• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    抗青枯病病菌植物殺菌劑的研究

    2018-01-06 01:01:49曹鵬飛陳銀華周慧娟范芳娟楊繼
    江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2017年22期
    關(guān)鍵詞:青枯病

    曹鵬飛+陳銀華+周慧娟+范芳娟+楊繼

    摘要: 為研究抗青枯病病原菌的植物殺菌劑,以8種植物為材料,從中篩選出抑菌效果較好的有效植物,并采用單因素和二次正交旋轉(zhuǎn)組合試驗(yàn)對(duì)其最適乳油配方及其穩(wěn)定性進(jìn)行研究。結(jié)果表明,銀杏、馬尾松2種提取物的抑菌效果均顯著高于農(nóng)用鏈霉素,其中馬尾松提取物的抑菌效果最好,抑菌圈直徑達(dá)9.06 mm。植物提取物在丙酮中溶解效果好于其他溶劑,在吐溫-80中的分散最佳,且最穩(wěn)定。有效植物提取物的最適乳油配方為:506 mg/mL水杉提取物,827 mg/mL馬尾松提取物,481 mg/mL銀杏提取物,409 mg/mL野艾蒿提取物,0.205 mL/mL溶劑的乳化劑。該試驗(yàn)結(jié)果可為植物源殺菌劑的綜合開(kāi)發(fā)利用提供理論依據(jù)。

    關(guān)鍵詞: 青枯??;植物源殺菌劑;二次正交旋轉(zhuǎn)組合試驗(yàn);植物源殺菌劑

    中圖分類號(hào): S482.2+92 文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A

    文章編號(hào):1002-1302(2017)22-0102-06

    青枯病是一種全世界范圍廣泛分布的細(xì)菌性土傳病害,在高溫、高濕的熱帶、亞熱帶地區(qū)大量流行,是農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展的主要障礙之一[1]。青枯病害往往發(fā)生在梅雨季節(jié)過(guò)后,造成植物連片死亡和大幅度減產(chǎn),發(fā)病后期,治療比較困難,是一種系統(tǒng)侵染病害,如果土壤酸化嚴(yán)重、板結(jié)厲害,青枯病會(huì)大面積發(fā)生,甚至造成毀園。該病是由青枯假單胞桿菌[茄科勞爾氏菌(Ralstonia solanacearum)]引起的[2],通過(guò)根和莖的傷口或次生根的根冠進(jìn)入植物體,侵染寄主的木質(zhì)部,然后在整個(gè)維管束中蔓延,引起嚴(yán)重的萎蔫最終導(dǎo)致植物死亡[3]。青枯病菌在農(nóng)作物中分布范圍廣,能侵染多達(dá)50個(gè)科200種作物,在番茄、辣椒、煙草等茄科作物中普遍發(fā)生。

    近年來(lái),青枯病的防治主要以化學(xué)藥劑為主,如琥珀酸銅、青枯靈和噻菌銅等。但防治青枯病主要以推遲發(fā)病高峰期、減輕發(fā)病程度為目的,尤其在大面積發(fā)病時(shí)才進(jìn)行用藥防治已經(jīng)基本沒(méi)有效果。此外,長(zhǎng)期使用化學(xué)農(nóng)藥易導(dǎo)致植株產(chǎn)生抗藥性,造成土壤惡化、生態(tài)平衡破壞、農(nóng)藥殘留等問(wèn)題,危害到人類身體健康,并且造成很大的經(jīng)濟(jì)損失[4]。因此,尋求安全性高且不易產(chǎn)生抗藥性的殺菌劑,已受到廣泛關(guān)注。據(jù)相關(guān)研究表明,幾乎每種植物都能產(chǎn)生抑菌活性,但是抑菌效力和抑菌范圍還存在差異[5-7],且研究表明銀杏[8]、大蒜[9]、黃花蒿[10]、紫莖澤蘭[11]等對(duì)青枯病菌有較好的抑制作用,因此研究開(kāi)發(fā)安全生態(tài)的抗青枯病病原菌的植物源殺菌劑具有一定的可行性。

    本研究以銀杏外種皮、樟樹(shù)枝葉、水杉枝葉、馬尾松針、八角金盤(pán)葉、冬青衛(wèi)矛葉、龍葵根、野艾蒿等為植物材料,篩選出具有較強(qiáng)抗青枯病病原菌能力的有效植物,并對(duì)各植物提取物的最適抑菌濃度、最佳溶劑、最適乳化劑及其濃度進(jìn)行優(yōu)化,旨在制備出具有最佳抑菌效果的乳油劑型,旨在為植物源殺菌劑的綜合開(kāi)發(fā)利用提供理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料與儀器

    1.1.1 試驗(yàn)材料

    櫻桃番茄青枯病病原菌,自行分離得到。

    銀杏外種皮、樟樹(shù)(枝葉)、水杉(枝葉)、馬尾松針、八角金盤(pán)(葉)、冬青衛(wèi)矛(葉)、龍葵(根)、野艾蒿(花序)等植物材料,采自浙江省麗水市蓮都區(qū)白云山、納愛(ài)斯廣場(chǎng)、麗水學(xué)院校園以及南明山等地。

    1.1.2 主要試劑

    吐溫-80、N,N-二甲基甲酰胺、吐溫-20、二乙醇胺、BY-130、農(nóng)乳-600,以上試劑均為化學(xué)純。1%的纖維二糖、1%乳糖、1%麥芽糖、1%己六醇、1%甘露醇、1%山梨醇丙酮、苯、乙酸乙酯、甲醇、丙酮、冰醋酸,以上試劑均為分析純。

    1.1.3 培養(yǎng)基

    TTC培養(yǎng)基[12]、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基[13]、休和利夫森二氏培養(yǎng)基[14]、SPA培養(yǎng)基[15]、NA培養(yǎng)基[16]。

