兩種不同方法孵化臺灣泥鰍受精卵試驗

孫守旗

（懷遠(yuǎn)縣水產(chǎn)技術(shù)推廣中心，安徽 懷遠(yuǎn) 233400）

臺灣泥鰍屬鯉形目副泥鰍屬（Paramisgurnus），為雜食性小型經(jīng)濟魚類，其肉味鮮美，肉質(zhì)滑嫩，生長速度快、體質(zhì)健壯，備受養(yǎng)殖戶喜愛[1-2]。近年來各地紛紛開展臺灣泥鰍的養(yǎng)殖，已經(jīng)出現(xiàn)了苗種嚴(yán)重短缺現(xiàn)象。筆者2016年在安徽省淮王漁業(yè)科技有限公司生產(chǎn)基地進(jìn)行了兩種孵化方法的對比性生產(chǎn)研究，旨在摸索出一套實用、簡易的臺灣泥鰍受精卵孵化方法，為生產(chǎn)單位批量生產(chǎn)臺灣泥鰍苗種提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 親本 親本來源于安徽省淮王漁業(yè)科技有限公司鰍科魚類良種場，并在其繁育基地做此試驗。親本泥鰍規(guī)格：平均12尾/kg，體長16 cm以上，體質(zhì)量60 g/尾以上，要求體表無傷，頭肩背寬，體型豐滿，繁殖期雌體腹部有明顯卵帶輪廓，1冬齡以上。臺灣泥鰍親本雌雄個體的長度和體質(zhì)量無明顯差異，這和當(dāng)?shù)卮篦[副泥鰍不同[3]。相關(guān)培育技術(shù)參照（DB34/T1000-2009）《泥鰍親本選擇與培育技術(shù)操作規(guī)程》。

1.1.2 人工催產(chǎn)藥物及工具 藥物有絨毛膜促性腺激素（HCG）、地歐酮（DOM）、鮭魚促性腺激素類似物（S-GnRH-A）。工具：注射用1 mL醫(yī)用皮試注射器、解剖盤、泥鰍人繁工作臺，親本控制網(wǎng)、手撈等。

1.1.3 脫黏材料及脫黏工具 材料：黃泥漿、氯化鈉、水。脫黏工具：塑料盆、過濾網(wǎng)、羽毛、勺等。

1.1.4 孵化設(shè)備 磚混結(jié)構(gòu)魚苗孵化環(huán)道9口，直徑8 m、深度1 m，孵化用水體30 m3。

1.1.5 附著受精卵的材料 著卵網(wǎng)規(guī)格40 cm×50 cm，骨架為8號鋼絲，網(wǎng)片為40目尼龍網(wǎng)，數(shù)量若干個。

1.2 方法

1.2.1 人工催產(chǎn) 催產(chǎn)時每尾雌鰍注射絨毛膜促性腺激素（HCG）20 IU、馬來酸地歐酮（DOM）1 mg、鮭魚促性腺激素釋放激素類似物（S-GnRH-A）5 μg合劑，依照泥鰍個體大小和成熟度酌情增減藥物的用量，雄鰍減半。采取背部肌肉注射藥物的方法，左手用控制器將泥鰍親本固定后，右手執(zhí)注射器從其背鰭基部后方兩側(cè)肌肉較多處刺入，深度0.1～0.2 cm，向其頭部呈45°角迅速注入藥液。

1.2.2 人工授精 水溫25℃時效應(yīng)時間11 h左右。操作時麻醉泥鰍親本使用麻醉劑MS-222，麻藥濃度為100 g/m3。左手用毛巾包住泥鰍的頭部，右手抹去泥鰍體表的黏液和水分后，把卵粒和精液排擠在干凈的容器里，雌雄比例為3∶1。同時用羽毛攪拌完成操作。

