飼糧陰陽離子平衡值對(duì)遼寧絨山羊生長性能、血清和尿液生化指標(biāo)及尿結(jié)石發(fā)病情況的影響

于 磊 孫亞波 叢玉艷* 閆 晗 宋先忱 全治國

(1.沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院，沈陽 110866；2.遼寧省畜牧科學(xué)研究院，遼陽 111000)

近些年隨著反芻動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)的迅速發(fā)展，飼糧陰陽離子平衡(DCAB)對(duì)于動(dòng)物的健康和生產(chǎn)性能的相關(guān)研究越來越受到重視和關(guān)注[1-5]。Gazi等[6]證明，減少飼糧中磷酸鹽含量，可降低犢牛尿結(jié)石發(fā)病率。王金勇等[7]通過在飼糧中添加鉀、磷、鎂調(diào)高了飼糧的DCAB值，成功誘發(fā)了山羊患尿結(jié)石。目前關(guān)于DCAB值對(duì)羊尿結(jié)石發(fā)病情況的影響尚不明確。本試驗(yàn)旨在研究DCAB值對(duì)遼寧絨山羊生長性能、血清及尿液生化指標(biāo)的影響，為闡明飼糧DCAB值對(duì)羊尿結(jié)石發(fā)生的影響奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理

選取年齡(1.5歲左右)、體重(30 kg左右)相近的健康雄性遼寧絨山羊50只，隨機(jī)分為5組，每組10只，單欄飼養(yǎng)?；A(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。本試驗(yàn)利用DCAB值=(鈉離子+鉀離子+0.38×鈣離子+0.3×鎂離子)-(氯離子+0.6×硫離子+0.5×磷酸根離子)[8]這一公式來計(jì)算飼糧的DCAB值，通過添加氯化銨(NH4Cl)、碳酸氫鈉(NaHCO3)、氧化鎂(MgO)調(diào)配出5組DCAB值分別為0(Ⅰ組)、150(Ⅱ組)、300(Ⅲ組)、450(Ⅳ

組)、600 mEq/kg DM(Ⅴ組)的試驗(yàn)飼糧?；ㄉ斩捄陀衩捉斩挿鬯槌砷L度為1 cm左右，飼喂前，按照配方(表1)將精料與粗料攪拌均勻，于每日08:00和14:00分2次單槽飼喂，自由飲水。預(yù)試期15 d，正試期90 d。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))

1)預(yù)混料為每千克飼糧提供The premix provided the following per kg of the diet：復(fù)合酶 complex enzyme 0.14 g，微生態(tài)制劑 micro-ecology preparation 0.245 g，Cu (as copper sulfate) 1.148 mg，Mn (as manganese sulfate) 79.8 mg，Zn (as zinc sulfate) 80.64 mg，Se (as sodium selenite) 0.364 mg，VA 1.792 mg，VD30.448 mg，VE 2.632 mg。

2)消化能水平為計(jì)算值，其余營養(yǎng)水平為實(shí)測(cè)值。DE was a calculated value, while the others were measured values.

1.2 飼糧養(yǎng)分含量的測(cè)定與計(jì)算

干物質(zhì)含量的測(cè)定采用國標(biāo)法(GB/T 6435—2006)，粗蛋白質(zhì)含量的測(cè)定采用凱氏定氮法，鈣含量的測(cè)定采用乙二胺四乙酸二鈉(EDTA)絡(luò)合滴定快速測(cè)鈣法，磷含量的測(cè)定采用鉬黃比色法[9](UV-5500型分光光度計(jì))，硫含量的測(cè)定采用硫酸鋇比濁法(UV-5500型分光光度計(jì))，氯含量的測(cè)定采用國標(biāo)法(GB/T 6439—1992)，鈉、鉀、鎂含量的測(cè)定采用原子吸收法[10](日立Z-2000原子吸收分光光度計(jì))。

