□ 蔣 龍 深圳中檢聯(lián)檢測(cè)有限公司
近年來(lái),由于有機(jī)磷農(nóng)藥具有很好的殺蟲(chóng)特性,人們?cè)谑卟撕图Z食種植中大量地使用。這種農(nóng)藥已經(jīng)成為當(dāng)前使用量最多的農(nóng)藥種類(lèi)。但是有機(jī)磷農(nóng)藥的毒性較大,如果在食品中有著有機(jī)磷的殘留,就可能導(dǎo)致人體出現(xiàn)中毒現(xiàn)象,因此對(duì)食品中有機(jī)磷農(nóng)藥含量殘留檢測(cè)就變得非常重要,這對(duì)于保證人們的食品安全有著重要的意義[1]。目前來(lái)看,有機(jī)磷農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法已經(jīng)取得了很大的進(jìn)展,本文就將對(duì)研究進(jìn)展進(jìn)行論述。
近年來(lái)我國(guó)由于農(nóng)藥中毒而引發(fā)的死亡事件已經(jīng)超過(guò)了上萬(wàn)人,給社會(huì)造成非常嚴(yán)重的危害。由于人體不能夠有效地分解農(nóng)藥,因此農(nóng)藥會(huì)在人體之中不斷地進(jìn)行積累,如果超過(guò)一定的限度,就會(huì)引起農(nóng)藥中毒現(xiàn)象,可能會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)畸形、癌變甚至死亡的現(xiàn)象。我國(guó)對(duì)此給予了高度的重視,投入了大量的資金去進(jìn)行農(nóng)藥殘留檢測(cè),并且進(jìn)行嚴(yán)格的控制措施,堅(jiān)決避免農(nóng)藥殘留超標(biāo)的食品進(jìn)入到市場(chǎng)當(dāng)中,并且取得了較好的效果,對(duì)食品中有機(jī)磷農(nóng)藥含量的檢測(cè)也有著多種方法,下面筆者就對(duì)這些方法進(jìn)行介紹。
在進(jìn)行檢測(cè)之前,首先就要進(jìn)行提取操作。由于有機(jī)磷本質(zhì)上屬于一種有機(jī)物,因此在進(jìn)行提取的時(shí)候應(yīng)當(dāng)要選擇有機(jī)試劑進(jìn)行,常用的試劑有著丙酮、二氯甲烷和乙酸乙酯等。在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的時(shí)候,人們通常使用效果較好的乙腈作為提取劑,乙腈能夠很好地溶解有機(jī)磷,并且可以和水以任意比進(jìn)行互溶,另外,乙腈還能夠溶解其他的一些蛋白質(zhì)類(lèi)物質(zhì)[2]。如果使用其他的物質(zhì)可能會(huì)帶來(lái)一定的問(wèn)題,例如有著一定的毒性,或者不能夠很好地溶解有機(jī)磷。因此人們通常選用乙腈來(lái)進(jìn)行提取。
在進(jìn)行檢測(cè)實(shí)驗(yàn)時(shí),選用乙腈作為提取劑,但是也需要采用一定的提取方式,將需要進(jìn)行檢測(cè)的物品進(jìn)行提取,然后再進(jìn)行檢測(cè)試驗(yàn)。提取的方法也有著多種,不同的方法有著不同的效果,經(jīng)常應(yīng)用的提取方式有著勻漿法、超聲法、浸泡法和機(jī)械振蕩法等。通常情況下,人們需要處理少量的樣品時(shí),會(huì)采用勻漿法或者渦旋法進(jìn)行提取工作,這時(shí)候每次只能夠處理一個(gè)樣品。其優(yōu)點(diǎn)是簡(jiǎn)單方便,但是其效率較低并且能效較大,對(duì)于需要處理大量樣品的時(shí)候,通常不會(huì)選用這兩種方法。浸泡法需要較長(zhǎng)的時(shí)間,但是其不需要太高的技術(shù),操作步驟也非常簡(jiǎn)單,但是需要花費(fèi)很長(zhǎng)的時(shí)間,并且檢測(cè)的精度也不太高,因此僅僅適用于一些要求度較低的檢測(cè)。機(jī)械振蕩法不需要太多的人工操作,提取的質(zhì)量也非常高,效率也較好,因此應(yīng)用的范圍非常廣泛,是當(dāng)前最為常見(jiàn)的一種提取有機(jī)磷農(nóng)藥的方法。
