食用植物油中黃曲霉毒素B1調(diào)查分析

周子焱，邢家溧，應(yīng) 璐，周鑫達(dá)，張書(shū)芬，李湘江，沈 堅(jiān)(寧波市食品檢驗(yàn)檢測(cè)研究院，浙江 寧波 315048)

食用油是居民必需的一類(lèi)重要食品，是人體重要能源和營(yíng)養(yǎng)源。隨著我國(guó)經(jīng)濟(jì)高速發(fā)展和人們生活水平不斷提高，食用油消費(fèi)量呈明顯上升趨勢(shì)。我國(guó)常見(jiàn)的食用植物油主要有大豆油、玉米油、菜籽油、花生油、油茶籽油、芝麻油等。近年來(lái)，市場(chǎng)上食用植物油質(zhì)量參差不齊，存在問(wèn)題較多，已日益成為大眾關(guān)注的焦點(diǎn)。為此，國(guó)家和各級(jí)政府對(duì)食用植物油安全高度重視，通過(guò)抽檢監(jiān)測(cè)和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估等方式，對(duì)食用植物油質(zhì)量進(jìn)行監(jiān)控。由于食用植物油的原料和加工屬性，極易受到黃曲霉毒素(AFs)的污染[1]。AFs主要是由黃曲霉菌和寄生曲霉菌代謝產(chǎn)生的一類(lèi)天然生物毒素，其廣泛存在于霉變的糧食、油料及其制品中，是迄今發(fā)現(xiàn)的生物毒性最強(qiáng)的一類(lèi)毒素[2-3]。其中黃曲霉毒素B1(AFB1)毒性最強(qiáng)、污染最廣、危害最大，其毒性為氰化鉀的10倍、砒霜的68倍，目前已被國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu)(IARC)列為I類(lèi)致癌物[4]，對(duì)人類(lèi)生命健康的潛在威脅極大，引起世界各國(guó)的高度重視[5]。

食用植物油質(zhì)量安全不但影響著居民的健康，一定程度上也影響了社會(huì)的穩(wěn)定和諧，因此是國(guó)務(wù)院食品安全重點(diǎn)工作安排中關(guān)注的主要食品[6]。鑒于浙江省食用植物油生產(chǎn)銷(xiāo)售企業(yè)和品種眾多，消費(fèi)特點(diǎn)明顯，了解當(dāng)前浙江省食用植物油情況，展開(kāi)食用植物油中AFB1含量的調(diào)查分析，以期較為全面掌握浙江地區(qū)食用植物油安全水平和污染狀況，從而為相關(guān)部門(mén)提供風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、預(yù)警以及決策，為群眾理性科學(xué)選擇食用植物油提供參考。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 原料與試劑

2016年9—12月在浙江省各市銷(xiāo)售市場(chǎng)(包括超市、批發(fā)市場(chǎng)、餐飲業(yè)、小作坊等場(chǎng)所)隨機(jī)采集食用植物油樣品共計(jì)1 208個(gè)，樣品種類(lèi)涵蓋花生油、玉米油、大豆油、菜籽油、油茶籽油、葵花籽油、芝麻油、調(diào)和油，分批采集封存后4℃保存，采樣當(dāng)月20 d內(nèi)完成樣品檢測(cè)。

甲醇、苯、乙腈，色譜純：美國(guó)Fisher公司；氯化鈉、磷酸氫二鉀、磷酸氫二鈉、氯化鉀等，均為分析純；AFB1標(biāo)準(zhǔn)品(1.00 μg/mL)：國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心；超純水(電阻≥18.2 MΩ)：超純水制備系統(tǒng)制備。

1.1.2 儀器與設(shè)備

Agilent 1260 infinity高效液相色譜儀、Zorbax SB C18柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)：美國(guó)Agilent公司；101-1型干燥箱；TGL-16C離心機(jī)；EL3002型電子天平、EL204型分析天平、Delta320-S型pH計(jì)：梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司；AFs免疫親和柱：北京華安麥科生物技術(shù)有限公司；Milipore Mili-RO Plus and Mili-Q Systems超純水制備系統(tǒng)：美國(guó)Millipore公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 食用植物油中AFB1含量的測(cè)定

食用植物油中AFB1含量的測(cè)定方法根據(jù) GB/T 18979—2003做適當(dāng)調(diào)整。準(zhǔn)確稱(chēng)取5.0 g油樣于50 mL均質(zhì)管中，加入1.0 g氯化鈉并加入甲醇水溶液(7∶3)至25.0 mL，均質(zhì)器高速均質(zhì)2 min，濾紙過(guò)濾收集濾液，取15.0 mL濾液加入30 mL水稀釋?zhuān)貌ＡЮw維濾紙過(guò)濾2次，備用。經(jīng)過(guò)含有AFB1特異抗體的免疫親和柱凈化，取10 mL水去除免疫親和柱上的雜質(zhì)，加入2 mL甲醇洗脫免疫親和柱，收集1 mL洗脫液，氮?dú)獯蹈桑鲃?dòng)相溶解后放入4℃冰箱保存，待高效液相色譜測(cè)定。