1.2.3 脫黏 黃泥漿脫黏液配制方法是：黃泥浸在水中12 h以上，泡軟后加水?dāng)噭蛲ㄟ^80目濾網(wǎng)過濾，此時黃泥漿為黏稠懸浮物狀態(tài)，脫黏時不停攪拌，防止黃泥沉淀。黃泥、水的比例是3∶10，加入氯化鈉使其含量達(dá)到0.6%的濃度。

脫黏操作步驟：精卵結(jié)合完成受精作用后，迅速倒入黃泥漿，用羽毛攪拌脫黏，每10萬粒受精卵約需200 mL黃泥漿脫黏。

1.2.4 著巢 人工授精后泥鰍受精卵直接潑灑在靜水中的著卵網(wǎng)具上，每個網(wǎng)片上布卵5萬粒左右，做到均勻分布無擠壓成堆現(xiàn)象。受精卵布置好后2 min便可黏在網(wǎng)片上，取出著卵網(wǎng)具懸掛在微流水孵化環(huán)道內(nèi)進(jìn)行孵化。

1.2.5 孵化 脫黏后的受精卵直接進(jìn)入環(huán)道孵化，孵化初期加大水的流速，流速控制在25 cm/s左右，此時觀察水中受精卵能夠被流水沖散，并均勻在水中分布，6 h后降低流速，控制在15 cm/s，具體以能夠讓鰍卵浮起為準(zhǔn)。水溫24℃時，30～32 h之間90%的受精卵孵出鰍苗，28℃時，需要24～26 h孵出。

未脫黏受精卵懸掛在環(huán)道微流水中孵化，流速控制在15 cm/s，出苗時間與脫黏孵化相同。

1.2.6 受精率、孵化率、畸形率計算 受精率的計算方法：受精后6 h為計算時間，隨機抽取部分受精卵，使用高錳酸鉀溶液著色，肉眼觀察計數(shù)。每批次抽取3個樣品，計算受精率的平均數(shù)為該批次的受精率。

孵化率的計算方法：泥鰍受精卵全部孵化出苗后，抽樣計算幼苗總數(shù)，計算孵化率。

畸形率的計算方法：在抽樣計算孵化率的同時計算畸形率。健康苗種的標(biāo)準(zhǔn)是體型正常無彎曲殘次現(xiàn)象、體色灰黑或灰黃，體長3～4 mm，活動正常且有逆流游泳的能力。計算公式如下：

受精率＝成活的卵粒數(shù)÷卵粒總數(shù)×100%；

孵化率＝泥鰍幼苗數(shù)÷受精卵數(shù)×100%；

畸形率＝幼苗殘次數(shù)÷幼苗總數(shù)×100%。

2 結(jié)果

試驗2016年5月9日開始進(jìn)行人工繁殖，到5月25日繁殖結(jié)束，兩種方法共孵化臺灣泥鰍5批次，每次生產(chǎn)在進(jìn)行到人工授精后，分成兩個小組同時進(jìn)行受精卵的脫黏孵化和著巢孵化。本次試驗共獲苗9 794萬尾。兩種方法孵化的結(jié)果是：脫黏孵化產(chǎn)苗8 259萬尾，孵化率81%，畸形率2.4%；不脫黏孵化產(chǎn)苗1 535萬尾，孵化率61%，畸形率7.3%。詳見表1。

表1 兩種方法孵化的情況

3 小結(jié)

臺灣泥鰍是近年來興起的水產(chǎn)養(yǎng)殖的優(yōu)良品種之一，具有生產(chǎn)速度快、雌雄個體大小無差異、個體大、骨骼軟、可食部分較多等諸多優(yōu)點，備受養(yǎng)殖戶、消費者關(guān)注和喜愛。由于臺灣泥鰍的養(yǎng)殖規(guī)模不斷擴大，苗種已經(jīng)出現(xiàn)短缺現(xiàn)象，各地也紛紛開展了臺灣泥鰍的人工繁殖工作。在臺灣泥鰍苗種人工繁育方面，各地為了提高生產(chǎn)效率，一般都采取人工授精的方法。受精卵的孵化方法有脫黏和著巢兩種：脫黏工作相對復(fù)雜，增加了勞動強度，技術(shù)上要求員工操作手法嫻熟；著巢孵化簡便易行，但是難以實現(xiàn)大批量生產(chǎn)。

