體育科學(xué)研究中實驗動物“3R”原則的應(yīng)用及進(jìn)展

左 群，于新凱

(上海體育學(xué)院運(yùn)動科學(xué)學(xué)院，上海 200438)

體育科學(xué)研究中開展動物實驗越來越普遍。開展動物實驗必須遵循國際上實驗動物福利的要求，其中“3R”原則是核心內(nèi)容。但在體育科學(xué)研究中，存在對實驗動物的福利問題關(guān)注度不高，對實驗動物福利所要求的“3R”原則知曉率低等狀況。實驗動物的福利問題直接影響實驗動物的身心健康，對實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性產(chǎn)生重要影響。因此，在我國體育科學(xué)研究日趨國際化、交流日益頻繁的今天，加強(qiáng)對實驗動物“3R”原則在體育科學(xué)研究中的認(rèn)識和應(yīng)用就顯得尤為重要和迫切。

1 實驗動物的“3R”原則

實驗動物是為了科學(xué)研究而專門培育或改造的一類動物，主要用于科學(xué)實驗研究。作為一種生命形式，和人類一樣，實驗動物同樣具有自身生理和心理的各項需求。作為人類的替身，實驗動物需要經(jīng)受各種實驗因素的處理，由此遭受生理或心理的痛苦[1]。因此，在使用實驗動物時應(yīng)保障實驗動物福利，遵循實驗動物倫理要求，善待實驗動物，盡量減少對實驗動物的生理和心理傷害，確保實驗動物的一切狀態(tài)都有利于科學(xué)研究的正常進(jìn)行，將對實驗研究的背景性干擾降到最低，以最少的動物代價獲得最大的科學(xué)效益。動物福利的首要原則是滿足動物維持生命的需要、維持健康的需要及維持舒適的需要，這3個方面決定了動物的生活質(zhì)量[2]。解除動物痛苦，讓動物在任何條件下享有“5大自由”是動物福利的基本原則，包括：(1)不受饑渴的自由；(2)生活舒適的自由；(3)不受痛苦、傷害和疾病的自由；(4)生活無恐懼和悲傷感的自由；(5)表達(dá)天性的自由。生理健康、心理快樂、有益于科學(xué)研究是實驗動物福利的完整內(nèi)涵[3]。

如何在開展動物實驗過程中保障實驗動物福利，“3R”原則是重要核心內(nèi)容。“3R”原則由動物學(xué)家Russell 和微生物學(xué)家Burch 于1959 年提出，指的是Reduction(減少)、Replacement(替代)和Refinement(優(yōu)化)[4]。減少指的是在動物實驗研究中，為了減少動物所承受的痛苦總量，要盡量減少實驗動物的使用數(shù)量。替代指的是盡量使用沒有知覺的實驗材料(體外方法)替代活體動物(體內(nèi)方法)，或使用低等動物替代高等動物進(jìn)行實驗，并獲得相同實驗效果的科學(xué)方法。優(yōu)化指的是在符合科學(xué)原則的基礎(chǔ)上，通過改善實驗環(huán)境條件，善待動物，提高動物福利[1]。2005 年，美國芝加哥的“倫理化研究國際基金會”還在“3R”的基礎(chǔ)上提出了“4R”原則，增加了“Responsibility”(責(zé)任)作為第4 個原則，要求人們在生物學(xué)實驗中增強(qiáng)倫理觀念，呼吁實驗者對人類和動物都要有責(zé)任感[5]?！?R”原則與實驗動物福利有著密切的關(guān)聯(lián)，“3R”技術(shù)和方法的應(yīng)用為實現(xiàn)實驗動物福利提供了有力的保障。

2 體育科學(xué)研究中動物實驗的特點

體育科學(xué)研究中開展動物實驗的領(lǐng)域相當(dāng)廣泛，通過動物實驗研究者可以從分子、細(xì)胞、組織、器官、系統(tǒng)等水平深入探討運(yùn)動在提高運(yùn)動能力、改善健康、預(yù)防疾病、延緩衰老等方面的作用機(jī)制，為運(yùn)動在挖掘運(yùn)動潛能、促進(jìn)健康、提高生活質(zhì)量等方面的作用提供大量實驗數(shù)據(jù)。但體育科學(xué)中的動物實驗不同于生物、醫(yī)學(xué)等研究領(lǐng)域，在實驗動物的選擇、實驗動物的干預(yù)和處理上具有自身的特點。