飼糧消化能水平由各飼料原料的羊消化能值計(jì)算得來，飼料原料的羊消化能值由《中國飼料成分及營養(yǎng)價(jià)值表(第21版)》查得。

1.3 血清及尿液樣品的采集

正試期開始當(dāng)天(第1天)及每隔15 d后的早晨空腹對(duì)試驗(yàn)羊頸靜脈采血10 mL，并制備血清，將其分裝于2 mL的離心管中，同時(shí)間采集尿液，-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4 指標(biāo)測(cè)定

1.4.1 生長性能的測(cè)定

每天早晨在飼喂前收集廢料并稱重，準(zhǔn)確記錄每天耗料量，計(jì)算各階段平均日采食量(風(fēng)干狀態(tài))。正試期第1天及之后每15 d后的早晨空腹對(duì)試驗(yàn)羊稱重1次，計(jì)算各組試驗(yàn)羊平均日增重，并計(jì)算料重比。

1.4.2 血清和尿液生化指標(biāo)的測(cè)定

采用羅氏c702型全自動(dòng)生化免疫分析儀測(cè)定血清及尿液尿素含量(脲酶紫外速率法)、尿酸含量(尿酸酶紫外法)、肌酐含量(酶法)[11]，尿素、尿酸、肌酐試劑盒均購自羅氏公司，編號(hào)分別為05171873190、05171857190、05168589190。

1.4.3 尿結(jié)石發(fā)病情況測(cè)定

每天觀察羊的臨床表現(xiàn)，觀察有無尿結(jié)石癥狀，出現(xiàn)尿閉1～2 d后，剖殺山羊，并收集結(jié)石。其余山羊在試驗(yàn)期滿全部剖殺，檢查泌尿道結(jié)石情況。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)運(yùn)用SPSS 17.0軟件進(jìn)行單因素方差分析，并用Duncan氏法進(jìn)行多重比較。分別以P<0.05和P<0.01作為差異顯著性和極顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)，試驗(yàn)數(shù)值用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 生長性能

由表2可知，整個(gè)試驗(yàn)期，DCAB值對(duì)山羊平均日增重影響不顯著(P>0.05)。第1～15天、第15～30天、第30～45天、第45～60天、第60～75天時(shí)，Ⅴ組平均日采食量顯著或極顯著高于其他4組(P<0.05或P<0.01)，第75～90天時(shí)，Ⅰ組與Ⅴ組間差異不顯著(P>0.05)，但均極顯著高于Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ組(P<0.01)。料重比，第1～15天Ⅰ組極顯著高于其他各組(P<0.01)，第15～30天顯著或極顯著低于Ⅰ、Ⅲ組(P<0.05或P<0.01)，第60～75天、第75～90天Ⅴ組顯著或極顯著高于其他各組(P<0.05或P<0.01)。

表2 DCAB值對(duì)山羊生長性能的影響

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)無字母或相同字母表示差異不顯著(P>0.05)，不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)。表3、表4和表5同。

In the same row, values with no letter or the same letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), and with different capital letter superscripts mean significant difference (P<0.01). The same as Table 3, Table 4 and Table 5.

2.2 血清及尿液生化指標(biāo)

2.2.1 血清及尿液尿素含量

由表3可知，第75、90天時(shí)，Ⅴ組血清尿素含量極顯著高于其他4組(P<0.01)，第90天時(shí)，Ⅳ組顯著或極顯著高于Ⅰ和Ⅱ組(P<0.05或P<0.01)。第75、90天時(shí)，尿液尿素含量均以Ⅲ組最高，Ⅴ組最低，第75天時(shí)，Ⅲ組顯著或極顯著高于和Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ組(P<0.05或P<0.01)，與Ⅳ組差異不顯著(P>0.05)，第90天時(shí)，Ⅲ組極顯著高于其他4組(P<0.01)，Ⅳ組顯著高于Ⅴ組(P<0.05)。