    1.1.4 主要儀器

    雙人單面凈化工作臺(tái)(蘇州凈化設(shè)備有限公司,SW-CJ-2FD)、立式壓力蒸汽滅菌器(上海申安醫(yī)療器械廠,LDZX-75KB)、生物顯微鏡(麥克奧迪實(shí)業(yè)集團(tuán)有限公司,BA210)、生化培養(yǎng)箱(上海益恒實(shí)驗(yàn)儀器有限公司,LRH-250)、723C可見(jiàn)分光光度計(jì)(上海欣茂儀器有限公司,Q/TBCR2)、智能恒溫?fù)u床(太倉(cāng)市實(shí)驗(yàn)設(shè)備廠,DHZ-C)、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(鞏義市英峪予華儀器廠,RE-52A)、SHZ-95型循環(huán)水式多用真空泵(河南鞏義市英峪予華儀器廠,1230211405)等。

    1.2 試驗(yàn)方法

    1.2.1 植物樣品的采集與處理

    隨機(jī)選取樣品植株(銀杏外種皮、樟樹(shù)枝葉、水杉枝葉、馬尾松針、八角金盤(pán)葉、冬青衛(wèi)矛葉、龍葵根、野艾蒿花序)裝入塑封袋中,標(biāo)上樣品序號(hào)、采樣地點(diǎn)等數(shù)據(jù)信息,帶回實(shí)驗(yàn)室。將植物樣品洗凈,于 60 ℃ 烘干后粉碎過(guò)40目篩備用。

    1.2.2 植物提取物的制備

    取植物粉碎樣品,加入4倍體積的丙酮,置于避光陰涼處,140 r/min震蕩提取3次,每次振蕩時(shí)間為24 h,合并3次濾液后,旋轉(zhuǎn)減壓濃縮至膏狀物。

    1.2.3 青枯病病原菌菌懸液的制備

    將病原菌接種至SPA培養(yǎng)基中,于30 ℃條件下培養(yǎng)2 d后,將青枯病病原菌菌懸液稀釋至1.0×108個(gè)/mL備用。

    1.2.4 植物提取物抑菌效果的測(cè)定

    采用濾紙片法[17]測(cè)定植物提取物的抑菌效果。

    1.2.5 抗青枯病病原菌植物提取物的篩選

    將有效植物提取物稀釋至50 mg/mL,測(cè)定其抑菌圈直徑(mm),以篩選出具有抑菌作用的有效植物提取物。

    1.2.6 抗青枯病病原菌有效植物提取物乳油配方的單因素試驗(yàn)

    1.2.6.1 植物提取物最適殺菌濃度的確定

    用丙酮將有效植物提取物稀釋至25、50、100、200、400、800 mg/mL,篩選出最佳濃度。

    1.2.6.2 溶劑的篩選

    將4種有效植物提取物均等混合,取約10 mg點(diǎn)于凹形載玻片的凹面內(nèi),再用移液槍吸取50 μL的溶劑(丙酮、苯、乙醇、乙酸乙酯、甲醇)點(diǎn)于濃縮物的一側(cè),加蓋玻片,觀察擴(kuò)散速度;室溫靜置1 h后,觀察溶解情況。

    1.2.6.3 乳化劑的篩選及其最適濃度的確定

    將4種有效植物提取物均等混合,取100 mg植物提取物,2 mL丙酮,每種乳化劑(吐溫-20、吐溫-80、農(nóng)乳-600、BY-130)設(shè)5個(gè)濃度(0.05、0.10、0.15、0.20、0.25 mL),用溶劑溶解濃縮物后,配制成乳油,進(jìn)行乳油分散情況和穩(wěn)定性的觀察試驗(yàn),能迅速地自動(dòng)分散為乳白色透明溶液,靜置后為均乳、無(wú)分離物,則為合格。

    1.2.7 二次正交旋轉(zhuǎn)組合設(shè)計(jì)優(yōu)化有效植物提取物最適乳油配方

    在上述單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上,以各有效植物提取物和乳化劑濃度為試驗(yàn)因素,以抑菌圈大小為考察指標(biāo),采用二次正交旋轉(zhuǎn)組合試驗(yàn)優(yōu)化有效植物提取物的最適乳油配方,旨在制備出具有最佳抑菌效果的乳油劑型。

    1.3 數(shù)據(jù)處理

    所有數(shù)據(jù)分析均用DPS 9.50軟件完成。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 抗青枯病病原菌有效植物提取物的篩選

    方差分析結(jié)果表明,不同植物提取物的抑菌效果具有極顯著差異(F=12.561,P<0.01)。由圖1可知,銀杏、馬尾松提取物抑菌效果均顯著高于農(nóng)用鏈霉素,其中馬尾松提取物抑菌效果最好,最大抑菌直徑為9.06 mm。水杉、野艾蒿提取物的抑菌效果明顯高于農(nóng)用鏈霉素,但不顯著。香樟提取物則與農(nóng)用鏈霉素抑菌效果相當(dāng)。因此,選擇水杉、銀杏、馬尾松、野艾蒿這4種植物提取物作為乳油配方的有效提取物。

    2.2 抗青枯病病原菌有效植物提取物乳油配方單因素試驗(yàn)

    2.2.1 有效植物提取物濃度對(duì)青枯病病原菌的抑菌效果

    由圖2~圖5可知,在25~800 mg/mL濃度范圍內(nèi),4種植物提取物的抑菌效果隨其濃度的增加而逐漸增強(qiáng)。當(dāng)水杉、馬尾松、銀杏提取物濃度在100~400 mg/mL時(shí),其抑菌圈直徑均明顯增加。在800 mg/mL時(shí),抑菌圈直徑均達(dá)到最大值,分別為1069、10.84、11.13 mm。野艾蒿提取物在50~400 mg/mL 濃度范圍內(nèi),抑菌圈直徑隨濃度的增加明顯增大,抑菌效果隨濃度升高呈明顯上升趨勢(shì)。在400~800 mg/mL濃度范圍內(nèi),抑菌圈直徑基本保持不變,抑菌效果趨于穩(wěn)定,抑菌圈直徑在10.50 mm左右。

    2.2.2 最佳溶劑、乳化劑的篩選及其最適濃度的確定

    4種植物提取物混合后在6種溶劑 (丙酮、苯、甲醇、乙酸乙酯、乙醇、N,N-二甲基甲酰胺)中的溶解度分別為0200、0.125、0、0.091、0.200、0.125 mg/μL,擴(kuò)散速度大小依次為:丙酮>苯>甲醇>乙酸乙酯=乙醇>N,N-二甲基甲酰胺。這表明丙酮和乙醇均具有良好的溶解效果,但考慮到乙醇擴(kuò)散速度不佳,故選用丙酮作為溶劑。

