肉蓯蓉中活性物質(zhì)體外抗氧化活性研究進(jìn)展

張 青，夏美茹，孫志惠

（內(nèi)蒙古河套學(xué)院農(nóng)學(xué)系，內(nèi)蒙古臨河 015000）

肉蓯蓉始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，享有“沙漠人參”之美譽(yù)，為列當(dāng)科肉蓯蓉屬多年生草本植物，多寄生于藜科梭梭屬植物的根部，主要分布于歐洲、亞洲溫暖的干燥地區(qū)，我國的肉蓯蓉主要分布于內(nèi)蒙古（阿拉善盟、巴彥淖爾市）、新疆、甘肅等地。從20世紀(jì)80年代至今，國內(nèi)外學(xué)者對肉蓯蓉的化學(xué)成分及生物活性進(jìn)行了深入研究并取得較大的成績，已從中分離到苯苷類、環(huán)烯醚萜類及其苷類、木質(zhì)素、黃酮類等活性成分，其具有益腎壯陽[1]、通便潤腸[2]、保護(hù)肝臟[3]、免疫調(diào)節(jié)[4]、抗衰老[5]、抗腫瘤、提高學(xué)習(xí)記憶力[6]、抗骨質(zhì)疏松[7]、促進(jìn)創(chuàng)傷愈合、保護(hù)缺血心肌、改善微循環(huán)等作用。從肉蓯蓉活性物質(zhì)、體外抗氧化活性評價方法及抗氧劑的應(yīng)用等方面介紹了近年來肉蓯蓉活性物質(zhì)的研究進(jìn)展。

1 肉蓯蓉抗氧化活性物質(zhì)

1.1 苯乙醇苷類

苯乙醇苷化合物具有較強(qiáng)的生物活性和顯著的藥理活性特性[8]。從肉蓯蓉中共分離鑒定出苯乙醇苷類61個[9]，包括肉蓯蓉苷、松果菊苷、毛蕊花糖苷、類葉升麻苷、異類葉升麻苷、紅景天苷等。屠鵬飛等人[10]研究肉蓯蓉成分，結(jié)果表明其主要的活性成分是苯乙醇總苷（主要指標(biāo)性成分是松果菊苷和毛蕊花糖苷），苯乙醇總苷是肉蓯蓉質(zhì)量控制的主要檢測指標(biāo)。曾克武等人[11]利用線栓法制備大鼠大腦中動脈阻斷模型，考查肉蓯蓉苯乙醇苷的腦保護(hù)作用，結(jié)果表明，從靶點源頭上解釋了肉蓯蓉苯乙醇苷發(fā)揮抗癡呆、緩解疲勞、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)等諸多作用的潛在藥理機(jī)制。

1.2 環(huán)烯醚萜及其苷類

環(huán)烯醚萜類化合物具有多種生物活性[12]，從肉蓯蓉中共分離鑒定出環(huán)烯醚萜及其苷類25個[9]。京尼平苷酸又稱梔子苷酸，是一種環(huán)稀醚萜葡萄糖苷，具有消炎利膽等功效成分，因此在臨床上用于降血壓、止痛、鎮(zhèn)靜等。李莉等人[13]采用高效液相色譜法對肉蓯蓉中京尼平苷酸的含量進(jìn)行測定，結(jié)果表明在5.0～100.0 μg/mL 范圍內(nèi)線性關(guān)系良好 （R=0.999 9），平均回收率在95%～101%，RSD為0.55%～1.95%。

1.3 黃酮類

黃酮類化合物具有重要的生物活性，王慧[14]研究發(fā)現(xiàn)黃酮類化合物具有抗腫瘤、抗心血管疾病、抗氧化、抗衰老、抗菌、抗病毒、免疫調(diào)節(jié)等作用，徐常永等人[15]采用大孔吸附樹脂對肉蓯蓉總黃酮的吸附作用，通過吸附試驗和正交試驗得到肉蓯蓉總黃酮分離純化較佳的工藝條件，分離純化前后總黃酮的質(zhì)量分?jǐn)?shù)由6.63%提高到72.35%。

1.4 其他

目前，國內(nèi)外的專家和學(xué)者已從肉蓯蓉中已分離并鑒定出100種以上化學(xué)成分和微量元素，除上述成分外，還有木脂素及其苷類、多糖、生物堿、烴類、氨基酸類、菇類、揮發(fā)性成分、無機(jī)微量元素等成分。

2 肉蓯蓉活性物質(zhì)體外抗氧化活性的評價方法

2.1 肉蓯蓉活性物質(zhì)對DPPH·清除率評價方法的研究

DPPH·（1,1-二苯基-2-三硝基苯肼）在517 nm處有最大吸收峰，是一種較為穩(wěn)定的自由基，因其穩(wěn)定性好、靈敏度高、設(shè)備要求不高而成為檢測抗氧化能力首選。DPPH·的醇溶液呈深紫色，當(dāng)自由基清除劑存在時，其吸收逐漸消失即顏色變淺，它的褪色程度與自由基清除劑接受的電子數(shù)成定量關(guān)系。DPPH·清除率最常用的檢測方法是分光光度計法，還可用高效液相色譜、電子核磁共振、薄層層析等技術(shù)進(jìn)行檢測。肖星輝等人[16]采用乙醇-鹽雙水相萃取法對荒漠肉蓯蓉總黃酮的體外抗氧化性進(jìn)行研究。結(jié)果表明，荒漠肉蓯蓉總黃酮對DPPH·具有有效的清除作用，其對DPPH·清除率最高可達(dá)91.8%，具有較好的抗氧化活性。王國衛(wèi)等人[17]通過試驗表明肉蓯蓉多糖對DPPH·的清除能力與其濃度呈正相關(guān),且清除能力大于抗壞血酸。

