李海蘭 孫利峰
(遼寧省凌源市中醫(yī)院,遼寧 凌源 122500)
血尿是泌尿系統(tǒng)常見的臨床表現(xiàn),可由多種原因引起,不同病因引起的血尿,其紅細(xì)胞形態(tài)不盡相同,因此尿中紅細(xì)胞的形態(tài)是鑒別腎小球疾病與非腎小球疾病的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一。目前,實驗室鑒別血尿來源大多采用全自動尿沉渣分析儀聯(lián)合相差顯微鏡的方法,鑒于相差顯微鏡價格昂貴,不能在基層檢驗科普遍應(yīng)用,本實驗特采用普通光學(xué)顯微鏡與全自動尿沉渣分析儀聯(lián)合應(yīng)用,鑒別紅細(xì)胞形態(tài),為血尿來源的鑒別提供參考,報道如下。
1.1 一般資料:收集我院2014年2月至2015年5月血尿標(biāo)本180份,腎臟病理活檢確診腎小球性血尿116例,非腎小球性血尿64例。
1.2 儀器和試劑:光學(xué)顯微鏡(OLYMPUS CX-21);UF-1000i尿沉渣分析儀(日本Sysmex公司)及配套試劑、質(zhì)控品。
1.3 方法:所有患者取混勻新鮮中段尿20 mL,分裝兩支試管(每支試管10 mL),分別用光學(xué)顯微鏡和UF-1000i分析儀和進(jìn)行檢測。顯微鏡法檢測前,對尿液標(biāo)本進(jìn)行離心處理,以1500 r/min離心5 min,去上清液留0.2 mL尿沉渣,輕輕充分混勻,將混勻的尿沉渣置于載玻片上,在高倍鏡下計數(shù)每高倍視野的紅細(xì)胞[1];UF-1000i尿沉渣分析儀的操作按儀器使用說明書進(jìn)行,并在測定前用進(jìn)口配套質(zhì)控物進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)量控制,結(jié)果在質(zhì)控后進(jìn)行檢測;所有尿液標(biāo)本在收集后2 h內(nèi)完成檢查。
1.4 結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)。顯微鏡結(jié)果判斷[2]:①非均一性血尿:尿中紅細(xì)胞數(shù)>8000個/mL,且大部分(>70%)紅細(xì)胞為兩種以上類型變形。②均一性血尿:尿中紅細(xì)胞數(shù)>8000個/mL,但大部分(>70%)紅細(xì)胞為正常紅細(xì)胞或單一型紅細(xì)胞。③混合性血尿:尿中紅細(xì)胞數(shù)>8000個/mL,形態(tài)異常紅細(xì)胞30%~70%;UF-1000i將紅細(xì)胞信息分為以下3種情況[3]:①非均一性:70%紅細(xì)胞前向散射光強(qiáng)度(FCS)<80 ch,紅細(xì)胞前向散射光分布寬度(RBC-FSCDW)<或>50 ch為腎性血尿(小紅細(xì)胞);②均一性:70%紅細(xì)胞FCS>100 ch,RBC-FSC-DW<50 ch為非腎性血尿(正常紅細(xì)胞);③混合性:70%紅細(xì)胞FCS>100 ch,RBC-FSC-DW>50 ch或70%紅細(xì)胞FCS80~100 ch,RBC-FSC-DW<或>50 ch為混合性血尿。
1.5 統(tǒng)計學(xué)處理:采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理,計數(shù)資料采用χ2檢驗,P<0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
UF-1000i尿沉渣分析儀與普通光學(xué)顯微鏡兩種方法測得180份患者尿中紅細(xì)胞信息見表1。
在116例腎性血尿中,UF-1000i分析儀敏感性[(非均一性+混合性)/腎性血尿總例數(shù)]為97.4%,普通光學(xué)顯微鏡敏感性為90.5%;在64例非腎性血尿中,UF-1000i分析儀特異性(均一性/非腎性血尿總例數(shù))為82.8%,普通光學(xué)顯微鏡特異性為90.6%,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。