    由表1可知,4種乳化劑在乳化過(guò)程均具有較好的穩(wěn)定性,在放置1 h后均未出現(xiàn)分層現(xiàn)象。但就分散情況而言,4種乳化劑表現(xiàn)出不同的結(jié)果。吐溫-80的分散效果最佳,且當(dāng)吐溫-80在0.20 mL/mL溶劑濃度下制備的乳油分散效果明顯優(yōu)于其他乳化劑,乳油清亮無(wú)渾濁,長(zhǎng)久放置不分層,故乳油配方選用吐溫-80為乳化劑。

    2.3 二次正交旋轉(zhuǎn)組合設(shè)計(jì)優(yōu)化有效植物提取物最適乳油配方

    根據(jù)上述單因素試驗(yàn)結(jié)果,以抑菌圈直徑大小為考察目標(biāo),以水杉提取物濃度(X1)、馬尾松提取物濃度(X2)、銀杏提取物濃度(X3)、野艾蒿提取物濃度(X4)、乳化劑濃度(X5)為考察因素,進(jìn)行5因素5水平的二次正交旋轉(zhuǎn)試驗(yàn),以確定最適的乳油配方。試驗(yàn)因素水平編碼如表2所示,試驗(yàn)方案與結(jié)果如表3所示。

    2.3.1 回歸模型建立與檢驗(yàn)

    采用DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)對(duì)表3中的結(jié)果進(jìn)行二次多項(xiàng)式逐步回歸分析,得到水杉提取物、馬尾松提取物、銀杏提取物、野艾蒿提取物、乳化劑濃度的回 歸模型:Y=9.215 57+0.236 18X1+0.407 26X2-0.182 55X3- 0096 47X4+0.205 97X5+0.304 84X12-0.064 04X22+0165 21X32-0.117 73X42-0.165 60X52+0.355 70X1X2- 0251 77X1X3-0.123 33X1X4-0.106 92X1X5+0.164 73X2X3-0324 70X2X4+0.311 45X2X5-0.058 36X3X4-0.052 52X3X5+ 0010 42X4X5。

    由表4可知,回歸方程的失擬性檢驗(yàn),F(xiàn)1=1.498 64F0.01(20,15)=3.372,達(dá)到極顯著水平,說(shuō)明模型的預(yù)測(cè)準(zhǔn)確,模型成立,可用于描述水杉、馬尾松、銀杏、野艾蒿提取物濃度、乳化劑濃度變化的規(guī)律。X1、X3、X5、X32、X52、X1X3具有顯著性差異,X2、X12、X1X2、X2X4、X2X5具有極顯著性差異,在P=0.01顯著水平上剔除不顯著項(xiàng)后,簡(jiǎn)化的回歸方程為:

    Y=9.215 57+0.236 18X1+0.407 26X2-0.182 55X3+0.205 97X5+0.304 84X12+0.165 21X32-0.165 60X52+0355 70X1X2-0.251 77X1X3-0.324 70X2X4+0311 45X2X5。

    2.3.2 主效應(yīng)分析

    P值即概率,反映某一事件發(fā)生的可能性大小。各因素的P值可以反映出各因素對(duì)試驗(yàn)指標(biāo)的重要性,P值越小,表明該因素對(duì)試驗(yàn)結(jié)果影響越大,即重要性越大。由表4可知,5個(gè)試驗(yàn)因素對(duì)抑菌效果影響大小依次為馬尾松提取物濃度>水杉提取物濃度>乳化劑濃度>銀杏提取物濃度>野艾蒿提取物濃度。

    2.3.3 單因子效應(yīng)分析

    當(dāng)水杉提取物濃度、馬尾松提取物濃度、銀杏提取物濃度、野艾蒿提取物濃度、乳化劑濃度這5個(gè)影響因素中的任意4個(gè)為0,其中一個(gè)對(duì)抑菌效果的影響見(jiàn)圖6。由圖6可知,在-2.0~0水平下,水杉和銀杏提取物的抑菌效果隨濃度升高而下降,但在0~2.0水平時(shí),卻隨濃度升高而升高,這可能是由于植物提取物間存在著抑制作用,在低濃度時(shí),水杉和銀杏對(duì)其他植物的抑制較弱,體現(xiàn)了其他植物較好的抑菌效果,而到達(dá)0水平時(shí),抑菌效果的下降則與水杉和銀杏與其他植物間的抑制作用逐漸增強(qiáng)直接相關(guān)。到達(dá)高水平時(shí),抑菌效果又明顯增加,表明銀杏和水杉提取物的抑菌效果強(qiáng)于植物間的抑制作用。

    在-2.0~0水平下,馬尾松提取物和乳化劑濃度的升高均可以增加抑菌效果,但在0~2.0水平時(shí),再增加乳化劑濃度卻使抑菌效果略微下降,這可能是乳化劑濃度過(guò)高導(dǎo)致植物提取 物不能充分溶解;而抑菌效果隨馬尾松提取物濃度的增加呈線性上升趨勢(shì),表明馬尾松提取物濃度對(duì)抑菌效果的影響明顯。野艾蒿提取物濃度的改變對(duì)抑菌效果的影響不明顯。

    2.3.4 雙因子效應(yīng)分析

    從交互項(xiàng)系數(shù)可以看出,馬尾松與水杉提取物、馬尾松提取物與乳化劑以及馬尾松與野艾蒿提取物3種組分的交互作用達(dá)到極顯著水平;水杉與銀杏提取物的交互作用達(dá)到顯著水平,表明4種組分之間的配比對(duì)抑菌作用有顯著影響,響應(yīng)面結(jié)果如圖7至圖10所示。

