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      蒙藥材黑冰片吸附內(nèi)毒素與活性炭作用的比較研究△

      2018-01-19 09:28:39李甫泉陳廣榮魏艷沛白音夫馮國(guó)慶
      中國(guó)民族醫(yī)藥雜志 2018年2期
      關(guān)鍵詞:冰片家兔內(nèi)毒素

      李甫泉 常 亮 陳廣榮 金 輝 魏艷沛 白音夫 馮國(guó)慶 劉 靜

      (1.內(nèi)蒙古自治區(qū)中醫(yī)醫(yī)院,內(nèi)蒙古 呼和浩特 010020; 2.內(nèi)蒙古國(guó)際蒙醫(yī)醫(yī)院,內(nèi)蒙古 呼和浩特 010065; 3.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬人民醫(yī)院,內(nèi)蒙古 呼和浩特 010010)

      內(nèi)毒素是革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁外層的組成部分,主要成分為脂多糖,是細(xì)菌感染后的主要致病因素。黑冰片為炭化后的野豬糞,其作用原理不明確。本文采用鱟試劑法測(cè)定黑冰片對(duì)內(nèi)毒素的吸附作用[1],并與活性炭吸附作用進(jìn)行比較。

      1 材料

      1.1 試劑 內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品(中國(guó)食品藥品檢定研究院),鱟試劑(廈門市鱟試劑實(shí)驗(yàn)廠),活性炭(張家口活性炭廠),黑冰片(內(nèi)蒙古阿爾泰藥材公司)。

      1.2 儀器 TGL-16型高速離心機(jī)(上海醫(yī)用分析儀器廠),SHZ88-1型臺(tái)式水浴恒溫振蕩器(江蘇太倉(cāng)鹿河生化儀器廠),AL204電子天平(瑞典),DNM-9602酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀(北京普朗新技術(shù)有限公司),移液器(德國(guó)Eppendorf),離心管(美國(guó)corning),所有玻璃器皿均250°干燥2h,以除去外源性內(nèi)毒素;塑料器皿均為密封包裝無污染的一次性用品。

      2 方法與結(jié)果

      2.1 黑冰片用量對(duì)內(nèi)毒素吸附作用 取內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)液1EU·mL-1、10EU·mL-1各5mL加入至含有取預(yù)先經(jīng)250°處理2h后的黑冰片與活性炭的試管內(nèi),黑冰片終濃度為2%、4%、8%、12%,活性炭終濃度為0.5%、1%、2%、3%,振搖10min后,離心2000轉(zhuǎn)/min,取上清液,按鱟試劑盒使用說明書操作,用移液器取反應(yīng)液,加到酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀的測(cè)定板微孔內(nèi)測(cè)定內(nèi)毒素含量,并計(jì)算吸附率:[(吸附前的內(nèi)毒素含量-吸附后的內(nèi)毒素含量)/吸附前內(nèi)毒素含量]×100%。結(jié)果,內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)液1EU·mL-1、10EU·mL-1,黑冰片終濃度2%、4%、8%、12%,對(duì)內(nèi)毒素吸附率23%、63%、97%、97%和20%、60%、95%、95%;活性炭終濃度0.5%、1%、2%、3%,對(duì)內(nèi)毒素吸附率32%、90%、99%、99%和41%、95%、98%、99%。

      2.2 黑冰片作用時(shí)間對(duì)內(nèi)毒素吸附作用 取上述內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)液,分別加入終濃度8%黑冰片,2%活性炭,振搖0min、5min、10min、20min,按上法處理測(cè)定液體內(nèi)內(nèi)毒素含量并計(jì)算吸附率。結(jié)果內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)液1EU·mL-1、10EU·mL-1,作用時(shí)間0、5、10、20(min),黑冰片對(duì)內(nèi)毒素吸附率分別為5%、70%、97%、97%和7%、70%、96%、96%;活性炭對(duì)內(nèi)毒素吸附率分別為12%、82%、99%、99%和21%、88%、99%、99%。