2.1 實驗動物的選擇

運(yùn)動是體育科學(xué)研究中主要的干預(yù)手段，因此，實驗動物能否進(jìn)行運(yùn)動、運(yùn)動能力是否可控、運(yùn)動效果能否定量化評價是必須考慮的問題。此外，實驗動物與人類的同源性或基因相似度如何，所得實驗結(jié)果是否具有代表性，實驗動物的成本和倫理要求等等也是選擇實驗動物的考量標(biāo)準(zhǔn)。綜合以上要求，目前，在體育科學(xué)研究中嚙齒類動物是使用最多的實驗動物，其次，果蠅和斑馬魚的應(yīng)用在體育科學(xué)研究中也開始嶄露頭角。

嚙齒類動物大鼠和小鼠的基因組和人類有較高的同源性，生理、生化和發(fā)育過程和人類相似，同時具有相對可控的運(yùn)動能力，通過設(shè)定跑臺的速度和運(yùn)動時間、游泳運(yùn)動的時間等可建立規(guī)律的運(yùn)動訓(xùn)練方案。因此，嚙齒類動物在體育科學(xué)研究中使用最多。根據(jù)實驗?zāi)康暮鸵螅梢赃x擇不同品系、年齡、性別的實驗動物。如大鼠的Sprague-Dawley(SD)、Wistar、Lewis品系[6-7]，小鼠中的BALB/C、C57BL/6、ICR品系都是體育科學(xué)研究中常用的實驗動物[8-10]。

作為低等生物，果蠅擁有許多與人類同源的基因，是衰老、神經(jīng)生物學(xué)的研究中常用的模式生物。和哺乳動物相比，果蠅是唯一具有心臟的無脊椎動物，且心臟組織分化精細(xì)。加上果蠅生命周期短(平均壽命60天左右)，表型易于觀察。因此，果蠅是研究心臟遺傳與發(fā)育基因調(diào)控的理想模式動物[11-12]。近些年來果蠅在體育科學(xué)研究中的應(yīng)用也開始得到關(guān)注[13-14]。如鄭瀾等[15]發(fā)現(xiàn)，果蠅攀爬指數(shù)隨著年齡增加而下降，運(yùn)動可增強(qiáng)果蠅運(yùn)動能力，延緩因增齡而發(fā)生的運(yùn)動能力下降和心臟功能衰退，改善生命周期。類似的研究見于Piazza等的報道[16]。

作為硬骨魚的代表之一，斑馬魚的基因和人類基因的相似度達(dá)到87%，具有近似人的各種器官系統(tǒng)。斑馬魚具有紅肌和白肌，混合型肌纖維含量極少，可以通過水流的速度來控制斑馬魚的運(yùn)動強(qiáng)度，結(jié)合運(yùn)動時間產(chǎn)生有氧或無氧運(yùn)動效果，是研究運(yùn)動訓(xùn)練適應(yīng)性的理想模型[17]。如有研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過4周無氧運(yùn)動訓(xùn)練后，斑馬魚肌糖原含量顯著增加，運(yùn)動持久能力加強(qiáng)，無氧運(yùn)動能力和無氧代謝能力均得以明顯提升[18]，說明斑馬魚適合應(yīng)用于體育科學(xué)研究中。

2.2 實驗動物模型的選擇

除了野生型實驗動物，疾病模型、轉(zhuǎn)基因、基因(或受體)敲除或基因過表達(dá)的實驗動物在體育科學(xué)研究中的使用也越來越普遍。

在運(yùn)動影響和改善相關(guān)疾病的研究中，通常采用動物造模的方式，獲得相關(guān)疾病模型，同時結(jié)合運(yùn)動，觀察運(yùn)動對相關(guān)疾病的影響。例如通過摘除大鼠卵巢造成骨質(zhì)疏松模型后，觀察不同運(yùn)動以及補(bǔ)充維生素D3和尼古丁對骨質(zhì)疏松大鼠骨丟失的影響[19]；飼喂高糖高脂膳食獲得肥胖動物模型后，觀察跑輪運(yùn)動和熱量限制對肥胖大鼠肥胖和下丘腦神經(jīng)肽表達(dá)的影響[20]；固定懸吊動物后肢獲得肌肉廢用模型后，觀察有氧運(yùn)動對骨密度和肌肉萎縮的影響[21]；在衰老研究中，通過D-半乳糖誘導(dǎo)小鼠衰老后，觀察運(yùn)動對神經(jīng)干細(xì)胞增殖和神經(jīng)母細(xì)胞分化的影響[22]等等。