    在水杉提取物濃度較低時(shí),馬尾松提取物濃度的增加對(duì)抑菌效果的影響不明顯,而當(dāng)濃度增大到0~2.0水平時(shí),馬尾松提取物濃度的改變對(duì)抑菌效果的影響明顯。在馬尾松提取物為低濃度水平時(shí),水杉濃度在-2.0~0.5水平時(shí),抑菌直徑呈下降趨勢(shì),在1.0~2.0水平,則有所上升??梢?jiàn)在 -0.5~1.0水平下的水杉與其他植物間具有較強(qiáng)的抑制作用,在低于這個(gè)濃度時(shí),其他植物的抑菌效果顯然強(qiáng)于水杉的抑制作用,而高濃度的水杉提取物則對(duì)抑菌效果影響明顯。

    當(dāng)乳化劑濃度處于較低水平時(shí),馬尾松提取物濃度的增加對(duì)抑菌效果的影響不明顯,可能是馬尾松提取物并未能全部溶于溶劑中,但在高濃度的乳化劑下,隨著馬尾松提取物濃度的增加抑菌效果明顯;而馬尾松提取物濃度較低時(shí),乳化劑濃度的增加可使馬尾松提取物濃度下降導(dǎo)致抑菌效果減弱。

    在水杉提取物濃度最低和銀杏提取物濃度最高以及銀杏提取物濃度最低和水杉提取物濃度最高時(shí),抑菌直徑達(dá)到最大。而在銀杏和水杉濃度都為最高時(shí),抑菌直徑卻較小,可見(jiàn)這2種植物間存在抑制作用。

    在馬尾松提取物濃度為-2.0水平時(shí),隨野艾蒿提取物濃度的增加抑菌效果呈上升趨勢(shì);當(dāng)野艾蒿濃度為-2.0水平時(shí),隨著馬尾松提取物濃度增加抑菌效果逐漸加強(qiáng)。而在-2.0~1.5水平時(shí),隨著兩者濃度等量增大時(shí)抑菌效果也逐漸增大,兩者都處于2.0水平時(shí),抑菌效果卻下降,可見(jiàn)兩者存在相互促進(jìn)作用,而高濃度提取物的抑菌效果的下降可能與提取物不能充分溶解有關(guān)。

    2.3.5 有效植物提取物最適乳油配方尋優(yōu)及驗(yàn)證

    對(duì)不同設(shè)計(jì)水平下的組合進(jìn)行模擬試驗(yàn),從55=3 125個(gè)組合中,獲得抑菌直徑>9.30 mm的方案1 940個(gè)。根據(jù)頻次分析結(jié)果和實(shí)際情況取任一值即可得出優(yōu)化組合,現(xiàn)取中值可得出,各組分的優(yōu)化組合為水杉提取物濃度506 mg/mL,馬尾松提取物濃度827 mg/mL,銀杏提取物濃度481 mg/mL,野艾蒿提取物濃度 409 mg/mL,乳化劑濃度0.205 mL/mL溶劑,預(yù)測(cè)抑菌直徑為9.49 mm。經(jīng)多次的驗(yàn)證性試驗(yàn),該乳油配方的抑菌直徑為9.2 8 mm,與預(yù)測(cè)值無(wú)顯著差異(F=2177,P>0.05),說(shuō)明該模型與試驗(yàn)相吻合,能適用于生產(chǎn)實(shí)踐。

    3 討論

    3.1 抗青枯病病原菌植物提取物的篩選

    相關(guān)研究表明,幾乎每種植物都能產(chǎn)生抑菌活性,但是抑菌效力和抑菌范圍存在著差異。冀玉良等研究發(fā)現(xiàn),銀杏、大蒜、黃花蒿、紫莖澤蘭等植物對(duì)青枯病菌均有較好的抑制作用[8,10,18-19]。本試驗(yàn)從銀杏、樟樹(shù)、水杉、馬尾松、八角金盤(pán)、冬青衛(wèi)矛、龍葵、野艾蒿中篩選出銀杏、馬尾松、野艾蒿、水杉4種較農(nóng)用鏈霉素具有明顯抑菌效果的植物,其中馬尾松的抑菌效果最強(qiáng),這可能與其所含的萜類化學(xué)物質(zhì)有關(guān),如薄采穎等研究表明,松針葉二萜酸對(duì)番茄灰霉病菌也有明顯抑制作用[20]。由此表明,馬尾松提取物具有較強(qiáng)的抑菌作用,可作為新型植物源農(nóng)藥重點(diǎn)開(kāi)發(fā)的研究對(duì)象。

    3.2 有效植物提取物乳油配方的優(yōu)化

    大量研究證明,二次正交旋轉(zhuǎn)組合試驗(yàn)設(shè)計(jì)與傳統(tǒng)的單因子試驗(yàn)法、正交試驗(yàn)法相比,能根據(jù)預(yù)測(cè)值直接尋求最優(yōu)區(qū)域,從多角度對(duì)模型進(jìn)行模擬分析,以充分發(fā)掘模型所提供的信息[21-23]。故本試驗(yàn)以各有效植物提取物、乳化劑濃度為試驗(yàn)因素,采用二次正交旋轉(zhuǎn)組合試驗(yàn)進(jìn)行優(yōu)化,得到最優(yōu)乳油配方為: 水杉提取物506 mg/mL, 馬尾松提取物 827 mg/mL,

