孕期耳聾基因診斷及產(chǎn)前干預(yù)的研究進展

查樹偉 許豪勤 查 佶 孫 慶

（1 江蘇省計劃生育科學(xué)技術(shù)研究所，江蘇 南京210036；2 美國費城兒童醫(yī)院，美國 費城 19104）

遺傳性耳聾產(chǎn)前基因診斷主要針對一方或雙方是耳聾的夫婦、聾兒父母再生育和有耳聾親屬的聽力正常人群，近5年來較多文獻報道了正常孕期人群耳聾基因篩查結(jié)果[1-9]，本文主要探討與其相關(guān)的研究進展。

1 孕期耳聾基因篩查和產(chǎn)前診斷模式探討

孕期健康人群在知情同意后進行耳聾基因芯片篩查，檢出基因突變者的丈夫進行芯片檢測或夫婦同時相應(yīng)基因測序，對攜帶同一基因突變夫婦的，進行耳聾風險評估，結(jié)合孕婦產(chǎn)前診斷檢測胎兒耳聾基因突變情況，給予生育咨詢指導(dǎo)，減少聾兒出生[6]。柳紅杰等[8]對5338例聽力正常孕婦采用基因芯片篩查檢出319例（5.98%）耳聾基因突變，對突變攜帶者孕婦的聽力正常配偶236例進行相應(yīng)基因測序，配偶中7例攜帶與孕婦相同耳聾基因突變，這7例孕婦行羊水穿刺后，有2例胎兒確診分別為GJB2基因和SLC26A4基因雙雜合突變，孕婦均選擇終止妊娠。

2 孕期篩查和產(chǎn)前診斷接受程度調(diào)查

韓明昱等[10]在正常孕婦人群中進行常見耳聾基因篩查可接受研究，接受率高達93.6%，分析高接受率原因為：①設(shè)立耳聾基因篩查的專門診室，由專業(yè)人員負責。②醫(yī)務(wù)人員接診時的適宜推薦，專業(yè)人員簡明扼要的講解。③向孕婦發(fā)放孕期女性耳聾基因篩查的宣傳資料，進行宣傳咨詢。④孕期耳聾基因篩查免費檢測，孕婦的依從性較好。劉暢等[11]在已生育聾兒家長再生育的臨床調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，家長一般對耳聾基因檢測和產(chǎn)前診斷持積極態(tài)度，其中94.6%耳聾基因突變的夫婦同意進行產(chǎn)前診斷。

3 孕婦常見耳聾基因芯片篩查

耳聾基因篩查一般采用遺傳性耳聾基因芯片，檢測4個常見耳聾基因（GJB2基因、GJB3基因、SLC26A4基因和線粒體12S rRNA基因）中的9個位點[12]。在正常孕期人群耳聾基因篩查的部分文獻中，孫蓮花等[1]報道3056例，孟培等[2]報道1060例，楊樹法等[3]報道2674例，張莉等[4]報道467例，邵敏杰等[5]報道893例，李朔等[6]報道1013例，吳偉兵[7]報道1824例，柳紅杰等[8]報道5338例，張萌等[9]報道24078例，耳聾基因突變總檢出率在3%至6%之間。通常在檢出孕婦為耳聾基因攜帶者時，要求其丈夫進行耳聾基因篩查或夫婦同時耳聾基因測序。

4 耳聾基因產(chǎn)前診斷和干預(yù)措施

韓明昱等[10]在檢測同為GJB2或SLC26A4基因突變攜帶的4對夫婦，分析其后代耳聾風險為25%，知情同意后分別在20周、21周、21周和28周進行產(chǎn)前診斷，1例風險極大（同時遺傳父母突變基因）自愿選擇終止妊娠，另3例風險等同于正常出生人群（僅遺傳父母其中一人所攜帶的突變）而繼續(xù)妊娠，出生后新生兒聽力篩查均通過。韓明昱等[13]還對58個生育聾兒（先證者）家庭（父母聽力正常，檢測為GJB2或SLC26A4突變攜帶者），因存在再生育風險進行產(chǎn)前診斷64例次，其中妊娠11～13周取材絨毛膜16例次、妊娠16～22周抽取羊水48例次和妊娠22～27周抽取臍血2例次。44例次檢測結(jié)果為胎兒未攜帶或僅攜帶父母一方突變，出生后隨訪聽力均正常，對于另外20例次檢測結(jié)果與先證者基因型相同或同時攜帶父母突變的胎兒，父母自愿選擇終止妊娠。

5 耳聾基因檢測產(chǎn)前診斷方法

產(chǎn)前診斷是在胎兒出生前通過適當?shù)尼t(yī)療手段對胎兒進行先天性缺陷或遺傳病的診斷，常用的介入性技術(shù)方法有絨毛穿刺（妊娠早期）、羊膜腔穿刺（妊娠中期）和臍靜脈穿刺（妊娠中晚期），取得的胎兒細胞進行胎兒基因檢測[14]，這在耳聾基因產(chǎn)前診斷方面得到了廣泛的研究和應(yīng)用。孫蓮花等[1]進行產(chǎn)前診斷是在妊娠17周對孕婦進行羊膜腔穿刺，抽取30 mL羊水，分兩管，一管抽取羊水脫落細胞DNA進行相應(yīng)耳聾基因的全外顯子序列測序分析，另一管經(jīng)羊水細胞培養(yǎng)，待細胞生長呈絮片狀克隆后，收集羊水培養(yǎng)細胞，抽提DNA，進行相同的測序分析，兩次結(jié)果相互對照驗證，以確保結(jié)果的準確性。李玲等[15]通過超聲引導(dǎo)下介入性穿刺術(shù)獲取胎兒附屬物標本進行遺傳性耳聾基因產(chǎn)前診斷，即手術(shù)時在超聲定位下選擇安全和適宜位置進針。方法為：妊娠11～14周胎兒采用18G一次性PTCD針絨毛穿刺抽取胎盤絨毛10 mg，16～24周胎兒采用20G針抽取羊水10 mL，25周以上胎兒采用22G針抽取臍血3 mL。

6 胚胎植入前遺傳學(xué)診斷技術(shù)（PGD）研究

Handyside等[16]于1990年報道運用胚胎移植前遺傳學(xué)診斷技術(shù)（PGD）成功妊娠，使得PGD開始應(yīng)用于臨床。PGD是采用輔助生殖方法，通過遺傳診斷技術(shù)，挑選健康的胚胎進行子宮移植，獲得表型正常的后代。PGD已廣泛應(yīng)用于單基因遺傳性疾病和染色體異常性疾病以及線粒體疾病，遺傳性耳聾絕大部分為單基因變異，是PGD適應(yīng)證[17]。Altarescu等[18]于2009年報道利用極體和卵裂球活檢對非綜合征性遺傳性耳聾患者采用PGD獲得成功妊娠。2010年國立臺灣大學(xué)醫(yī)學(xué)院多專科聯(lián)合對已生育一名因SLC26A4耳聾基因突變導(dǎo)致大前庭水管綜合征（EVAS）患兒的夫婦進行了PGD輔助生殖干預(yù)，成功妊娠并生育基因為野生型的單胎嬰兒，出生后聽力篩查正常[19]。2015年中國大陸首例先天性耳聾胚胎植入前遺傳學(xué)診斷健康試管嬰兒誕生，標志中國對單基因遺傳病的預(yù)防已達到國際先進水平[20]。

參考文獻

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