為了深入了解運(yùn)動影響疾病的代謝機(jī)制，轉(zhuǎn)基因、基因(或受體)敲除、基因過表達(dá)實驗動物的應(yīng)用擴(kuò)大了研究視角，使研究者得以在基因水平或相關(guān)信號通路上獲得直接實驗證據(jù)。如針對阿爾茨海默病(Alzheimer’S disease, AD) 建立β-淀粉樣前體蛋白/早老素1(β--amyloid precursor protein/presenilin-1, APP/PS1)轉(zhuǎn)基因小鼠，觀察運(yùn)動對APP/PS1轉(zhuǎn)基因小鼠學(xué)習(xí)和記憶的影響[23]；通過hSl00B轉(zhuǎn)基因小鼠研究Sl00B基因在帕金森病發(fā)病機(jī)制中的作用[24]；在脂代謝研究中，采用ApoE基因或LDL受體敲除小鼠來探討運(yùn)動改善機(jī)體脂代謝的分子機(jī)制[25-26]；構(gòu)建NAD合成酶基因CG9940全身過表達(dá)并進(jìn)行運(yùn)動干預(yù)，研究NAD合成酶基因CG9940過表達(dá)對果蠅運(yùn)動能力、心臟功能和壽命的影響[11-12]等等都是轉(zhuǎn)基因、基因(或受體)敲除、基因過表達(dá)實驗動物的成功應(yīng)用。隨著分子生物學(xué)實驗技術(shù)和手段的不斷發(fā)展和完善，將RNA干擾技術(shù)應(yīng)用于實驗動物導(dǎo)致目的基因沉默[27-28]，借此觀察運(yùn)動對機(jī)體的影響機(jī)制是在基因水平認(rèn)識運(yùn)動影響機(jī)體代謝機(jī)制的又一舉措。

2.3 實驗動物的運(yùn)動干預(yù)

從運(yùn)動干預(yù)手段來看，嚙齒類動物主要以跑臺[6]、游泳[7]、轉(zhuǎn)籠或跑輪[20,29]運(yùn)動或振動訓(xùn)練[30]，果蠅是攀爬運(yùn)動[31]，斑馬魚則是游泳運(yùn)動[17-18]；在運(yùn)動形式上既有主動運(yùn)動[23]，也有被動運(yùn)動[31]；在運(yùn)動強(qiáng)度上，有大強(qiáng)度、中等強(qiáng)度和低強(qiáng)度運(yùn)動之分；在運(yùn)動時間的安排上，既有短時間急性運(yùn)動，也有長時間耐力運(yùn)動；在運(yùn)動類型上既有無氧運(yùn)動，也有有氧運(yùn)動；在運(yùn)動環(huán)境上，既有常溫常壓環(huán)境，也有低氧低壓[32]、低溫[33]、高熱[34]環(huán)境下運(yùn)動的研究。通過運(yùn)動的干預(yù)，能夠發(fā)現(xiàn)運(yùn)動對機(jī)體的影響效果(正面或負(fù)面)；通過對比不同運(yùn)動方式、不同運(yùn)動強(qiáng)度、不同運(yùn)動時間、不同運(yùn)動環(huán)境下產(chǎn)生的運(yùn)動效果，發(fā)現(xiàn)適合不同年齡、性別、生理或疾病狀況下的最佳運(yùn)動模式。

運(yùn)動是體育科學(xué)研究的特色，因此，在開展動物實驗時要特別考慮到這些運(yùn)動干預(yù)因素對實驗動物福利的影響，“3R”原則同樣適用于體育科學(xué)研究的動物實驗中。

