水貂阿留申病毒早期診斷的常用方法

高 前

（鐵嶺縣橫道河子鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)技術(shù)綜合服務站，遼寧 鐵嶺 112600）

我國大規(guī)模養(yǎng)殖水貂始于20世紀50年代，70～90年代，除極少數(shù)國內(nèi)品種外，主要從丹麥、北美、芬蘭、瑞典等國家引入。目前，我國水貂養(yǎng)殖的主要省份有東北三省、河北、山東。由于我國水貂養(yǎng)殖以粗放型、散養(yǎng)為主，導致阿留申病在中國流行十分普遍，由于本病損害生殖力，導致我國水貂平均產(chǎn)仔率低于4只，而丹麥可達6只。水貂絕窩、空懷及產(chǎn)仔數(shù)減少等現(xiàn)象頻發(fā)極有可能因本病所致。水貂阿留申病又被稱為漿細胞增多癥，是由微小病毒科的水貂阿留申病毒引起的水貂免疫抑制性、慢性、消耗性的傳染疾病，提早診斷水貂阿留申病是目前防控本病的主要方法。

1 碘凝集試驗

碘凝集試驗原理是病貂血清C-球蛋白升高，遇碘制劑(包含碘化鉀4.0克，碘22克，蒸餾水30毫升)會發(fā)生凝聚反應，比較簡單所以是最早采用的非特異性診斷方法， 此方法至今仍被國內(nèi)大多數(shù)養(yǎng)貂場及研究所實驗室所應用。

2 對流免疫電泳

對流免疫電泳是通過病毒抗原檢測水貂血清中病毒的抗體來診斷阿留申病的主要方法，此方法優(yōu)點是診斷病毒感染特異性和檢出率相當高，達95%以上，無論在敏感度還是特異性、靈敏度上都遠高于碘凝集試驗法，可廣泛用于貂群阿留申病的篩查。碘凝集反應通過檢測阿留申病貂血清中高濃度γ球蛋白來診斷阿留申病，最先被用于阿留申病診斷，但高濃度 γ球蛋白不是阿留申病毒有特征，因此不具有特異性。對流免疫電泳的原理是：抗原抗體在電場的作用下和阿留申病毒相對運動，當相遇后會在瓊脂凝膠板中形成清楚可見的抗體沉淀線。研究表明水貂在感染阿留申病毒后9～11天就可產(chǎn)生沉淀抗體，并能穩(wěn)定持續(xù)半年以上。我國20世紀80年代起開始應用對流免疫電泳檢測阿留申病，直到目前仍是世界公認的檢測阿留申病病毒的黃金法則。

3 PCR法

阿留申病病毒的基因組為約5kb長的單鏈DNA，由2個大的開放閱讀框組成，分別編碼非結(jié)構(gòu)蛋白NS1、NS2、NS3及結(jié)構(gòu)蛋白VP1、VP2。研究者對比了PCR法和對流免疫電泳發(fā)檢測阿留申病毒的差異。檢測源于55個已知感染阿留申病毒和8個未感染阿留申病毒的農(nóng)場，共299份水貂血清、淋巴結(jié)及脾臟樣品，結(jié)果表明與對流免疫電泳相比PCR診斷的敏感性約為95%，特異性約為98%，兩種診斷方法具有較高的一致性。