豬博卡病毒的流行特點(diǎn)與檢測方法

寧雪松

（阜新縣畜牧獸醫(yī)局務(wù)歡池動物衛(wèi)生監(jiān)督所，遼寧 阜新 123107）

博卡病毒為細(xì)小病毒亞科的博卡病毒屬，細(xì)小病毒分為濃病毒亞科和細(xì)小病毒科亞科，濃病毒亞科主要感染昆蟲，細(xì)小病毒科亞科主要感染脊椎動物。細(xì)小病毒亞科又分為貂阿留申病毒屬、細(xì)小病毒屬、紅病毒屬、博卡病毒屬和依賴病毒屬等。博卡病毒是無囊膜單股線狀DNA病毒，全基因5.2kb，病毒直徑為25～30納米。博卡病毒包括牛細(xì)小病毒、大猩猩博卡病毒、犬極細(xì)小病毒、豬博卡病毒和人博卡病毒1～4型等。目前，已成功分離的豬博卡病毒有5個(gè)基因型——豬博卡病毒1～5型，都含有2個(gè)主要的開放式閱讀框，編碼非結(jié)構(gòu)蛋白和衣殼蛋白。博卡病毒最早在2009年在患斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征病豬的淋巴結(jié)中檢出，同年豬博卡病毒在我國養(yǎng)殖場被檢出。博卡病毒在豬的不同組織中檢出率不同，即使在無臨床癥狀的豬組織中也可檢出，博卡病毒與圓環(huán)病毒常混合感染。豬博卡病毒的致病機(jī)理及致病性尚不清楚，病理變化也不明確，關(guān)于感染后的癥狀表現(xiàn)等臨床報(bào)道較少，檢出豬博卡病毒的病豬有明顯的呼吸癥狀及肺損傷。

華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院收集2013～2015年間，來自河南、湖北、河北、廣東和福建的屠宰場或養(yǎng)殖場的樣本，用P C R檢測博卡病毒的帶毒情況且分析流行特點(diǎn)。結(jié)果表明，博卡病毒在我國養(yǎng)殖場和屠宰場廣泛分布，總流行率37.92%；在不同樣本類型中，糞便檢出率最髙（59.62%）、血清36.59%、腸系膜淋巴結(jié)36%、淋巴結(jié)最低僅為2.94%。中國動物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心等單位從屠宰場采集豬扁桃體、淋巴結(jié)和脾臟等組織，采用套式PCR分別檢測博卡病毒1型和2型，28份樣品中有2份樣品為陽性，且均為豬博卡病毒2型感染。上海市動物疫病預(yù)防控制中心利用實(shí)時(shí)熒光定量P C R檢測，采集于上海規(guī)模養(yǎng)殖場的1800份豬血清、豬糞便、豬鼻棉拭及高熱病死豬內(nèi)臟，陽性率分別為24%、30%、0%和67%。6份博卡病毒陽性病料進(jìn)行與豬繁殖呼吸綜合征病毒、豬圓環(huán)病毒2型、豬偽狂犬病毒、豬細(xì)小病毒檢測，陽性率分別為83%、100%、0%和0%，表明博卡病毒感染在上海普遍存在，豬內(nèi)臟中檢出率較高，春秋高發(fā)，并與豬繁殖呼吸綜合征病毒、豬圓環(huán)病毒2型混合感染。

目前，豬博卡病毒的檢測方法主要有病毒細(xì)胞培養(yǎng)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、間接免疫熒光技術(shù)、聚合酶鏈反應(yīng)和反轉(zhuǎn)錄－聚合酶鏈反應(yīng)。四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物生物技術(shù)中心根據(jù)GenBank發(fā)布的博卡病毒的不同基因型序列，分別設(shè)計(jì)豬博卡病毒1～5型的PCR引物，在分別建立單一PCR基礎(chǔ)上，通過對兩組引物的比例、退火溫度等條件的優(yōu)化，建立同時(shí)檢測豬博卡病毒1型/2型和豬博卡病毒3型/4型/5型的雙重PCR法。