    銀杏提取物481 mg/mL,野艾蒿提取物409 mg/mL,吐溫-80 0205 mL/mL溶劑,經(jīng)驗(yàn)證試驗(yàn)后抑菌直徑與預(yù)測(cè)值 9.49 mm 無(wú)顯著差異。由單因子效應(yīng)分析可知,馬尾松提取物濃度與抑菌效果的關(guān)系呈線性上升趨勢(shì),較其他植物提取物對(duì)抑菌效果有極顯著影響。毛勝鳳等研究發(fā)現(xiàn),馬尾松提取物在濃度為12.5~100.0 mg/mL時(shí)抑菌效果隨著濃度的增大而增大[24]。本試驗(yàn)中馬尾松濃度在25~400 mg/mL范圍內(nèi),抑菌直徑呈線性上升趨勢(shì),而濃度高于400 mg/mL后抑菌效果趨于平緩,表明在低濃度時(shí)馬尾松抑菌效果隨濃度增大而顯著增大,但高于一定水平時(shí),馬尾松的抑菌效果則會(huì)趨于穩(wěn)定,這可能與溶劑的溶解度大小有關(guān)。從雙因子互作效應(yīng)分析可知,馬尾松提取物濃度較高時(shí),隨著乳化劑濃度的增加抑菌效果明顯增加,研究表明天然的植物源殺菌劑在作用于寄主時(shí),其滲透性、延展性都是有限的,須添加助劑使其充分發(fā)揮藥效[25-26]。本試驗(yàn)研究表明,吐溫-80乳化劑的添加能增加有效植物提取物的滲透性和延展性,可達(dá)到增效的作用。在乳油劑型中,溶劑是其加工和使用中不可或缺的重要組分,用于溶解和稀釋原藥協(xié)助乳化分散,增加乳油流動(dòng)性[27-28]。根據(jù)蔡亞?wèn)|的研究表明,龍葵素乳油具較好擴(kuò)散性和溶解度的溶劑為N,N-二甲基甲酰胺和二甲苯,而丙酮?jiǎng)t相對(duì)效果較差[29]。本試驗(yàn)通過(guò)對(duì)溶劑的擴(kuò)散情況和溶解度的測(cè)定,確定丙酮為有效植物提取物乳油的最佳溶劑。由此可見(jiàn),溶劑的選擇具有針對(duì)性。

    綜上所述,經(jīng)二次正交旋轉(zhuǎn)組合試驗(yàn)優(yōu)化得到植物提取物的最適乳油配方,抑菌效果顯著優(yōu)于農(nóng)用鏈霉素。但該乳油配方仍存在著不少問(wèn)題,如植物活性成分難分離、易分解的問(wèn)題還有待解決,乳油劑型的穩(wěn)定性還有待進(jìn)一步研究。

    參考文獻(xiàn):

    [1] 肖相政,劉可星,廖宗文. 生物有機(jī)肥對(duì)番茄青枯病的防效研究及機(jī)理初探[J]. 農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào),2009,28(11):2368-2373.

    [2]張 彥,車建美,劉 波,等. 蠟樣芽孢桿菌ANTI-8098A在番茄內(nèi)的定殖和對(duì)青枯病的防治研究[J]. 中國(guó)生物防治學(xué)報(bào),2011,27(2):221-227.

    [3]高君君. 植物根際促生菌的篩選及其對(duì)番茄青枯病的生防作用[D]. 揚(yáng)州:揚(yáng)州大學(xué),2011:16-17.

    [4]李永剛. 一種植物源殺菌劑的研制及其在番茄葉霉病防治中的應(yīng)用[D]. 哈爾濱:東北農(nóng)業(yè)大學(xué),2003:10-11.

    [5]王志學(xué),黃廷鈺,胡永蘭,等. 抑菌植物研究初報(bào)[J]. 微生物學(xué)雜志,1999,19(4):49 - 57.

    [6]李百健,曾 榮,黃長(zhǎng)干,等. 植物殺菌劑的篩選[J]. 西南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2010,32(10):28-31.

    [7]梁曉華,梁曉東,穆瓊堂,等. 云南省4種蕨類植物提取液的抑菌活性[J]. 基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué),2010,29(4):711-716.

    [8]冀玉良. 利用銀杏外種皮提取液抑制農(nóng)作物病原菌初步研究[J]. 農(nóng)業(yè)網(wǎng)絡(luò)信息,2005(9):76,84.

    [9]張漢千,賴榮泉,陳志敏,等. 大蒜粗提物對(duì)煙草青枯病菌的室內(nèi)抑制作用測(cè)定[J]. 煙草科技,2009(3):62-64.

    [10] 吳 靜. 黃花蒿的抑菌活性及有效成分的初步分離研究[D]. 重慶:西南大學(xué),2008:20-21.

    [11]李麗萍. 紫莖澤蘭提取物對(duì)細(xì)菌的抑制作用及抑菌機(jī)理的研究[D]. 北京:北京林業(yè)大學(xué),2010.

    [12]車建美,劉 波,張 彥,等. 青枯雷爾氏菌致病性生物測(cè)定方法的研究[J]. 福建農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2011,26(5):804-807.

    [13]張 通,盧文玉,田 春. 絮凝劑產(chǎn)生菌培養(yǎng)基的研究[J]. 應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報(bào),2003,9(1):67-70.

    [14]王曉丹,閔凡祥,郭 梅,等. 馬鈴薯青枯病菌生化型研究及菌株接種方法的比較[J]. 中國(guó)馬鈴薯,2010,24(1):38-40.

    [15]何昭陽(yáng),胡桂學(xué),王春鳳. 動(dòng)物免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)[M]. 長(zhǎng)春:吉林科技出版社,2003.

    [16] 崔朝宇,張超群,周澤科,等. 煙草青枯病菌分離株RSXJ-1的培養(yǎng)性狀及其生物型鑒定[J]. 江西植保,2012,35(2):153-156.

    [17]歐陽(yáng)玉祝,唐賽燕,秦海瓊,等. 海金沙提取物體外抑茵性能研究[J]. 中國(guó)野生植物資源,2009,28(3):41-44.

    [18]商勝華,陸 寧,陳慶園,等. 大蒜提取液對(duì)煙草黑脛病和青枯病的防治效果初探[J]. 貴州農(nóng)業(yè)科學(xué),2009,37(10):94-96.

    [19]李 麗. 紫莖澤蘭對(duì)植物病原菌抑制作用的研究[D]. 昆明:云南師范大學(xué),2008:56-58.

    [20]薄采穎,許小芬,鄭光耀,等. 馬尾松針葉二萜酸對(duì)植物病原菌抑制作用的研究[J]. 林產(chǎn)化學(xué)與工業(yè),2011,31(1):73-76.

    [21]朱戰(zhàn)波,劉 宇,賈永全,等. 二次正交旋轉(zhuǎn)組合設(shè)計(jì)優(yōu)化羅伊乳桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基[J]. 中國(guó)生物制品學(xué)雜志,2008,21(6):527-530.

    [22]莫美華,龐雄飛. 二次正交旋轉(zhuǎn)回歸設(shè)計(jì)在小菜蛾蛾飼料配方篩選中的應(yīng)用[J]. 生態(tài)學(xué)報(bào),2007,27(7):2935-2941.