在進(jìn)行檢測(cè)之前,為了能夠提高檢測(cè)的精度,需要對(duì)提取的樣品進(jìn)行凈化處理,將樣品當(dāng)中可能對(duì)檢測(cè)有影響的物質(zhì)進(jìn)行去除。一般來(lái)講,對(duì)檢測(cè)結(jié)果干擾較大的物質(zhì)主要有著酯類(lèi)、酚類(lèi)、水和色素等。對(duì)于水果和蔬菜類(lèi)物質(zhì),其最大的干擾物質(zhì)就是水分,對(duì)其進(jìn)行凈化的方法主要有過(guò)濾、鹽析、蒸發(fā)等。對(duì)于一些脂質(zhì)含量較多的物質(zhì),主要是對(duì)其進(jìn)行除脂操作。對(duì)于茶葉或者一些中草藥來(lái)講,由于其本身成分較為復(fù)雜,因此進(jìn)行凈化的過(guò)程也非常繁瑣,并且凈化的效果也達(dá)不到很好。當(dāng)凈化處理做好以后,就可以進(jìn)行檢測(cè)工作。
色譜法是一種較為傳統(tǒng)的方法,其能夠定量地進(jìn)行檢測(cè)。色譜法能夠較為精確地對(duì)食品中有機(jī)磷農(nóng)藥進(jìn)行檢測(cè),但是需要提前對(duì)樣品進(jìn)行處理。氣相色譜法主要就是利用氣體作為流動(dòng)相來(lái)進(jìn)行農(nóng)藥殘留檢測(cè)。氣相色譜法能夠很好地控制食物中殘留的有機(jī)磷農(nóng)藥,防治其進(jìn)行揮發(fā),因此利用氣相色譜法進(jìn)行檢測(cè)誤差非常小。在進(jìn)行檢測(cè)的時(shí)候,通常會(huì)應(yīng)用火焰光度和氮磷含量檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè),其不需要大量的樣品,檢測(cè)的靈敏度也非常高,但是在進(jìn)行檢測(cè)工作之前,需要對(duì)檢測(cè)器進(jìn)行校正才能夠保證檢測(cè)的準(zhǔn)確性。
高效液相色譜法也是一種較為常見(jiàn)的檢測(cè)方法,其主要是利用液體作為流動(dòng)相來(lái)進(jìn)行農(nóng)藥殘留檢測(cè)。在利用這種方法進(jìn)行檢測(cè)的時(shí)候,需要利用大量的實(shí)驗(yàn)試劑,但是其操作較為簡(jiǎn)單,不需要太多的步驟。對(duì)于一些穩(wěn)定性較差的農(nóng)藥來(lái)講,高效液相色譜相比于氣相色譜法能夠有著更好的效果,能夠大大提升檢測(cè)的精度。在利用高效液相色譜法進(jìn)行檢測(cè)時(shí),在很多的過(guò)程都能夠?qū)崿F(xiàn)自動(dòng)化處理,這樣能夠讓檢測(cè)所需的工作量大大降低,并且檢測(cè)的精度也較高。薄層色譜法是利用固定相進(jìn)行檢測(cè)的一種方法,利用薄層色譜法,能夠快速地對(duì)微量物質(zhì)進(jìn)行分析,并且操作的流程最為簡(jiǎn)單,但是在食品有機(jī)磷農(nóng)藥含量的檢測(cè)中,其精確度較差,因此應(yīng)用較為有效。另外,在實(shí)際的應(yīng)用中,還會(huì)利用一種氣相色譜與質(zhì)譜法聯(lián)合檢測(cè)法。在進(jìn)行對(duì)有機(jī)磷含量進(jìn)行檢測(cè)時(shí),可以利用氣相色譜法分離出農(nóng)藥中的有機(jī)磷成分,然后利用質(zhì)譜法對(duì)含量進(jìn)行精確的檢測(cè)。通常來(lái)講,農(nóng)藥中含有的有機(jī)物種類(lèi)非常多,利用這種聯(lián)合的方法去進(jìn)行檢測(cè)能夠有著更好的效果,因此在實(shí)際中有著非常廣泛的應(yīng)用。
