在4℃的條件下進(jìn)行保存，留以備用。

第六就是對(duì)抗原蛋白進(jìn)行測(cè)定，將包囊粗抗原取出來，大約5ml，進(jìn)行過柱之后，等到包囊粗抗原的液面和層析柱的膠液面持平的時(shí)候，加入pH值是7.2的PBS，進(jìn)行洗脫處理，用紫外檢測(cè)儀器進(jìn)行檢測(cè)，等到峰值出現(xiàn)的時(shí)候，就是可以進(jìn)行收集的標(biāo)志，把第一峰的抗原洗脫液和第二峰的抗原洗脫液進(jìn)行混合，進(jìn)行測(cè)定，獲取蛋白質(zhì)的準(zhǔn)確含量。

第七就是關(guān)于IHA實(shí)驗(yàn)，主要包括以下幾個(gè)步驟，分別是對(duì)抗體的效價(jià)進(jìn)行測(cè)定、明確判定的具體標(biāo)準(zhǔn)。

2.2 實(shí)驗(yàn)的結(jié)果分析

首先，關(guān)于IHA抗原的效價(jià)，對(duì)于被檢測(cè)的血清，如果其IHA的抗體效價(jià)大于或者是等于1：16的時(shí)候，就可以將其判定為陽(yáng)性。

其次，在IHA棘球蚴病的檢測(cè)結(jié)果方面，在這個(gè)實(shí)驗(yàn)中，被檢測(cè)藏系羊的血清樣本共有51份，分別來自不同的地區(qū)，在檢測(cè)的結(jié)果方面，是存在一定的差異的，最高的陽(yáng)性率超過了40%，將近50%，最低的則是沒有。

2.3 討論分析

不同地區(qū)之間棘球蚴病的感染了是表現(xiàn)出了一定程度差異的，其主要的原因在于不同地區(qū)藏系羊棘球蚴病的感染程度有所不同。

另外寄一個(gè)就是關(guān)于屠宰場(chǎng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與其他地區(qū)的結(jié)果表明，育肥感染棘球蚴病的感染率更低一些，這樣的話就表明，如果藏系羊是自然放羊的話，那么在棘球蚴病的感染率方面，相對(duì)于育肥羊來說，是要更高一些的。究其原因的話，藏系羊棘球蚴病的感染和狼犬等肉食類的動(dòng)物有著直接性的關(guān)系，由于狼狗污染管理，排出來的糞便中的蟲卵等就很容易對(duì)草場(chǎng)造成污染，藏系羊在采食的時(shí)候就會(huì)將蟲卵吞入，進(jìn)而遭受感染，而如果藏系羊是育肥的話，就在某種程度上將棘球蚴病的傳染途徑切斷了，進(jìn)而減少了棘球蚴病的感染。

總的來說，在青海很多地區(qū)，藏系羊棘球蚴病的感染率是非常高，相關(guān)部門也一定要給予高度的重視，要進(jìn)一步加大宣傳工作的力度，讓眾多的牧民意識(shí)到這種疾病的嚴(yán)重危害性以及日常的預(yù)防方法。讓大家意識(shí)到對(duì)于藏系羊最好是采用拴養(yǎng)的方式，定期進(jìn)行驅(qū)蟲工作，同時(shí)做好糞便的無害化處理工作。

通過這次的實(shí)驗(yàn)，說明間接血凝法是一種簡(jiǎn)單、快捷、經(jīng)濟(jì)性高而且重復(fù)性良好的檢測(cè)方法，為藏系羊棘球蚴病的診斷和綜合防治提供了有效的手段，也是可以應(yīng)用于大范圍藏系羊棘球蚴病的血清學(xué)調(diào)查。

3 結(jié)語

從上文的論述中，我們對(duì)于棘球蚴病有了進(jìn)一步了解和認(rèn)識(shí)，同時(shí)也更加明確在青海地區(qū)做好這種疾病的檢測(cè)與診斷和防治具有極為重要的作用和意義。對(duì)于當(dāng)?shù)卣拖嚓P(guān)部門來說，一定要充分意識(shí)到這一點(diǎn)，進(jìn)而在立足實(shí)際的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步加大宣傳力度，讓廣大牧民充分意識(shí)到這種疾病可能導(dǎo)致的危害性，進(jìn)而給予足夠重視，切實(shí)做好這種疾病的綜合防控。

[1]張軍.棘球蚴病的研究概況[J].中國(guó)獸醫(yī)科學(xué)，2000，30（12）：119.

[2]史大中.中國(guó)囊性棘球蚴病的地理分布[J].疾病預(yù)防控制通報(bào)，2000，（1）：74-75.

[3]許隆祺，蔣則孝，余森海，等.當(dāng)前我國(guó)人體寄生蟲病流行的趨勢(shì)和特點(diǎn)[J].中國(guó)寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志，1995，13（3）：214-217.