    [23]楊 松,周蓓蓓,程江華,等. 二次正交旋轉(zhuǎn)組合設(shè)計(jì)優(yōu)化藥?;ㄇ嗨靥崛」に嘯J]. 生態(tài)學(xué)報(bào),2012,33(8):33-38.

    [24]毛勝鳳,張立欽,張 健,等. 馬尾松葉提取物的抗菌活性[J]. 浙江林學(xué)院學(xué)報(bào),2008,25(3):359-362.

    [25]劉均玲. 防治番茄灰霉病植物提取物的篩選與研究[D]. 保定:河北農(nóng)業(yè)大學(xué),2003.

    [26]王慶利,彭 健. 吐溫80的安全性研究進(jìn)展[J]. 毒理學(xué)雜志,2006,20(4):262-264.

    [27]劉躍群. 生物柴油作為莖葉處理除草劑乳油加工溶劑的應(yīng)用潛力研究[D]. 泰安:山東農(nóng)業(yè)大學(xué),2009:56-57.

    [28]劉天學(xué),紀(jì)秀娥. 影響復(fù)配農(nóng)藥乳油穩(wěn)定性因素初探[J]. 河南化工,1998(9):35-36.

    [29]蔡亞?wèn)|. 蒲公英、龍葵的抑菌活性及其加工制劑的研究[D]. 蘭州:甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué),2003:15-16.