3 體育科學(xué)研究中“3R”原則的要求和應(yīng)用

3.1 減少

在體育科學(xué)研究中，為了減少動物所承受的痛苦總量，要盡量減少實驗動物的使用數(shù)量。

從絕對數(shù)量的減少上看，在確保實驗結(jié)果不受影響的前提下，實驗前，應(yīng)根據(jù)實驗?zāi)康?，通過統(tǒng)計學(xué)計算所需要的實驗動物樣本數(shù)，不無故擴(kuò)大樣本量。實驗前必須進(jìn)行周密合理的實驗設(shè)計，減少混雜因素對實驗結(jié)果的影響，不進(jìn)行無科學(xué)意義的實驗。實驗前的預(yù)實驗非常重要，通過少量實驗動物的預(yù)處理，了解實驗方案的可行性，盡早發(fā)現(xiàn)問題，避免正式實驗時大量實驗動物的無效使用。另外，課題組之間可以共用實驗動物模型，避免實驗動物取材上的浪費(fèi)。從相對數(shù)量的減少上看，取得實驗數(shù)據(jù)后，要進(jìn)行正確的統(tǒng)計學(xué)分析，充分利用已有的數(shù)據(jù)，以最少的實驗動物數(shù)量獲得最大化的實驗結(jié)果。同時建立互信機(jī)制，共享實驗數(shù)據(jù),減少不必要的重復(fù)實驗。

例如，王妹等[35]從GEO數(shù)據(jù)庫中下載Lehti等提交的小鼠骨骼肌基因芯片數(shù)據(jù)，運(yùn)用生物信息學(xué)的方法對其中的差異表達(dá)基因做進(jìn)一步的功能富集分析，從整體上分析運(yùn)動對糖尿病小鼠骨骼肌基因的影響。米春娟[36]從以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的蛋白質(zhì)組學(xué)研究入手，分析了不同類型運(yùn)動對心臟蛋白質(zhì)組的影響，同時用生物信息學(xué)方法分析來自于不同運(yùn)動類型與動物模型間的數(shù)據(jù)。這些研究充分體現(xiàn)了“3R”原則中的“減少”，利用原作者沒有深入挖掘的實驗數(shù)據(jù)產(chǎn)生了新的研究結(jié)果，為后期的研究提供了數(shù)據(jù)基礎(chǔ)，減少了不必要的重復(fù)動物實驗。目前，基因組學(xué)、蛋白質(zhì)學(xué)、代謝組學(xué)、免疫組學(xué)等等的研究為生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域提供了大量的實驗數(shù)據(jù)，而且數(shù)據(jù)規(guī)模還在不斷增長。如何從這些海量數(shù)據(jù)中查找或挖掘所需要的信息，產(chǎn)生新的研究結(jié)果，跨越單一動物實驗的局限性是體育科研工作者需要思考的問題。

此外，提高實驗動物的質(zhì)量，控制生物學(xué)變異也是實現(xiàn)相對數(shù)量減少的重要方法。在研究方法和手段上，充分利用現(xiàn)代生物技術(shù)進(jìn)行分析(如核磁共振、CT、雙能X射線)，既可減少對實驗動物的侵襲，又可進(jìn)行持續(xù)觀察，節(jié)約實驗動物。

3.2 替代

目前，在體育科學(xué)研究中，“替代”研究成為一種新的趨勢，包括細(xì)胞體外試驗、低等動物替代高等動物進(jìn)行實驗等。

以骨骼肌的研究為例，在體實驗通常以嚙齒類動物為實驗對象，運(yùn)動干預(yù)后對實驗動物進(jìn)行取材，通過特異性標(biāo)記物在體觀察或檢測運(yùn)動對骨骼肌細(xì)胞形態(tài)或功能的影響，探討運(yùn)動影響骨骼肌的相關(guān)機(jī)制[37-38]。除此之外，原代細(xì)胞培養(yǎng)不失為一種良好的選擇，由于細(xì)胞剛剛從活體組織分離出來，故更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。同時，選擇小鼠成肌細(xì)胞系C2C12作為實驗對象，通過電刺激使成肌細(xì)胞收縮產(chǎn)生運(yùn)動效果，離體觀察和研究模擬運(yùn)動對肌細(xì)胞形態(tài)或功能的影響及機(jī)制也是一種重要選擇[39-40]。和在體實驗相比，細(xì)胞離體實驗可控性好，樣本需要量少，能縮短實驗周期，提高實驗效率，具有動物實驗所沒有的優(yōu)勢。