2.2.2 血清及尿液肌酐含量

由表4可知，第60、75天時(shí)，Ⅴ組血清肌酐含量最高，Ⅳ組次之，Ⅴ組顯著或極顯著高于其他4組(P<0.05或P<0.01)；第90天時(shí)，Ⅳ組血清肌酐含量顯著或極顯著高于其他4組(P<0.05或P<0.01)。第15、30、45天，尿液肌酐含量均以Ⅴ組最高，第15天時(shí)顯著或極顯著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組(P<0.05或P<0.01)，第30天時(shí)顯著高于Ⅲ組(P<0.05)，第45天時(shí)顯著高于Ⅱ組(P<0.05)。

表3 DCAB值對(duì)山羊血清及尿液尿素含量的影響

表4 DCAB值對(duì)血清及尿液肌酐含量的影響

2.2.3 血清及尿液尿酸含量

由表5可知，第45天時(shí)，Ⅲ組血清尿酸含量顯著高于Ⅴ組(P<0.05)；第75、90天時(shí)，Ⅴ組血清尿酸含量最高，Ⅱ組含量最低，Ⅴ組顯著或極顯著高于其他4組(P<0.05或P<0.01)。第15、30天時(shí)，Ⅴ組尿液尿酸含量顯著或極顯著高于其他4組(P<0.05或P<0.01)；第75、90天，Ⅲ組尿液尿酸含量顯著或極顯著高于其他4組(P<0.05或P<0.01)。

表5 DCAB值對(duì)山羊血清及尿液尿酸含量的影響

2.3 尿結(jié)石發(fā)病情況

由表6可知，Ⅰ、Ⅱ組絨山羊無尿結(jié)石發(fā)生，Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組分別有3、4、5只絨山羊患尿結(jié)石，第38天Ⅴ組出現(xiàn)第1只發(fā)病羊。

表6 試驗(yàn)羊尿結(jié)石羊發(fā)病情況

3 討 論

3.1 DCAB值對(duì)遼寧絨山羊生長性能的影響

Tucker等[12]報(bào)道，隨著DCAB值的降低，采食量降低。有學(xué)者認(rèn)為羔羊DCAB值為450 mEq/kg DM時(shí)采食量最高[13]。DCAB值為0、150 mEq/kg DM時(shí)平均日采食量低于600 mEq/kg DM時(shí)，原因可能為陰離子鹽通常適口性較差，影響了動(dòng)物的采食量[14]。

3.2 DCAB值對(duì)遼寧絨山羊血清及尿液生化指標(biāo)的影響

有研究表明，當(dāng)血清尿素含量異常升高時(shí)常常預(yù)示著腎功能的異常[15]。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)， DCAB值為600 mEq/kg DM時(shí)血清尿素含量在試驗(yàn)第75、90天時(shí)極顯著高于DCAB值為0、150、300、450 mEq/kg DM時(shí)，尿液尿素含量在第75天時(shí)極顯著低于DCAB值為300 mEq/kg DM時(shí)，第90天時(shí)顯著或極顯著低于其他各組，尿素經(jīng)腎小球?yàn)V過隨尿液排出，當(dāng)腎實(shí)質(zhì)受損時(shí)，腎小球?yàn)V過率降低，使血清尿素含量增加，尿液尿素含量降低，因此，本試驗(yàn)結(jié)果的出現(xiàn)可能源于腎功能出現(xiàn)異常。DCAB值為150 mEq/kg DM時(shí)血清尿素含量波動(dòng)范圍較小且低于DCAB值為0、300、450、600 mEq/kg DM時(shí)，平均日增重較高，這可能由于該飼糧能改善羊體內(nèi)的氨基酸平衡狀況進(jìn)而提高機(jī)體對(duì)蛋白質(zhì)的利用率[16]。

