張中喜,鄒 平*,高國應(yīng)
(長沙醫(yī)學(xué)院臨床學(xué)院,湖南 長沙 410219)
SD雄性大鼠40只,寧鄉(xiāng)科峰生物技術(shù)公司(動物合格證號:SNFK(湘)2016-08),均為4周齡。給予高脂飼料(2%膽固醇、0.2%膽酸鈉、10%豬油、5%蔗糖、82.8%基礎(chǔ)飼料)喂養(yǎng)10周,測量并記錄每組大鼠體重。然后實驗?zāi)P褪箅S機分成五組:A組(n=6,普通飼料喂養(yǎng)),B組(n=8,單純應(yīng)用0.3 mg/d阿司匹林),C組(n=8,單純給予0.4 mg/d的阿托伐他?。?,D組(銀杏葉30 mg,3次/d)、E組(n=10,0.3 mg/d阿司匹林、0.4 mg/d阿托伐他汀聯(lián)合銀杏葉30 mg,3次/d),實驗組均為普通飼料喂養(yǎng)8周。每周定期檢測各組大鼠體重且在標(biāo)準(zhǔn)條件下,取標(biāo)本靜脈血做血脂測定;并于18周末處死,解剖大鼠切取出3只A組大鼠的冠狀動脈標(biāo)本,以及B組、C組、D組大鼠冠狀動脈標(biāo)本各4只、E組的大鼠冠狀動脈標(biāo)本5只。
應(yīng)用改良的油紅染色液:油紅0.5 g,50%乙醇100 mL。將油紅O染色液溶于50%乙醇內(nèi),邊溶解邊攪拌使之完全溶解即可。配制好的染液放置在標(biāo)本瓶內(nèi)保存?zhèn)溆谩?/p>
染色步驟:①切片干燥后入50%乙醇稍洗;②油紅0乙醇染液作用8~10 min;③50%乙醇分化,蒸餾水終止分化;④蘇木素復(fù)染核,蒸餾水返藍(lán),甘油明膠封片。
觀察:細(xì)胞內(nèi)的脂肪滴呈紅色,細(xì)胞核呈藍(lán)色。
準(zhǔn)備好實驗用品:(一)器材:切片機,切片刀,溫臺,恒溫箱,解剖刀,解剖針,單面刀片,蠟杯等。(二)試劑:Carnoy固定液,埃利希蘇木精染液,1%鹽酸乙醇液,各濃度酒精等。按照步驟制作石蠟標(biāo)本。
治療前血脂比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。治療8周后,對照組血脂無明顯變化,其他4組血脂均有下降,與對照組對比,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),與本組治療對比,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),而阿司匹林/阿托伐他汀聯(lián)合銀杏葉制劑組血脂下降明顯,但與阿托伐他汀組、銀杏葉制劑組對比,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
A組大鼠的脂肪染色標(biāo)本結(jié)果顯示冠狀動脈壁附著較多的呈紅色的脂肪滴,范圍累及較廣。B組與C組大鼠脂肪染色標(biāo)本示動脈壁脂肪滴較之前A組少,血脂降低。D組大鼠脂肪染色標(biāo)本示動脈壁脂肪滴較B、C兩組有所減少,血脂含量也有所降低。E組大鼠脂肪染色標(biāo)本示動脈壁脂肪滴較D組明顯減少,血脂含量明顯降低。
阿托伐他汀是3羥基-3甲基戊二酰基輔酶A還原酶抑制劑,具有改善內(nèi)皮細(xì)胞功能,干擾血小板聚集等作用。本研究結(jié)果表明,阿托伐他汀治療組可以有效地降低血清LDL-C和TC,與治療前及對照組相比有統(tǒng)計學(xué)意義。
本研究發(fā)現(xiàn)阿司匹林/阿托伐他汀聯(lián)合銀杏葉制劑組在治療8周后,大鼠標(biāo)本冠狀動脈脂質(zhì)沉著、血脂下降明顯,與阿托伐他汀組、銀杏葉制劑對比差異明顯。綜上所述,阿司匹林/阿托伐他汀聯(lián)合銀杏葉制劑聯(lián)合應(yīng)用對冠狀動脈粥樣硬化斑塊起效快、作用強。