作為一種成熟的模式生物，人類75%的疾病基因與果蠅具有功能同源[41-42]，而運(yùn)動能促使果蠅產(chǎn)生行為和生理應(yīng)答[43]。果蠅運(yùn)動能力較強(qiáng)，但其遷移運(yùn)動表現(xiàn)為非定向的飛行或爬行，這種運(yùn)動模式在實驗條件下很難建立規(guī)律的運(yùn)動訓(xùn)練方案。為此，國內(nèi)有研究者利用果蠅的負(fù)趨地性，研制出果蠅運(yùn)動平臺裝置，通過果蠅的抗重力攀爬來測量果蠅的運(yùn)動能力[43]。國外有研究者利用果蠅的負(fù)趨地性進(jìn)一步開發(fā)出踏輪裝置[44]和旋轉(zhuǎn)運(yùn)動量化裝置[45]，使得果蠅的運(yùn)動訓(xùn)練趨于科學(xué)和完善，運(yùn)動表現(xiàn)定量化，為果蠅在體育科學(xué)研究中的應(yīng)用創(chuàng)造了條件。果蠅容易飼養(yǎng)、繁殖快、生命周期短、取材方便，遺傳背景可控，和哺乳動物相比，研究成本和研究周期能得到極大節(jié)約，研究結(jié)果也非常具有代表性。因此，作為一種理想的動物模型，果蠅在體育科學(xué)研究中的應(yīng)用應(yīng)該得到大力推廣。

和小鼠相比，斑馬魚的繁殖力強(qiáng)、發(fā)育迅速，容易飼養(yǎng)，目前在遺傳發(fā)育、藥物篩選、疾病模型、環(huán)境健康等研究領(lǐng)域得到廣泛的應(yīng)用[46-47]。同時，隨著年齡的增加斑馬魚整體功能下降，如線粒體功能下降、骨骼肌退化等，呈現(xiàn)出和人類以及其他哺乳動物相似的特點[48]。隨著年齡增加，斑馬魚的游泳能力也隨之下降，運(yùn)動訓(xùn)練能提高斑馬魚的游泳能力，其中青年和中年斑馬魚的訓(xùn)練效果顯著好于老年斑馬魚，和人類的運(yùn)動效果相似[49]，提示斑馬魚可望成為研究運(yùn)動與衰老的良好模型[50]。此外，斑馬魚的骨骼與人類相似，同樣擁有骨細(xì)胞[51]。研究發(fā)現(xiàn)運(yùn)動訓(xùn)練可以促進(jìn)成年斑馬魚的骨形成，提高骨密度[52]。在骨骼肌的研究中發(fā)現(xiàn)，游泳運(yùn)動訓(xùn)練可以通過mTOR-MEF2和AMPK信號通路使得成年斑馬魚快肌纖維肥大，促進(jìn)肌再生[53]，這些研究結(jié)果和哺乳動物的相似。目前，作為一種新型的實驗動物模型，斑馬魚已經(jīng)應(yīng)用在運(yùn)動與肌肉生長發(fā)育、骨骼代謝、神經(jīng)生物學(xué)與衰老等研究領(lǐng)域中[54-58]。和大小鼠模型相比，斑馬魚的模型建立成本低，取材方便，因此，可望在體育科學(xué)研究中得到開發(fā)和應(yīng)用。迄今為止，斑馬魚在運(yùn)動實踐中的應(yīng)用僅見國外的研究中，國內(nèi)尚未見報道。因此，國內(nèi)的體育科研工作者應(yīng)該加快認(rèn)識和開發(fā)斑馬魚在運(yùn)動實踐中的應(yīng)用。

另外，充分利用人群資料來代替動物實驗的資料，利用數(shù)學(xué)模型、電子圖像分析、虛擬動物和虛擬人體來模擬相應(yīng)的生理和代謝過程都是替代的良好手段和方式，在體育科學(xué)研究中應(yīng)該大力推崇。

3.3 優(yōu)化

優(yōu)化包括動物實驗的研究方法、技術(shù)手段和操作控制技術(shù)的優(yōu)化。在動物實驗過程中，通過改善實驗環(huán)境、飼養(yǎng)條件，完善實驗程序，改進(jìn)實驗技術(shù)，善待實驗動物，由此提高動物福利。早在2006年我國科技部就頒布了《關(guān)于善待實驗動物的指導(dǎo)性意見》，要求在飼養(yǎng)管理和使用實驗動物過程中，要采取有效措施，善待實驗動物，使實驗動物免遭不必要的傷害和痛苦[59]。