魚類受精卵孵化率受天氣、水溫、水質(zhì)、敵害、設(shè)備、管理、親本成熟度等諸多因素影響，本次試驗為了提高可比性，兩種孵化方式采取了使用相同設(shè)備和水體同步孵化，每一批次都隨機分為兩組進(jìn)行。從試驗結(jié)果來看，使用兩種不同的方法孵化臺灣泥鰍受精卵，都能收到一定的效果。試驗結(jié)果與李峰[4]試驗的結(jié)果比較接近，李峰試驗孵化桶流水孵化率為80%、網(wǎng)箱靜水孵化率為60.6%，李倩等[5]采取特制孵化設(shè)備進(jìn)行受精卵孵化，孵化率平均在80%，與本次試驗也比較接近。本次試驗中脫黏孵化的孵化率81%，著巢孵化的孵化率平均61%。兩者相比較，后者降低了20個百分點，說明脫黏孵化具有顯著的優(yōu)越性，能夠提高苗種生產(chǎn)能力。建議臺灣泥鰍苗種生產(chǎn)單位應(yīng)使用脫黏微流水孵化的方法開展苗種繁育工作，可有效提高孵化率和產(chǎn)能。

臺灣泥鰍產(chǎn)黏性卵，受精卵的黏性比當(dāng)?shù)啬圉q、大鱗副泥鰍要強，采用著巢孵化在布卵時很難做到布卵均勻無堆積，受精卵黏在一起，中間的卵粒不接觸新鮮水，容易缺氧造成死亡，死后的卵粒感染水霉菌可形成霉菌擴散，影響其周圍的卵粒發(fā)育，這是造成著巢孵化率低、畸形率高的原因。

我國已經(jīng)制定了青、草、鰱、鳙等魚類的苗種質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[6]，臺灣泥鰍苗種的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)尚沒有制定，本次試驗中兩種孵化方法的幼苗畸形率分別是2.4%和7.3%，朱瑜等[7]認(rèn)為優(yōu)質(zhì)臺灣泥鰍苗種中的畸形率應(yīng)低于3%，很顯然本次試驗中著巢孵化的畸形率較大，說明著巢孵化臺灣泥鰍苗的質(zhì)量較差，而脫黏孵化的結(jié)果比較符合朱瑜等人觀點，可以批量生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)臺灣泥鰍苗。

[1]丁辰龍，王興海，王宣明，等.臺灣泥鰍與本地泥鰍繁育、性腺發(fā)育與生長的比較[J].天津師范大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2016，36（3）：66-73.

[2]黃菊，儲張杰，鄧尚貴，等.三種泥鰍生長性能及營養(yǎng)成分的比較[J].浙江海洋學(xué)院學(xué)報（自然科學(xué)版），2015，34（1）:32-35.

[3]戴璐怡.大鱗副泥鰍和臺灣泥鰍形態(tài)學(xué)研究和線粒體基因組全序排列分析[D].寧波：浙江海洋學(xué)院，2015.

[4]李峰.臺灣泥鰍人工繁育試驗[J].云南農(nóng)業(yè)，2016（6）：51-52.

[5]李倩，茹金根，劉士力，等.“臺灣泥鰍”人工繁殖試驗[J].河北漁業(yè)，2014（9）：34-46

[6]中國標(biāo)準(zhǔn)出版社第一編輯室.中國農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)匯編[M].北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2009.

[7]朱瑜，林崗，覃東明.臺灣泥鰍的質(zhì)量研究[J].養(yǎng)殖與飼料，2016（10）：23-24.