色譜條件：流動(dòng)相為乙腈-水(45∶55)；流速1.0 mL/min；激發(fā)波長(zhǎng)360 nm，發(fā)射波長(zhǎng)440 nm；進(jìn)樣量20 μL。

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

將AFB1標(biāo)準(zhǔn)溶液(100 μg/L)用乙腈配制成不同質(zhì)量濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，并進(jìn)行測(cè)定，根據(jù)響應(yīng)值與標(biāo)準(zhǔn)工作溶液質(zhì)量濃度關(guān)系，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到線性方程y=1.756 01x，r2=0.999 9。AFB1檢出限為0.1 μg/kg。

1.2.3 數(shù)據(jù)處理

采用Excel 2010和SPSS 16.0數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)軟件處理分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 浙江省食用植物油中AFB1的總體情況

本次共采集浙江省11個(gè)地市151家經(jīng)銷(xiāo)企業(yè)食用植物油樣品，包括8類(lèi)食用植物油，1 208個(gè)樣品。調(diào)查結(jié)果顯示，22份樣品檢出AFB1，含量范圍為2.2～4.9 μg/kg，檢出率為1.8%，參照GB 2761—2011規(guī)定，所調(diào)查食用植物油中AFB1含量均未超過(guò)國(guó)家限量標(biāo)準(zhǔn)(≤20 μg/kg)，不合格率為0.0%。進(jìn)一步隨機(jī)選取了20%的樣品進(jìn)行平行驗(yàn)證，控制平行樣的絕對(duì)差值不超過(guò)算術(shù)平均值的10%，以上檢測(cè)的樣品都采用SN/T 3868—2014《出口植物油中黃曲霉毒素的檢測(cè)》進(jìn)行了復(fù)查，復(fù)查結(jié)果與初次結(jié)果一致。調(diào)查結(jié)果表明，此次調(diào)查的食用植物油總體質(zhì)量狀況優(yōu)良，大多數(shù)食用植物油生產(chǎn)和銷(xiāo)售企業(yè)、政府相關(guān)部門(mén)，對(duì)AFs指標(biāo)非常關(guān)注，有效地保障了食用植物油的安全。

2.2 不同種類(lèi)食用植物油中AFB1含量分析

不同種類(lèi)食用植物油樣品中AFB1總體污染水平如表1所示。

表1 食用植物油樣品AFB1總體污染水平

注：“-”表示未檢出。

由表1可知，在這8類(lèi)植物油中，花生油、葵花籽油、玉米油和調(diào)和油中均有AFB1檢出，平均值分別為4.0、3.4、3.1、2.2 μg/kg，檢出率分別為5.2%、1.6%、0.8%、1.0%。另外，調(diào)查結(jié)果表明，花生油中AFB1的檢出率最高，為5.2%，而葵花籽油、玉米油中AFB1檢出率分別為1.6%和0.8%，顯著低于花生油，這可能是因?yàn)榛ㄉ显谑斋@、儲(chǔ)藏、加工過(guò)程中，更容易遭受黃曲霉或寄生曲霉菌的感染，而生產(chǎn)花生油使用了存放時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或霉變的花生仁為原料，從而造成AFB1污染。但是調(diào)查結(jié)果顯示，所有食用植物油中AFB1超標(biāo)率為0.0%，說(shuō)明AFB1污染水平較低，安全性較高。

調(diào)和油中AFB1檢出可能是由于調(diào)和油的成分中含有花生油、葵花籽油或玉米油，而這幾類(lèi)食用植物油中AFB1有檢出，推測(cè)可能是原料受AFB1污染所致。陸晶晶[6]、李可[7]等研究表明，食用植物油產(chǎn)品中存在AFB1污染，與其原料有很大關(guān)系，這也與本研究推測(cè)相一致。作為浙江省特產(chǎn)，在此次調(diào)查檢測(cè)中，菜籽油和油茶籽油均未檢出AFB1，表明雖然浙江省菜籽油和油茶籽油生產(chǎn)加工企業(yè)規(guī)模較小，但是各企業(yè)對(duì)原料和加工過(guò)程把控較好，確保了產(chǎn)品質(zhì)量過(guò)關(guān)。而對(duì)于大豆油，當(dāng)前原料以進(jìn)口大豆為主，原料品質(zhì)較好，未檢出AFB1。

