董 文 王婷玉 上官志敏 許 飛
輸血是臨床救治的一項重要手段, 輸血前必須進行血型鑒定、抗體篩查和交叉配血, 以達到安全有效的救治目標。隨著臨床醫(yī)學事業(yè)的不斷發(fā)展, 用于臨床的血液制品也越來越多, 雖然血型鑒定技術(shù)和交叉配血技術(shù)也隨之不斷提高,但交叉配血不合的情況也時有發(fā)生。因此, 本研究對本院出現(xiàn)疑難交叉配血的原因進行分析, 現(xiàn)報告如下。
1.1 一般資料 選取常州市第一人民醫(yī)院2014~2017年25000例臨床輸血患者作為研究對象。
1.2 試劑與儀器 凝聚胺試劑(珠海貝索生物科技有限公 司 ); Diaclon ABO/D 正 反 定 型 卡、ID-Diluent2、IH1000全自動血型分析儀(美國伯樂公司);抗人球蛋白檢測卡、AUTOVUE全自動血型分析儀(美國強生公司)以及專用保溫箱和離心機;ABO、RH(D)標準血清、反定型標準A、B、O紅細胞、抗體篩選細胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ(上海血液生物醫(yī)藥責任公司), 抗人球蛋白抗免疫球蛋白(Ig)G+C3d(上海血液生物醫(yī)藥責任公司)。
1.3 方法 ABO正反定型、RH(D)血型鑒定為微柱凝膠卡式法, 在IH1000全自動分析儀上進行;不規(guī)則抗體為玻璃珠微柱卡式法, 在AUTOVUE全自動分析儀上進行;交叉配血用凝聚胺法。所有試驗均嚴格按照試劑說明書及《全國臨床檢驗操作規(guī)程》[1]進行操作。本院ABO正反定型不符或不規(guī)則抗體篩查陽性導(dǎo)致交叉配血困難的標本送常州市中心血站實驗室作抗體鑒定等檢測。對25000例患者交叉配血的結(jié)果進行統(tǒng)計, 并分析導(dǎo)致交叉配血不合的原因。
2.1 血型 因血型原因造成配血不合15例, 其中ABO抗原減弱3例, 抗A或抗B抗體減弱9例, 均為異基因造血干細胞移植患者;另外3例為多發(fā)性骨髓瘤患者。
2.2 冷抗體或自身抗體 由于冷抗體或自身抗體出現(xiàn)配血不合8例, 其中自身免疫性溶血性貧血患者6例, 特發(fā)性血小板減少性紫癜患者1例, 經(jīng)檢查, 多種抗人球蛋白試驗陽性, 抗IgG陽性, 抗-C3d陽性, 血清中檢出IgM型或IgG型或IgM+IgG未知特異性抗體及自身抗體。1例主動脈瓣狹窄患者, 經(jīng)檢查, 多種抗人球蛋白試驗陰性, 抗IgG陰性,抗-C3d陰性, 抗體篩選試驗陽性, 血清中檢出非特異性冷抗體, 患者血清和紅細胞懸液反應(yīng)出現(xiàn)蛋白樣凝集。由于一般配血時出現(xiàn)的冷凝集, 多發(fā)生在天氣較為寒冷的冬季, 37℃水浴加溫后凝集可消失, 因此不作統(tǒng)計。
2.3 不規(guī)則抗體 因產(chǎn)生不規(guī)則抗體出現(xiàn)配血不合22例。鑒定發(fā)現(xiàn)IgG抗-E 10例, IgM+IgG抗-E 3例, IgG抗-C 2例,IgG 抗 -c 2 例 , IgG 抗 -e 1 例 , IgM 抗 -M 3 例 , IgM 未知特異性抗體1例。
文獻資料表明, 引起交叉配血不合的原因可分為免疫性和非免疫性[2], 免疫性因素又可分為血型錯誤和抗體因素兩種。隨著全自動血型儀的廣泛使用及實驗技術(shù)的不斷提高,人為血型鑒定錯誤的情況已鮮少出現(xiàn), 血型錯誤通常發(fā)生在除去某些人為因素(試劑不標準, 加錯標本, 離心速度不足或過度, 細胞與標準血清比例不當?shù)?的前提下, 某些疾病導(dǎo)致抗原減弱, 未做反定型誤定血型, 或抗體效價低(如嬰幼兒, 老年人等), 某些藥物干擾或正反定型沒有同時做等導(dǎo)致血型定型錯誤。