2.2 肉蓯蓉活性物質(zhì)對羥基自由基清除率評價方法的研究

羥基自由基（·OH） 在510 nm處有最大吸收峰，是氧化能力較強(qiáng)的自由基，可與體內(nèi)的脂肪等有機(jī)物大分子發(fā)生連續(xù)反應(yīng)，引起機(jī)體損傷?？寡趸瘎┯昧颗c·OH清除能力成正比，一般以水楊酸作為捕捉劑?！H清除率最常用的檢測方法是紫外可見分光光度法，目前還可用熒光法、電子自旋共振法、化學(xué)發(fā)光法、高效液相色譜法等方法。肉蓯蓉活性成分具有清除·OH的能力，肖星輝等人[16]研究荒漠肉蓯蓉總黃酮對·OH的體外抗氧化性，結(jié)果表明，荒漠肉蓯蓉總黃酮可以有效清除·OH，其對·OH清除率最高可達(dá)35.9%。宋陽[18]采用熒光法對肉蓯蓉中黃酮類化合物抗氧化性進(jìn)行測定，其對·OH清除率為91.5%，結(jié)果表明肉蓯蓉中黃酮類化合物具有很強(qiáng)的抗氧化性。王國衛(wèi)等人[17]通過試驗表明肉蓯蓉多糖對·OH有良好的清除作用，且隨濃度增大而增大。

2.3 肉蓯蓉活性物質(zhì)對ABTS+·清除率評價方法的研究

ABTS[2,2′-聯(lián)氮雙（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二銨鹽]在414 nm或734 nm處有最大吸收峰，具有還原性，易被氧化成相對穩(wěn)定的藍(lán)綠色水溶性ABTS+·，ABTS+·與抗氧化劑反應(yīng)后溶液褪色，褪色越強(qiáng)，吸光度越低。溶液退色程度與溶液的抗氧化能力成正比。黃靖等人[19]采用超聲酶法對肉蓯蓉多糖ABTS+·的清除能力的測定，通過試驗表明在50～1 000 mg/L范圍內(nèi)，肉蓯蓉多糖鋅配合物對ABTS+·的清除能力高于肉蓯蓉精制多糖；當(dāng)質(zhì)量濃度為1 000 mg/L時，肉蓯蓉多糖鋅配合物對ABTS+·清除率達(dá)到36.83%。

2.4 肉蓯蓉活性物質(zhì)其他體外抗氧化活性的研究方法

肉蓯蓉活性成分除了以上體外抗氧化研究方法外，還常用到總還原力測定（鐵氰化鉀法）、氧自由基吸收量的測定、抗氧化當(dāng)量的測定、超氧自由基（O-2·） 清除能力的試驗等體外抗氧化研究方法。

3 結(jié)語

近年來，專家學(xué)者們對肉蓯蓉抗氧化活性進(jìn)行了大量的研究，結(jié)果表明肉蓯蓉在體內(nèi)外可清除各種自由基，提高機(jī)體內(nèi)抗氧化酶的活性[20]，體外抗氧化活性是用以評價抗氧化劑抗氧化活性的一種快速、簡便、靈敏可行的方法[21]。肉蓯蓉作為一種傳統(tǒng)中藥材，多年來的試驗研究表明，肉蓯蓉有重要的藥用價值和經(jīng)濟(jì)價值，根據(jù)肉蓯蓉所具有的藥理作用等已研制出肉蓯蓉產(chǎn)品有蓯蓉總苷膠囊、蓯蓉四倍丸[22]、復(fù)方蓯蓉益智膠囊[23]等用于臨床應(yīng)用。

據(jù)阿拉善盟科技技術(shù)局獲悉，從2014年正式啟動了荒漠肉蓯蓉申報新食品原料項目工作；2018年1月，國家衛(wèi)計委下發(fā)通知公開征求意見，將肉蓯蓉（荒漠）、黨參等9種物質(zhì)增補(bǔ)一批既是食品又是中藥的物質(zhì)進(jìn)入食藥物質(zhì)目錄，阿拉善荒漠肉蓯蓉被列入擬重點研究的物質(zhì)名單要求荒漠肉蓯蓉試生產(chǎn)2年。未來可以通過一定的加工技術(shù)、微生物技術(shù)等來實現(xiàn)肉蓯蓉有效成分的工業(yè)化生產(chǎn)，滿足實際需要，解決資源破壞和浪費(fèi)問題。因此肉蓯蓉可以借鑒之前藥品的開發(fā)經(jīng)驗發(fā)展保健類食品，其開發(fā)方面具有著廣闊的前景。