不同程度美拉德反應(yīng)下石斛合劑對(duì)糖尿病治療的影響

程欲++張捷平++王玉杰++張霽輝++施紅

摘 要：目的：復(fù)方石斛合劑在不同熬煮時(shí)間美拉德反應(yīng)作用下對(duì)降血糖的影響。方法：分別2h和0h熬煮藥劑，灌胃糖尿病小鼠，同時(shí)以西藥二甲雙胍為參照，持續(xù)作用6周時(shí)間，檢測(cè)空腹血糖。結(jié)果：2h熬煮的藥劑與二甲雙胍作用的降糖作用相當(dāng)，優(yōu)于0h熬煮的藥劑。

關(guān)鍵詞：復(fù)方石斛合劑；美拉德反應(yīng)；降血糖

中圖分類號(hào)：R285 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1671-2064（2017）24-0204-01

中醫(yī)中藥是我國傳承千年的瑰寶。中藥來源于自然界，有食物的天然屬性，俗稱“藥食同源”，需經(jīng)炮制、制備成劑才能發(fā)揮效力[1-2]。此過程是原成分的動(dòng)態(tài)遷移還是化學(xué)反應(yīng)，或是兩者兼有？食品加工中還原糖類與蛋白質(zhì)會(huì)產(chǎn)生美拉德反應(yīng)（Maillard reaction）[2]。與之同源的中藥在炮制和制備成劑過程中產(chǎn)生的“藥香和黑精”現(xiàn)象就與美拉德反應(yīng)有關(guān)，且預(yù)期應(yīng)該比食品作用更加復(fù)雜，對(duì)中藥復(fù)方制劑質(zhì)量產(chǎn)生重大影響。

前期研究表明，復(fù)方石斛合劑具有抗氧化、調(diào)節(jié)和提高免疫力，降低Ⅱ型糖尿病患者血糖、血脂、粘稠度等作用[3-5]。為指導(dǎo)臨床應(yīng)用，本研究通過不同熬煮時(shí)間，調(diào)節(jié)制劑美拉德反應(yīng)程度，以空腹血糖指標(biāo)來檢驗(yàn)石斛合劑的降糖作用。

1 材料與方法

1.1 材料

動(dòng)物：db小鼠（Leptln受體基因缺陷導(dǎo)致先天肥胖T2DM小鼠，發(fā)病過程與人T2DM非常相似），體質(zhì)量30-40g，雌雄分籠。C57BL/6J小鼠，體質(zhì)量30-40g，雌雄分籠。動(dòng)物飼養(yǎng)于福建中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心。

藥物：復(fù)方石斛合劑（石斛、黃芪、丹參、五味子、葛根等），降糖西藥采用二甲雙胍，購自福建省第三人民醫(yī)院；血糖檢測(cè)試劑盒（魚躍）。

1.2 方法

1.2.1 制備

復(fù)方石斛合劑以3倍水煎后過濾，備用。其中0h組為藥劑開始沸騰，立即取藥；2h組為藥劑煎煮2小時(shí)后取藥。

1.2.2 給藥

正常小鼠8只，體質(zhì)量30-40g，雌雄分籠，即空白對(duì)照組。db小鼠34只（空腹血糖≥11.1mM/L，造模成功），體質(zhì)量30-40g，雌雄分籠（中藥組：模型組9只，2h組9只，0h組8只；西藥治療組8只）。各組動(dòng)物在相同條件下飼養(yǎng)，早晚各1次灌胃給藥（空白對(duì)照組：等量生理鹽水；中藥組：復(fù)方石斛合劑；西藥組：二甲雙胍）用藥劑量依據(jù)2000年版《中華人民共和國藥典》人和動(dòng)物體表面積等效劑量比率表計(jì)算，連續(xù)給藥6W。分別于0W、3W、6W斷尾檢測(cè)空腹血糖。