體育科學(xué)研究中通常要對實驗動物施加運(yùn)動刺激，善待實驗動物的原則同樣適用。以跑臺運(yùn)動為例，在實施力竭運(yùn)動時，大鼠通常會因為體力不支，無法跟上設(shè)定的跑臺速度，退縮到跑臺末端。為了讓動物繼續(xù)運(yùn)動以達(dá)到力竭，實驗操作人員往往用電擊或毛刷刺激大鼠尾部，驅(qū)使大鼠跑動。如果電擊的強(qiáng)度適宜，尚不會使大鼠產(chǎn)生過大的應(yīng)激；如果電擊的強(qiáng)度過大，會使大鼠產(chǎn)生驚恐等惡性應(yīng)激，導(dǎo)致生理和心理的雙重刺激，無法確保實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。因此，不建議使用電擊的方法。同時，跑臺運(yùn)動時有聲、光、電的刺激，對于不運(yùn)動的對照組，雖然不在跑臺上運(yùn)動，實驗動物也應(yīng)置于跑臺上感受相同環(huán)境的刺激，確保研究背景的一致性，減少實驗誤差。另外，在高強(qiáng)度的跑臺運(yùn)動中，由于跑臺設(shè)定的速度過快，大鼠一旦沒有跟上皮帶轉(zhuǎn)動的速度，極易出現(xiàn)后肢及尾部夾傷；夾傷后如果沒有及時予以藥物處理，大鼠的后肢腳趾和尾部會出現(xiàn)感染和潰瘍，嚴(yán)重的導(dǎo)致死亡，這些行為都是屬于違背實驗動物福利的要求。應(yīng)該給予實驗動物及時的護(hù)理和治療，善待實驗動物。在游泳運(yùn)動中，如果水溫沒有調(diào)節(jié)好，水溫過高或過低對大鼠將造成熱應(yīng)激或冷應(yīng)激，這些都要避免。游泳運(yùn)動結(jié)束后，要及時擦干大鼠的毛發(fā)，防止受涼。

在進(jìn)行運(yùn)動干預(yù)時，根據(jù)大、小鼠晝伏夜動的生活習(xí)性，午夜活動比白天活躍，在運(yùn)動時間的選擇上要考慮到其生物節(jié)律，避免對實驗動物的生理和心理造成負(fù)面影響。不同于嚙齒類動物，斑馬魚的適宜水溫為28℃，白晝/夜晚的生物節(jié)律是14 h / 10 h。對斑馬魚運(yùn)動的測試通常采用安裝在游泳池上方的紅外攝像機(jī)拍攝其游泳記錄，目的是減少斑馬魚游泳的視覺障礙[50]。用于游泳的水池或水槽最好是內(nèi)壁光滑，無任何凸起或設(shè)備，以防斑馬魚在游泳過程中咬住停止游動，影響運(yùn)動效果。大鼠或小鼠在游泳訓(xùn)練時，往往會漂浮在水面不運(yùn)動。這時不能采用打擊的方式迫使其運(yùn)動。另外，在負(fù)重或過度訓(xùn)練時，要防止實驗動物由于疲勞沉溺造成死亡。

4 小結(jié)

實驗動物為體育科學(xué)研究的發(fā)展做出了不可磨滅的貢獻(xiàn)。實驗動物的福利問題關(guān)系到實驗動物的生理和心理健康，對實驗結(jié)果會產(chǎn)生重要影響，“3R”原則是關(guān)系到實驗動物福利的有利保障。體育科學(xué)研究中應(yīng)該結(jié)合動物實驗的特點，在實驗動物的減少、替代和優(yōu)化上，尋找和挖掘?qū)崿F(xiàn)“3R”原則的手段和措施：(1)在“減少”方面重視數(shù)據(jù)共享，加強(qiáng)數(shù)據(jù)分析，充分利用現(xiàn)代生物分析技術(shù)；(2)在“替代”方面加強(qiáng)低等生物的應(yīng)用，其中果蠅和斑馬魚的應(yīng)用可望成為新的研究手段；(3)在“優(yōu)化”方面加強(qiáng)實驗操作的規(guī)范化，減少對實驗動物的侵襲，減輕實驗動物的痛苦。由此，確保體育科學(xué)研究中實驗動物福利的實施，為獲得真實可靠的實驗數(shù)據(jù)提供切實保障。