腎病包含有急慢性腎小球腎炎、腎盂腎炎、IgA腎病、糖尿病腎病、腎病綜合征等。腎病后期均可發(fā)展為腎功能衰竭而危及患者生命,給社會及家庭帶來極重的經(jīng)濟(jì)及精神負(fù)擔(dān)。如何及早發(fā)現(xiàn)腎病,對之進(jìn)行及時有效的治療、延緩腎病的發(fā)展,成為腎臟病的關(guān)鍵。
腎病在發(fā)生發(fā)展和轉(zhuǎn)化過程中均會出現(xiàn)血尿及尿液成分和各種有病理意義的顆粒[4]。因此,尿液是反映腎臟器官發(fā)生病理變化的窗口。尿沉渣檢查檢出紅細(xì)胞、白細(xì)胞、上皮細(xì)胞、管型等成分,有“體外腎活檢”之稱[5]。任何類型的腎臟病變都可以在尿液中反映出來。根據(jù)患者不同的出血部位,可分為腎小球性血尿和非腎小球性血尿[6]。腎小球性血尿是指紅細(xì)胞通過有病變的腎小球基底膜進(jìn)入尿中,形態(tài)、大小發(fā)生改變,如紅細(xì)胞出現(xiàn)棘形、環(huán)形、芽孢狀、花環(huán)狀等,并有體積偏小、大小不一等改變;非腎小球性血尿是指腎小球以下部位和泌尿通路上的出血,此時尿中紅細(xì)胞形態(tài)和體積無明顯改變[7]。在顯微鏡下可以辨認(rèn)各種形態(tài)改變的紅細(xì)胞,準(zhǔn)確性更高,缺點是費(fèi)時費(fèi)力,而且易受觀察者主觀影響,因此對檢驗人員要求較高。UF-1000i尿沉渣分析儀應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)和電阻抗原理,對尿中有形成分進(jìn)行鑒別及計數(shù),同時可客觀地分析紅細(xì)胞形態(tài),繪出形態(tài)變化曲線并給出紅細(xì)胞信息,這對于血尿的鑒別有重要意義[8]。但由于尿液有形成分復(fù)雜且不穩(wěn)定,儀器檢測有一定的局限性。文獻(xiàn)報道紅細(xì)胞提示信息中有誤診現(xiàn)象:如UF-1000i提示紅細(xì)胞非均一性,而顯微鏡下發(fā)現(xiàn)為酵母樣菌;UF-1000i提示均一性而顯微鏡下見到草酸鈣結(jié)晶。因此,單獨(dú)應(yīng)用尿沉渣分析儀根據(jù)紅細(xì)胞信息判斷血尿來源,只能起過篩作用。顯微鏡對細(xì)胞形態(tài)的分析更為直觀,但尿液中紅細(xì)胞受較多因素影響,如尿滲透壓、尿pH等均會導(dǎo)致紅細(xì)胞形態(tài)改變,高堿性尿液可使紅細(xì)胞膜脂質(zhì)外層面積增加,出現(xiàn)鋸齒狀和棘形等多形態(tài)紅細(xì)胞[9]。本實驗采用常用的普通光學(xué)顯微鏡與UF-1000i尿沉渣分析儀,對臨床確診病例進(jìn)行尿液中紅細(xì)胞形態(tài)進(jìn)行分析,結(jié)果顯示,UF-1000i尿液沉渣分析儀與普通光學(xué)顯微鏡檢查這二種方法之間敏感性與特異性的差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。UF-1000i尿沉渣分析儀對腎小球血尿的敏感性很好,而顯微鏡對紅細(xì)胞形態(tài)的特異性比尿沉渣分析儀好,須二者互補(bǔ)聯(lián)合檢測,才能更好地為血尿來源提供可靠的實驗室依據(jù)。
因為尿中紅細(xì)胞形態(tài)受尿滲透壓、尿pH、代謝產(chǎn)物的影響,在膀胱內(nèi)停留時間過長,其形態(tài)也會發(fā)生改變[10]。另外,尿液隨存放時間的延長紅細(xì)胞形態(tài)也會發(fā)生改變,造成儀器對尿紅細(xì)胞提示信息改變、參數(shù)改變;有菌尿和(或)結(jié)晶存在時,紅細(xì)胞更易變形,且結(jié)晶的產(chǎn)生也常會被儀器誤認(rèn)。鑒于此,使用沉渣分析儀檢測尿液時,標(biāo)本必須新鮮,且在2 h內(nèi)完成[10]。
綜上所述,將顯微鏡與UF-1000i尿沉渣分析儀聯(lián)合應(yīng)用,可以幫助臨床判斷尿液中紅細(xì)胞的來源。同時須做好標(biāo)本采集的質(zhì)量控制,以達(dá)到最佳檢驗效果。
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