2.3 不同地區(qū)食用植物油中AFB1含量分析

受原料及消費(fèi)習(xí)慣的影響，浙江省食用植物油企業(yè)生產(chǎn)的產(chǎn)品品種呈現(xiàn)明顯的地域性，浙江省西部地區(qū)是我國(guó)油茶的重要產(chǎn)地[8]，現(xiàn)有油茶面積1.67萬(wàn)hm2，其中常山、青田、蓮都、云和、仙居等25個(gè)縣占總面積的90%，油茶加工企業(yè)經(jīng)過(guò)幾年的優(yōu)勝劣汰，目前主要集中在衢州地區(qū)[9-10]。浙江油菜種植區(qū)域比較廣，蕭山、仙居、開(kāi)化、遂昌等地都有大面積種植，目前菜籽油生產(chǎn)企業(yè)主要集中在蕭山地區(qū)，不過(guò)規(guī)模相對(duì)較小。除了油茶籽油和菜籽油主要生產(chǎn)地區(qū)外，其他地區(qū)如沿海地區(qū)的企業(yè)分為兩類(lèi)：一類(lèi)是規(guī)模企業(yè)[11]，該類(lèi)型企業(yè)產(chǎn)量較大，不但生產(chǎn)自主品牌的小包裝成品油，還是周邊地區(qū)小油廠的原料供應(yīng)商；另一類(lèi)則為分裝企業(yè)，產(chǎn)量小，多以銷(xiāo)定產(chǎn)，并以小型食品生產(chǎn)企業(yè)、餐飲企業(yè)或集體食堂為主要銷(xiāo)售對(duì)象。

各地市食用植物油檢驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 各地市食用植物油檢驗(yàn)結(jié)果

由表2可知，紹興、寧波、嘉興、金華、溫州、麗水、舟山7個(gè)地市采集的食用植物油均未檢出AFB1；杭州、湖州、衢州、臺(tái)州4個(gè)地市采集的食用植物油均有AFB1檢出，檢出率分別為2.22%、4.17%、3.85%和10.00%。

2.4 不同包裝食用植物油AFB1含量比較

此次調(diào)查過(guò)程中，根據(jù)采樣樣品包裝材料，統(tǒng)計(jì)了散裝油和定型包裝油樣品的AFB1含量水平，結(jié)果如表3所示。

表3 不同包裝方式食用植物油中AFB1檢測(cè)結(jié)果

由表3可知，散裝油和定型包裝油均有不同程度AFB1檢出，其中散裝油的檢出率(3.8%)顯著高于定型包裝油(0.9%)，這與劉輝[12]、王朝霞[13]、 Lee[14]等的研究結(jié)果是一致的，在他們的研究中也發(fā)現(xiàn)散裝油中的AFB1檢出率明顯高于定型包裝油。這可能是由于散裝油使用的原料品質(zhì)較差，無(wú)嚴(yán)格的質(zhì)量控制條件，且散裝油在加工、儲(chǔ)藏、銷(xiāo)售過(guò)程中，無(wú)密封或密封條件不好，食用油長(zhǎng)期暴露于外環(huán)境中，增加了黃曲霉菌等真菌污染繁殖的機(jī)會(huì)，造成AFB1檢出率較高。結(jié)果表明，散裝油中AFB1風(fēng)險(xiǎn)較高，建議今后對(duì)散裝油的調(diào)查及相關(guān)部門(mén)監(jiān)督力度應(yīng)加大。

3 結(jié) 論

本次調(diào)查遵循樣本種類(lèi)“覆蓋面廣、多點(diǎn)采樣、兼顧包裝類(lèi)型和生產(chǎn)工藝”的原則，樣本覆蓋全省11個(gè)地市的151家食用植物油經(jīng)銷(xiāo)企業(yè)，包裝類(lèi)型為散裝和定型包裝，采樣涉及花生油、玉米油、大豆油、菜籽油、油茶籽油等8大類(lèi)1 208個(gè)樣品，能夠代表群眾購(gòu)買(mǎi)食用油的主要渠道。對(duì)樣品中AFB1檢測(cè)分析結(jié)果表明，浙江省食用植物油AFB1污染水平較低，總檢出率為1.8%，超標(biāo)率為0.0%，但花生油、散裝油產(chǎn)品中的AFB1檢出率分別為5.2%和3.8%，顯著高于平均水平(1.8%)，建議監(jiān)管部門(mén)特別加強(qiáng)散裝花生油生產(chǎn)、流通環(huán)節(jié)的監(jiān)管。雖然本次調(diào)查受數(shù)據(jù)采集和分析時(shí)間的限制，不夠全面，但能在一定程度上體現(xiàn)浙江省食用植物油的總體質(zhì)量狀況。本研究下一步將更全面地調(diào)查食用植物油中危害因子水平，并開(kāi)展分析影響食用植物油質(zhì)量的因素，為建立更為完善的食用油質(zhì)量安全保障體系，保障群眾的生活質(zhì)量提供依據(jù)。

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