牛病毒性呼吸道疾病診斷方法

米吉提 張治華 銀鴿 （新疆博州溫泉縣畜牧獸醫(yī)站 833500）

對養(yǎng)牛業(yè)而言，一旦出現(xiàn)牛呼吸道疾病，除了對養(yǎng)牛場的經(jīng)濟(jì)效益造成影響外還會影響整個養(yǎng)牛業(yè)的發(fā)展。導(dǎo)致牛出現(xiàn)呼吸道疾病的具體原因比較復(fù)雜，病毒是其中非常重要的病理之一，通過對現(xiàn)階段已經(jīng)分離出的病毒分析可以看出，除牛病毒性腹瀉病毒、牛傳染性鼻氣管炎病毒等。牛呼吸道疾病還與一些環(huán)境因素產(chǎn)生聯(lián)系，比如溫度、濕度、粉塵等。

1 牛病毒性呼吸道疾病的病毒分離鑒定診斷方法

通過現(xiàn)階段已經(jīng)分離出來的病毒分析得出，這些病毒都可以被放在牛腎細(xì)胞上進(jìn)行培養(yǎng)。在針對這些病毒進(jìn)行現(xiàn)場檢測時，可直接從感染呼吸道疾病的牛鼻腔分泌液上進(jìn)行樣本采集。在檢測時，采集病牛氣管黏膜或者是已經(jīng)發(fā)生病變的肺部組織，同時還可以將一些血液、脾臟器官當(dāng)做樣本進(jìn)行試驗(yàn)分析。其中BVDV出現(xiàn)兩種病變類型，其一是致細(xì)胞病變型 （CP），其二是非致細(xì)胞病變型 （nCP）。其中CP-BVDV可以讓感染細(xì)胞逐漸變圓，這樣會導(dǎo)致細(xì)胞漿液逐漸出現(xiàn)空泡現(xiàn)象，這種狀態(tài)如果一直持續(xù)會形成細(xì)胞單層拉網(wǎng)，最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡。通過對該現(xiàn)狀內(nèi)容進(jìn)行實(shí)際分析可以看出，現(xiàn)階段在臨床上主要是將nCP-BVDV作為分離的主要類型。在這種前提條件下可以直接與一些免疫熒光、RT-PCR等進(jìn)行結(jié)合，實(shí)現(xiàn)分離毒株培養(yǎng)物的有效鑒定，能盡可能保證鑒定結(jié)果真實(shí)、有效。除此之外，IBRV能促使細(xì)胞逐漸呈現(xiàn)出圓縮狀態(tài)，這種狀態(tài)下，其會漸漸演變成為葡萄樣群落，在單層細(xì)胞上會呈現(xiàn)出空洞現(xiàn)象[1]。除此之外，在實(shí)踐中還會偶爾出現(xiàn)合胞體狀態(tài)，針對這一現(xiàn)狀，在實(shí)踐中如果想對IBRV進(jìn)行鑒定，看其是否存在致細(xì)胞病變的病毒時，需要將通過病毒培養(yǎng)的上清液放置在特定的抗血清、或者是一些單克隆體上進(jìn)行中和試驗(yàn)。在中核試驗(yàn)實(shí)施過程中，要保證所有流程都按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)定去完成，這樣才能保證中和試驗(yàn)的效果。在中和試驗(yàn)完成之后，通過對試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析，一旦確定細(xì)胞已經(jīng)被IBRV所感染，那么在這之中必然會出現(xiàn)核內(nèi)包涵體。

2 牛病毒性呼吸道疾病的病毒核酸檢測診斷方法

除了病毒分離鑒定的診斷方法之外，病毒核酸檢測的診斷方法也是近年來在針對牛病毒呼吸道疾病進(jìn)行判斷時比較常見的方式。病毒核算檢測方法與病毒分離方法在針對牛病毒性呼吸道疾病診斷時，前者與后者相比具有比較多的優(yōu)點(diǎn)。這是由于病毒分離法在實(shí)際應(yīng)用過程中很容易受到中和抗體的干擾，導(dǎo)致其敏感性和特異性比較高。另外，核算檢測方法能針對一些有感染性的病毒粒子進(jìn)行檢測。病毒核酸檢測方法在實(shí)際應(yīng)用過程中，該方法的整體敏感性和特異性比較明顯，同時還能在實(shí)際應(yīng)用中直接感受到已經(jīng)受到感染、或者是一些不完整的病毒基因，利用該方法可以實(shí)現(xiàn)對其科學(xué)合理的檢測。在檢測過程中，不僅實(shí)現(xiàn)對這些病毒的深入檢測，而且還能保證最終的檢測結(jié)果。有部分專家根據(jù)BVDV5’UTR基因序列，結(jié)合實(shí)際情況，構(gòu)建特異性引物，并且在其中逐漸形成了能夠針對BVDV進(jìn)行有效檢測的RT-PCR方法[2]。這種方法后期被應(yīng)用到實(shí)踐中，能從BVDV Oregon C24V中逐漸擴(kuò)增出相應(yīng)的特異性片斷。除此之外，從豬瘟病毒、IBRV、BRSV等的擴(kuò)增結(jié)果進(jìn)行分析可以看出，這些病毒的擴(kuò)增結(jié)果呈現(xiàn)陰性。

3 結(jié)束語

綜上所述，本文在針對牛病毒性呼吸道疾病診斷方法進(jìn)行分析，介紹病毒分離鑒定和病毒核酸檢測兩個方法。這些方法在保證最大限度為牛病毒性呼吸道疾病提出有針對性診斷的基礎(chǔ)上，能保證診斷結(jié)果真實(shí)、有效，為后期疾病防治提供準(zhǔn)確有效的依據(jù)作為支持。

[1]薛飛,朱遠(yuǎn)茂,馬磊.我國牛病毒性腹瀉、黏膜病研究進(jìn)展及防控策略[J].中國奶牛,2016（11）:25-29.

[2]王煒.牛主要呼吸道病毒病血清學(xué)調(diào)查、牛病毒性腹瀉病毒分離株鑒定及疫苗研究[D].北京:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院,2014.