有機(jī)磷農(nóng)藥通過(guò)與膽堿酯酶進(jìn)行一定的化學(xué)反應(yīng)來(lái)達(dá)到抑制的效果。這個(gè)化學(xué)反應(yīng)較為復(fù)雜,并且還有著很多其他物質(zhì)的參與,反應(yīng)能夠形成一定的復(fù)合物。由于反應(yīng)的發(fā)生會(huì)讓膽堿酯酶的結(jié)構(gòu)發(fā)生一定的變化,這樣就會(huì)讓酶具備的催化效應(yīng)失效,進(jìn)而起到對(duì)酶的抑制作用,并且能夠讓酶自行水解。對(duì)酶進(jìn)行一定的處理后,能夠讓酶的穩(wěn)定性得到很大的提升,不會(huì)同其他的一些物質(zhì)發(fā)生反應(yīng),利用這樣的酶就能夠?qū)τ袡C(jī)磷農(nóng)藥進(jìn)行檢測(cè)。可以得知,酶抑制法就是利用有機(jī)磷農(nóng)藥同酶能夠發(fā)生反應(yīng)的特點(diǎn)來(lái)進(jìn)行檢測(cè)的。有機(jī)磷能夠?qū)δ憠A酯酶的活性進(jìn)行抑制,讓酶的催化作用大大降低,然后再利用電極作為檢測(cè)的方法,將膽堿酯酶放在電極上。如果樣品中不含有有機(jī)磷農(nóng)藥,則酶的活性不會(huì)被抑制,因此酶就能夠有著較強(qiáng)的催化作用,從而讓檢測(cè)的試劑發(fā)生顯色反應(yīng)。如果樣品中含有有機(jī)磷農(nóng)藥,就會(huì)抑制酶的活性,導(dǎo)致酶沒(méi)有催化作用,就不會(huì)發(fā)生顯色反應(yīng)或者顯示的顏色較淺。通過(guò)對(duì)試劑顏色的變化進(jìn)行分析就能夠得出樣品中是否含有有機(jī)磷農(nóng)藥,再經(jīng)過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)色進(jìn)行比對(duì)就能夠定量得到有機(jī)磷的含量。酶抑制法具有著操作簡(jiǎn)單,速度快的特點(diǎn),能夠在現(xiàn)場(chǎng)就去進(jìn)行檢測(cè),但是其靈敏性較之色譜法有著一定的差距,因此還需要人們進(jìn)行不斷研究。
酶聯(lián)免疫法出現(xiàn)在20世紀(jì)60年代左右,在80年代的時(shí)候開(kāi)始在農(nóng)藥檢測(cè)方面進(jìn)行應(yīng)用。酶聯(lián)免疫法具有著很多的優(yōu)點(diǎn):其一,靈敏度非常高,能夠檢測(cè)出1 μg的量;其二,操作簡(jiǎn)單,可進(jìn)行定量的測(cè)定。但是,酶聯(lián)免疫法也有著一定的缺點(diǎn),例如特異性非常強(qiáng),一種試劑只能夠檢測(cè)一種物質(zhì),在進(jìn)行檢驗(yàn)的時(shí)候,如果遇上農(nóng)藥殘留成分較為復(fù)雜,檢驗(yàn)就非常復(fù)雜,并且酶聯(lián)免疫法需要的抗體的價(jià)格非常高,因此目前還沒(méi)有應(yīng)用到實(shí)際檢測(cè)中來(lái)。但是對(duì)于這種方法的研究卻一直在進(jìn)行,例如:我國(guó)就有人利用這個(gè)方法對(duì)水果進(jìn)行檢測(cè),發(fā)現(xiàn)能夠發(fā)現(xiàn)非常小量的有機(jī)磷農(nóng)藥殘留,并且還能夠?qū)κ褂玫脑噭┻M(jìn)行回收。在國(guó)外一些地方還出售酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒,但是價(jià)格非常高,不適合在大范圍內(nèi)進(jìn)行推廣。
我國(guó)人民對(duì)于食品安全問(wèn)題的重視程度越來(lái)越高,因此對(duì)于食品管理機(jī)構(gòu)來(lái)講,應(yīng)當(dāng)要加大對(duì)于食品中有機(jī)磷農(nóng)藥含量的檢測(cè)力度,健全農(nóng)藥殘留檢測(cè)的機(jī)制,這樣才能夠保證食品的安全,讓人們放心地食用。