    猜你喜歡
    青枯病
    新型生防菌組合防治煙草青枯病田間藥效評(píng)價(jià)
    煙稻輪作對(duì)煙草根際土壤微生物區(qū)系及青枯病發(fā)生的影響
    玉米青枯病的防治技術(shù)
    溫度、濕度、接菌量及pH對(duì)煙草青枯病菌致病力的影響
    淺談茄子青枯病防治技術(shù)
    XQ生防菌劑防治煙草青枯病藥效試驗(yàn)初報(bào)
    三種堆肥對(duì)番茄生長(zhǎng)及青枯病防治效果的影響
    BiologGENⅢ微孔板在煙草青枯病、黑脛病生防細(xì)菌鑒定中的應(yīng)用
    辣椒青枯病防治技術(shù)
    湖北植保(2012年5期)2012-04-10 01:51:49
    煙草抗青枯病育種研究進(jìn)展
    欧美激情高清一区二区三区| 免费在线观看日本一区| 久热爱精品视频在线9| 在线观看人妻少妇| 国产精品.久久久| 桃红色精品国产亚洲av| 成人影院久久| 亚洲五月色婷婷综合| 亚洲欧美色中文字幕在线| 一个人免费在线观看的高清视频| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 亚洲 欧美一区二区三区| 国产精品亚洲一级av第二区| av视频免费观看在线观看| 在线看a的网站| 女人精品久久久久毛片| 色播在线永久视频| 亚洲伊人色综图| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 91国产中文字幕| 在线播放国产精品三级| 一区二区三区激情视频| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 一级片免费观看大全| 亚洲免费av在线视频| 91精品国产国语对白视频| 精品一区二区三区视频在线观看免费 | 日韩三级视频一区二区三区| 久久香蕉激情| 精品少妇内射三级| 亚洲少妇的诱惑av| 精品免费久久久久久久清纯 | 99九九在线精品视频| 午夜精品国产一区二区电影| 久久久水蜜桃国产精品网| 久久九九热精品免费| 国产片内射在线| 欧美日韩精品网址| 国产91精品成人一区二区三区 | 久久久久久人人人人人| 99在线人妻在线中文字幕 | 国产成人av激情在线播放| 老司机在亚洲福利影院| 亚洲视频免费观看视频| 久久精品91无色码中文字幕| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 老司机在亚洲福利影院| 免费在线观看完整版高清| 中国美女看黄片| 高清av免费在线| 欧美国产精品va在线观看不卡| 国产一区有黄有色的免费视频| 成在线人永久免费视频| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 一级毛片精品| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 极品教师在线免费播放| 中文字幕色久视频| 欧美精品亚洲一区二区| www.自偷自拍.com| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 曰老女人黄片| 在线播放国产精品三级| 亚洲精品av麻豆狂野| 精品国产乱子伦一区二区三区| 国精品久久久久久国模美| 亚洲精品在线美女| 一二三四社区在线视频社区8| 国产黄频视频在线观看| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 三上悠亚av全集在线观看| 日本黄色日本黄色录像| 99热网站在线观看| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 午夜福利欧美成人| 国产精品 国内视频| 欧美中文综合在线视频| 丰满饥渴人妻一区二区三| 国产精品免费一区二区三区在线 | 操出白浆在线播放| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 在线观看一区二区三区激情| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 国产精品 欧美亚洲| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 人妻 亚洲 视频| 最新的欧美精品一区二区| 91大片在线观看| 亚洲成人免费电影在线观看| 女人久久www免费人成看片| bbb黄色大片| 99久久99久久久精品蜜桃| 涩涩av久久男人的天堂| 色精品久久人妻99蜜桃| 国产片内射在线| 丰满饥渴人妻一区二区三| 91精品三级在线观看| av福利片在线| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 国产真人三级小视频在线观看| 亚洲av欧美aⅴ国产| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 9热在线视频观看99| 欧美午夜高清在线| 视频区图区小说| 精品国产国语对白av| 午夜福利视频在线观看免费| 久久精品成人免费网站| 黑人欧美特级aaaaaa片| 韩国精品一区二区三区| 夜夜爽天天搞| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 老汉色∧v一级毛片| 99re6热这里在线精品视频| 日本av免费视频播放| 欧美大码av| 另类精品久久| 中文字幕人妻丝袜制服| 国产精品久久电影中文字幕 | 嫩草影视91久久| 国产精品自产拍在线观看55亚洲 | 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 精品一品国产午夜福利视频| 久久香蕉激情| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 精品人妻在线不人妻| 亚洲一区二区三区欧美精品| 亚洲成人手机| 少妇精品久久久久久久| 成年人黄色毛片网站| 国产免费视频播放在线视频| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 母亲3免费完整高清在线观看| 精品第一国产精品| 动漫黄色视频在线观看| 国产精品二区激情视频| 成人国产av品久久久| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 天天影视国产精品| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 美女国产高潮福利片在线看| 女人久久www免费人成看片| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 一个人免费看片子| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 久久毛片免费看一区二区三区| 欧美精品一区二区免费开放| 精品卡一卡二卡四卡免费| 亚洲精品在线观看二区| 十八禁人妻一区二区| 一级毛片精品| 久久久精品免费免费高清| 男人操女人黄网站| 国产老妇伦熟女老妇高清| 黄片小视频在线播放| 一区二区av电影网| 欧美精品亚洲一区二区| 国产精品自产拍在线观看55亚洲 | 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 757午夜福利合集在线观看| 一进一出好大好爽视频| 久久这里只有精品19| 激情在线观看视频在线高清 | 美女主播在线视频| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 国产一区二区三区在线臀色熟女 | 亚洲成国产人片在线观看| 成年版毛片免费区| 成人亚洲精品一区在线观看| 久久人妻av系列| 久久人人97超碰香蕉20202| 久久人妻熟女aⅴ| 91大片在线观看| www.自偷自拍.com| 在线观看免费日韩欧美大片| 老司机亚洲免费影院| 亚洲精品一二三| 99精品久久久久人妻精品| 久久午夜综合久久蜜桃| 国产精品1区2区在线观看. | 最近最新中文字幕大全免费视频| av国产精品久久久久影院| 波多野结衣av一区二区av| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 亚洲av片天天在线观看| 亚洲,欧美精品.| 亚洲国产av新网站| 丰满饥渴人妻一区二区三| 极品教师在线免费播放| 久久ye,这里只有精品| 久久久久久久国产电影| 麻豆av在线久日| 一区二区三区国产精品乱码| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 91国产中文字幕| 久久热在线av| 岛国在线观看网站| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 久久久久久免费高清国产稀缺| 在线永久观看黄色视频| 美女高潮到喷水免费观看| 久久精品成人免费网站| 精品国产国语对白av| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 首页视频小说图片口味搜索| 少妇粗大呻吟视频| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| av电影中文网址| 欧美激情 高清一区二区三区| 亚洲人成伊人成综合网2020| 另类精品久久| 男女边摸边吃奶| 午夜日韩欧美国产| 亚洲久久久国产精品| 成年女人毛片免费观看观看9 | 久久久久久人人人人人| 国产成人影院久久av| 黑人操中国人逼视频| 国产欧美日韩一区二区三| 色婷婷av一区二区三区视频| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 免费观看人在逋| 久久人人爽av亚洲精品天堂| avwww免费| 国产极品粉嫩免费观看在线| 成人特级黄色片久久久久久久 | 中文字幕高清在线视频| 精品乱码久久久久久99久播| 国产精品久久电影中文字幕 | 久热这里只有精品99| 无人区码免费观看不卡 | 三级毛片av免费| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 欧美成人午夜精品| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 精品国产国语对白av| 亚洲,欧美精品.| 亚洲国产欧美在线一区| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 精品熟女少妇八av免费久了| 亚洲中文字幕日韩| 久久久久久久精品吃奶| 一本久久精品| 国产免费现黄频在线看| 脱女人内裤的视频| 亚洲,欧美精品.