孫衛(wèi)東等[17]認(rèn)為血清肌酐含量上升可作為腎小球?yàn)V過功能受損的標(biāo)志，代表著腎功能減退或衰竭。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在第0～45天，各組血清肌酐含量差異均不顯著，在第75天時(shí)，DCAB值為450、600 mEq/kg DM時(shí)血清肌酐含量高于DCAB值為0、150、300 mEq/kg DM時(shí)，明顯高于正常水平[18]，原因可能為肌酐主要由腎小球?yàn)V過并排出，由于腎臟代償功能較強(qiáng)，在腎小球早期或輕度受損時(shí)，血清肌酐含量可表現(xiàn)正常水平，當(dāng)腎小球?yàn)V過功能嚴(yán)重下降或受損時(shí)，血清肌酐含量會(huì)迅速上升，尿液肌酐含量會(huì)下降。因此，本試驗(yàn)結(jié)果提示， DCAB值為450、600 mEq/kg DM時(shí)山羊腎功能可能嚴(yán)重減退或衰竭。

機(jī)體中的尿酸大部分由腎臟通過尿液排出，正常情況下，機(jī)體尿酸產(chǎn)生的速度與腎臟排泄的速度處于一種動(dòng)態(tài)平衡，血清尿酸含量基本恒定[19-20]。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，DCAB值為600 mEq/kg DM時(shí)血清尿酸含量在第75、90天時(shí)顯著或極顯著高于DCAB值為0、150、300、450 mEq/kg DM時(shí)，但尿液尿酸含量較低，其原因可能在于當(dāng)腎臟受損時(shí)，這種平衡被打破，尿酸排泄減少，機(jī)體尿酸潴留導(dǎo)致血清尿酸含量升高。血清尿酸含量高表明在一定程度上山羊體內(nèi)蛋白質(zhì)的分解加快，含氮物質(zhì)的合成降低，不利于生長。

3.3 DCAB值對(duì)遼寧絨山羊尿結(jié)石發(fā)病情況的影響

當(dāng)腎功能損害時(shí)，可造成血清尿素、肌酐和尿酸含量增高[15]。本試驗(yàn)中，山羊長期飼喂DCAB值為300、450、600 mEq/kg DM的飼糧，血清及尿液尿素、肌酐和尿酸含量異常。尿素、肌酐主要經(jīng)腎小球?yàn)V過隨尿液排出，當(dāng)腎實(shí)質(zhì)受損時(shí)，腎小球?yàn)V過功能下降或受損，使血清尿素、肌酐含量迅速上升，尿液尿素、肌酐含量下降，可能造成羊腎功能損害，導(dǎo)致尿酸排泄減少，機(jī)體尿酸潴留使血清尿酸含量升高。同時(shí)，腎功能減退或衰竭，使腎小球?yàn)V過腎小管重吸收障礙，易導(dǎo)致山羊機(jī)體內(nèi)環(huán)境改變，使體內(nèi)礦物質(zhì)營養(yǎng)等多種代謝紊亂，促進(jìn)尿結(jié)石的形成。

4 結(jié) 論

① DCAB值影響遼寧絨山羊的平均日采食量，但不影響平均日增重，高DCAB值可提高羊的平均日采食量，當(dāng)DCAB值為150 mEq/kg DM時(shí)，料重比較低。

② 隨著DCAB值的升高，遼寧絨山羊血清尿素、肌酐含量升高，DCAB值為150 mEq/kg DM時(shí)，血清及尿液尿素含量波動(dòng)范圍較小，含量較低，肌酐含量相對(duì)恒定。

③ DCAB值為300、450、600 mEq/kg DM時(shí)遼寧絨山羊患尿結(jié)石，DCAB值為0、150 mEq/kg DM時(shí)，無尿結(jié)石發(fā)生。

④ 綜合分析表明，DCAB值為150 mEq/kg DM時(shí)，有利于維持遼寧絨山羊血清和尿液部分相關(guān)生化指標(biāo)在正常水平及預(yù)防尿結(jié)石的發(fā)生。

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*Corresponding author, professor, E-mail: cyy66@163.com