通常在某些病理情況下或某些特殊血型(如亞型等)會出現(xiàn)正反定型不符。在本院調(diào)查的的45例患者中正反定型不符15例, 其中ABO血型非同型異基因造血干細胞移植轉(zhuǎn)型期患者12例, 多發(fā)性骨髓瘤患者3例, 通過正反定型比對能及時發(fā)現(xiàn)存在問題, 對于一些具有弱抗原的亞型, 如果只做正定型極易被忽略, 通過反定型就能糾正因紅細胞抗原性減弱而造成的血型定型錯誤。因此, 在血型鑒定時一定要同時做正反定型, 并且在反定型中加做O型紅細胞,可以起到部分抗體篩選的作用[3]。
抗體因素中的不規(guī)則抗體導(dǎo)致的交叉配血不合是我國目前出現(xiàn)交叉配血不合的主要原因, 患者由于妊娠或進行過多次輸血, 自身機體產(chǎn)生了抗-A、抗-B以外的其他血型抗體,造成配血不合, 還有一些疾病導(dǎo)致患者產(chǎn)生的自身抗體(如自身免疫性溶血患者)也會導(dǎo)致配血不合。非免疫性因素常見于巨球蛋白血癥、多發(fā)性骨髓瘤、霍奇金病等血清蛋白異常的疾病, 或是某些藥物、蒸餾水中一些離子干擾等引起。
根據(jù)本院45例交叉配血不合原因分析發(fā)現(xiàn), 造成本院配血不合的最主要原因是由于不規(guī)則抗體的存在, 其中, 以抗-E和抗-M所占比例較高。不規(guī)則抗體產(chǎn)生多為Rh系統(tǒng),大多是通過輸血或妊娠免疫產(chǎn)生的, 因此在發(fā)生交叉配血不合時, 首先應(yīng)向臨床了解患者的既往輸血史和妊娠史, 通過復(fù)查血型排除人為錯誤, 進行不規(guī)則抗體鑒定以明確具體存在的是何種抗體, 然后有針對性地選擇不含相應(yīng)抗原的血液再次進行交叉配血, 但是由于對獻血人員抗原進行鑒定工程太大, 本市中心血站采取的方法是用多個獻血人員血液同時與患者標本進行交叉配血, 取其中交叉配血相合或相對凝集較弱者洗滌后給予患者輸注。
從分析結(jié)果可見, 患者體內(nèi)存在的高效價的冷凝集素也是造成配血困難的常見原因之一。一般情況下, 少量冷凝集素對交叉配血不合產(chǎn)生的影響可通過放置37℃水浴解決, 但一些自身免疫性疾病、病毒支原體感染性疾病、淋巴增生性疾病時, 患者血清中會出現(xiàn)高效價的冷凝集素, 在低溫時可以較強地凝集紅細胞[4-7]。對于自身抗體陽性的患者, 本市中心血站的方法亦是采用多個獻血人員血液與患者標本同時進行交叉配血, 取相合或相對凝集較弱者洗滌后給予輸注[4],并且在輸注前要保證血液在室溫平衡30 min后再行緩慢輸注, 密切觀察。
對于本院的交叉配血采用的方法, 作者認為可以進一步完善。凝聚胺法雖然操作簡便快速, 適用于急診患者, 但微柱凝膠法操作更易標準化, 結(jié)果更容易判讀, 敏感性也高于凝聚胺法, 適用于擇期手術(shù)和內(nèi)科患者, 安全性更高。另外,一些國外文獻報道中提及的電子交叉配血[8,9], 在每年完成的10萬例交叉配血中, 98%是電子交叉配血, 2%需要血清學交叉配血(原因是患者有輸血史或者存在有臨床意義的同種抗體), 經(jīng)過電子交叉配血后接受輸血的患者沒有一例發(fā)生急性溶血性輸血反應(yīng)并可減少20%~42%的血液需求。在血站與臨床醫(yī)療機構(gòu)的信息共享的實現(xiàn)、在數(shù)據(jù)的準確錄入、血液類型確認、抗體篩選陽性患者的識別、樣本需求、計算機確認、風險分析等日益完善的前提下[10], 隨著現(xiàn)代信息技術(shù)的發(fā)展、獻血模式的轉(zhuǎn)變及管理水平的提高, 可以預(yù)見,在不遠的將來, 國內(nèi)的大多數(shù)醫(yī)院也將采用此更先進的方法來為臨床更好地服務(wù)。