      2.3 不同溫度黑冰片對(duì)內(nèi)毒素吸附作用 取1EU·mL-1、10EU·mL-1內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)液,分別加入成終濃度8%黑冰片,2%活性炭,在20℃、37℃分別振搖10min,按上法處理,測(cè)定液體內(nèi)內(nèi)毒素含量并計(jì)算吸附率,結(jié)果表明,黑冰片與活性炭作用溫度在20℃、37℃無明顯差異,內(nèi)毒素吸附率分別為98%、97%和99%、99%。

      2.4 吸附作用后對(duì)家兔致熱作用 選取體溫正常家兔20只,體重1.5~2kg,測(cè)定體溫,均分4組,對(duì)照組、模型組、黑冰片與活性炭組。對(duì)照組耳iv 0.5mL/kg生理鹽水,模型組iv0.5mL/kg1EU·mL-1,黑冰片與活性炭組分別iv黑冰片與活性炭吸附后1EU·mL-10.5mL/kg,觀察對(duì)家兔致熱效果。結(jié)果,對(duì)照組致熱前體溫38.1±0.6(±s,℃),致熱后1h、2h、3h、5h、8h體溫分別為38.1±0.5、38.2±0.6、38.1±0.4、37.8±0.5、37.9±0.6;模型組致熱前體溫38.2±0.5,致熱后體溫分別為39.4±0.5(P<0.05)41.2±0.4(P<0.01)、40.7±0.7(P<0.01)、40.2±0.5(P<0.05)、39.7±0.7(P<0.05);黑冰片組致熱前體溫37.9±0.6,致熱后體溫分別為38.2±0.6、38.4±0.3、38.1±0.3、38.3±0.7、38.4±0.3;活性炭組致熱前體溫37.8±0.4,致熱后體溫分別為38.3±0.7、38.2±0.5、38.1±0.6、38.2±0.8、38.3±0.3。

      3 討論

      實(shí)驗(yàn)表明,黑冰片與活性炭用量對(duì)細(xì)菌內(nèi)毒素的吸附作用呈正相關(guān),黑冰片吸附內(nèi)毒素作用低于活性炭。震蕩作用10min,黑冰片可把液體內(nèi)的細(xì)菌內(nèi)毒素大部分吸附,作用溫度對(duì)黑冰片的內(nèi)毒素吸附作用差異不大。經(jīng)吸附后的內(nèi)毒素溶液對(duì)家兔體溫?zé)o明顯致熱作用,表明,黑冰片主要作用原理與活性炭作用一致。

      活性炭是由含碳物質(zhì)作為原料,經(jīng)高溫脫水碳化和活化而制成的多孔性疏水性吸附劑?;钚蕴烤哂斜缺砻娣e大、高度發(fā)達(dá)的孔隙結(jié)構(gòu),1g活性炭材料中微孔,將其展開后表面積可高達(dá)800~1500m2,同時(shí)活性炭孔徑內(nèi)“范德華力”的作用極大增加活性炭吸附作用力。黑冰片為晾干后的野豬糞經(jīng)高溫脫水碳化,野豬糞主要成分為碳水化合物,含有少量的無機(jī)鹽類,這與活性炭制作原料及制作過程一致,上述實(shí)驗(yàn)也證明,黑冰片對(duì)內(nèi)毒素的吸附作用,可認(rèn)為,黑冰片的作用原理與活性炭作用原理一致,即通過對(duì)體內(nèi)有害物質(zhì)的吸附作用,緩解臨床癥狀,同時(shí)可能,黑冰片中少量無機(jī)鹽類參與臨床的治療作用。黑冰片吸附作用弱于活性炭,其原因可能源于兩者脫水炭化處理過程的不同。所以,為提高黑冰片臨床療效,可委托活性炭生產(chǎn)廠按活性炭工藝加工炮制黑冰片。

      [1]肖貴南,程朝輝,盛英美.活性炭吸附細(xì)菌內(nèi)毒素作用研究[1].中國(guó)藥房,2010,21(5):443

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