1.2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

利用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理、分析，結(jié)果以±s表示。

2 結(jié)果

復(fù)方石斛合劑不同熬煮時(shí)間作用下對(duì)降血糖作用有所差異。給藥3W后，禁食12h，斷尾取血，檢測(cè)空腹血糖（如圖1所示）。相較于模型組，給藥組（中藥組和西藥組）均有不同程度的降糖作用。中藥2h組與西藥組降糖效果相當(dāng)，優(yōu)于中藥0h組。未達(dá)到完全痊愈水平（3.9mM/L≤空腹血糖≤6.1mM/L）。

復(fù)方石斛合劑與二甲雙胍應(yīng)用于Ⅱ型糖尿病治療。本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，持續(xù)用藥3周，中藥降糖效果可與西藥相當(dāng)，能夠降低空腹血糖，起到一定治療效果。

給藥6W后，禁食12h，斷尾取血，檢測(cè)空腹血糖（如圖2所示）。相較于模型組，給藥組（中藥組和西藥組）均有不同程度的降糖作用。中藥2h組與西藥組降糖效果相當(dāng)，優(yōu)于中藥0h組。仍未達(dá)到痊愈水平。

比較6W與3W空腹血糖數(shù)據(jù)，模型組空腹血糖值有所上升，數(shù)倍于正常值，說明隨著時(shí)間推移空腹血糖指標(biāo)加重；給藥組（中藥組和西藥組）空腹血糖值均有所降低，說明經(jīng)過一段時(shí)間的給藥治療，病有所好轉(zhuǎn)，體現(xiàn)于指標(biāo)有所降低。

綜合以上結(jié)果表明，2h熬煮藥物，使其各配伍藥劑充分相互作用，更有利于美拉德反應(yīng)作用，能夠有效提高藥效。長期服用此種方式熬煮的復(fù)方石斛合劑，能夠有效控制空腹血糖，有利于治療Ⅱ型糖尿病。

3 討論

不同熬煮時(shí)間作用下，復(fù)方石斛合劑各配伍藥間發(fā)生復(fù)雜的美拉德反應(yīng)，產(chǎn)生不同藥效。2h熬煮能夠使藥物充分作用，更好的發(fā)揮效力。本次實(shí)驗(yàn)以西藥二甲雙胍作為對(duì)照，表明長期服用2h熬煮的復(fù)方石斛合劑與其效果相當(dāng)，體現(xiàn)中藥應(yīng)用于治療Ⅱ型糖尿病方面的潛能。

雖然本次實(shí)驗(yàn)不能在藥物作用下，使得實(shí)驗(yàn)組空腹血糖水平恢復(fù)到正常水平，但隨著實(shí)驗(yàn)周期的推進(jìn)，還是有望接近或達(dá)到此目標(biāo)。同時(shí)，本次實(shí)驗(yàn)選取db小鼠，屬于基因缺陷型致病模型。有可能因?yàn)閷?shí)驗(yàn)對(duì)象本身因素，阻礙藥物效果。有待后續(xù)實(shí)驗(yàn)改進(jìn)、驗(yàn)證。

參考文獻(xiàn)

[1]周逸群，賀福元，楊巖濤，等.美拉德反應(yīng)研究現(xiàn)狀及對(duì)中藥炮制和制劑工藝研究方法的影響[J].中草藥，2014，45（1）：125-130.

[2]吳惠玲，王志強(qiáng)，韓春，等.影響美拉德反應(yīng)的幾種因素研究[J].現(xiàn)代食品科技，2010，26（5）：441-444.

[3]Choi K， Kim YB.Molecular mechanism of insulin resistance in obesity and type 2 diabetes[J].Korean J Intern Med，2010；25（2）：119-129.

[4]張捷平，秦崇濤，林凡，等.復(fù)方石斛合劑調(diào)節(jié)胰島素受體表達(dá)促進(jìn)HepG2細(xì)胞糖代謝[J].中國老年學(xué)雜志，2012，32（11）：4930-4933.

[5]辛金鐘，王麒又，陳麗娟，等.石斛合劑改善2型糖尿病胰島素抵抗的臨床研究[J].中國現(xiàn)代醫(yī)生，2010，48（3）：58-59.endprint