| 日韩中文字幕视频在线看片| 久久精品国产a三级三级三级| 最新的欧美精品一区二区| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 日本黄色日本黄色录像| 精品第一国产精品| 亚洲第一av免费看| 日本vs欧美在线观看视频| 女同久久另类99精品国产91| 久久久国产精品麻豆| 99久久国产精品久久久| 在线观看舔阴道视频| 老熟女久久久| 亚洲九九香蕉| 美女扒开内裤让男人捅视频| 久久国产精品影院| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 日韩有码中文字幕| 咕卡用的链子| 国产又爽黄色视频| 亚洲国产欧美一区二区综合| 久久国产精品人妻蜜桃| 中文字幕制服av| 免费高清在线观看日韩| 久久久久视频综合| 少妇 在线观看| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 亚洲伊人久久精品综合| 水蜜桃什么品种好| 18禁国产床啪视频网站| 国产欧美日韩一区二区精品| 一级毛片精品| 亚洲美女黄片视频| 欧美在线一区亚洲| 久久精品成人免费网站| av又黄又爽大尺度在线免费看| 男人舔女人的私密视频| 午夜精品久久久久久毛片777| 亚洲专区国产一区二区| 免费观看av网站的网址| 一本久久精品| 亚洲性夜色夜夜综合| 精品一区二区三区av网在线观看 | 亚洲av欧美aⅴ国产| 亚洲 欧美一区二区三区| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 99久久国产精品久久久| 亚洲精品国产区一区二| 成人手机av| 精品福利观看| 电影成人av| 欧美国产精品va在线观看不卡| 国产一区二区三区在线臀色熟女 | 女人精品久久久久毛片| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 日韩有码中文字幕| 日韩免费av在线播放| 中文欧美无线码| 色婷婷久久久亚洲欧美| 黄频高清免费视频| 欧美性长视频在线观看| 一夜夜www| 99久久99久久久精品蜜桃| 亚洲久久久国产精品| 三级毛片av免费| 亚洲专区字幕在线| 亚洲第一青青草原| 两人在一起打扑克的视频| 亚洲欧美一区二区三区久久| 欧美在线黄色| 免费看十八禁软件| 精品少妇久久久久久888优播| 久久人人97超碰香蕉20202| 亚洲熟妇熟女久久| 无人区码免费观看不卡 | 国产精品一区二区在线观看99| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 在线观看www视频免费| 亚洲成人国产一区在线观看| 久久性视频一级片| 真人做人爱边吃奶动态| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 91大片在线观看| 在线永久观看黄色视频| 久久午夜综合久久蜜桃| 日韩欧美三级三区| 久久久久久久久免费视频了| 男女床上黄色一级片免费看| 怎么达到女性高潮| 日本精品一区二区三区蜜桃| 黄色怎么调成土黄色| 午夜福利,免费看| 国产高清国产精品国产三级| 久久久精品免费免费高清| 大片电影免费在线观看免费| 成年动漫av网址| 777米奇影视久久| 波多野结衣av一区二区av| av片东京热男人的天堂| 久久久国产欧美日韩av| 婷婷丁香在线五月| 日韩精品免费视频一区二区三区| 亚洲国产中文字幕在线视频| 国产免费av片在线观看野外av| 免费不卡黄色视频| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 人人澡人人妻人| 涩涩av久久男人的天堂| 狂野欧美激情性xxxx| 亚洲美女黄片视频| 婷婷丁香在线五月| 国产主播在线观看一区二区| 国产人伦9x9x在线观看| 日韩欧美三级三区| 脱女人内裤的视频| 成人免费观看视频高清| 国产成人免费无遮挡视频| 国产一区二区激情短视频| 一级毛片精品| 黑丝袜美女国产一区| 久久精品国产综合久久久| 90打野战视频偷拍视频| 91九色精品人成在线观看| 天天添夜夜摸| 午夜福利影视在线免费观看| 久久精品国产亚洲av高清一级| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 国产成人精品久久二区二区91| 久久久久网色| 亚洲一区二区三区欧美精品| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 成人手机av| 欧美日韩黄片免| tocl精华| www.自偷自拍.com| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 丝袜喷水一区| 一级片'在线观看视频| 美女午夜性视频免费| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 曰老女人黄片| 又大又爽又粗| 黄色 视频免费看| 99香蕉大伊视频| 亚洲 国产 在线| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 午夜福利视频在线观看免费| 亚洲avbb在线观看| 亚洲成人国产一区在线观看| 国产99久久九九免费精品| 国产午夜精品久久久久久| 美女福利国产在线| 日韩欧美免费精品| 下体分泌物呈黄色| 这个男人来自地球电影免费观看| 久久婷婷成人综合色麻豆| 亚洲人成电影免费在线| 国产日韩欧美亚洲二区| 成人三级做爰电影| 宅男免费午夜| 一级毛片精品| 午夜福利,免费看| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 日韩一区二区三区影片| 亚洲七黄色美女视频| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 国产av又大| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 国产免费现黄频在线看| 久久 成人 亚洲| 国产一区二区三区综合在线观看| 一级毛片电影观看| 国产男靠女视频免费网站| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 午夜日韩欧美国产| 深夜精品福利| 免费av中文字幕在线| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 操出白浆在线播放| 丰满饥渴人妻一区二区三| 欧美在线一区亚洲| 91九色精品人成在线观看| 在线天堂中文资源库| 最近最新中文字幕大全电影3 | 人人澡人人妻人| 一区二区日韩欧美中文字幕| 中文字幕色久视频| 精品人妻1区二区| 欧美日韩福利视频一区二区| 天堂俺去俺来也www色官网| 国产福利在线免费观看视频| 亚洲熟女毛片儿| av福利片在线| 欧美av亚洲av综合av国产av| 国产高清videossex| 久久久久精品人妻al黑| 香蕉久久夜色| 午夜福利在线观看吧| 少妇粗大呻吟视频| 99久久国产精品久久久| 欧美在线黄色| 欧美久久黑人一区二区| 国产一区二区三区在线臀色熟女 | 精品国产国语对白av| 最近最新中文字幕大全免费视频| 亚洲成人免费电影在线观看| bbb黄色大片| 欧美精品高潮呻吟av久久| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 国产精品二区激情视频| 咕卡用的链子| 午夜福利在线观看吧| 久久婷婷成人综合色麻豆| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 精品一区二区三卡| 淫妇啪啪啪对白视频| 成人免费观看视频高清| 岛国在线观看网站| 日本av免费视频播放| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 大码成人一级视频| 黄片小视频在线播放| 美女福利国产在线| 69av精品久久久久久 | 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 美女午夜性视频免费| 久久国产精品人妻蜜桃| 久久国产精品大桥未久av| 激情在线观看视频在线高清 | 看免费av毛片| 久久人妻熟女aⅴ| 欧美成人午夜精品| 亚洲国产av影院在线观看| 精品视频人人做人人爽| 国产99久久九九免费精品| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 精品第一国产精品| 大陆偷拍与自拍| 国产精品1区2区在线观看. | 亚洲国产中文字幕在线视频| 捣出白浆h1v1| 欧美性长视频在线观看| 国产色视频综合| 十八禁高潮呻吟视频| 欧美中文综合在线视频| 国产欧美亚洲国产| 欧美激情久久久久久爽电影 | 亚洲美女黄片视频| 国产精品一区二区在线不卡| 露出奶头的视频| 精品福利观看| 日本一区二区免费在线视频| 国产在线观看jvid| 黄色a级毛片大全视频| 国产精品av久久久久免费| 国产精品99久久99久久久不卡| 午夜精品久久久久久毛片777| 丝袜喷水一区| 淫妇啪啪啪对白视频| 久久中文字幕一级| 一区二区三区激情视频| 欧美黄色淫秽网站| 亚洲男人天堂网一区| 香蕉久久夜色| 久久性视频一级片| 波多野结衣av一区二区av| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 亚洲人成77777在线视频| 九色亚洲精品在线播放| 女警被强在线播放| 在线观看免费视频网站a站| 99精品在免费线老司机午夜| 狠狠狠狠99中文字幕| 超碰97精品在线观看| 欧美黄色淫秽网站| 男女床上黄色一级片免费看| 不卡av一区二区三区| 成年人黄色毛片网站| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 高潮久久久久久久久久久不卡| 欧美激情高清一区二区三区| 在线观看www视频免费| 国产精品亚洲av一区麻豆| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 高潮久久久久久久久久久不卡| 性色av乱码一区二区三区2| 妹子高潮喷水视频| 少妇的丰满在线观看| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 欧美性长视频在线观看| 69精品国产乱码久久久| 成年动漫av网址| 国产免费视频播放在线视频| 一级,二级,三级黄色视频| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 色尼玛亚洲综合影院| 国产成人精品在线电影| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 亚洲国产av新网站| 1024香蕉在线观看| 欧美乱码精品一区二区三区| 青草久久国产| 欧美av亚洲av综合av国产av| 一级毛片女人18水好多| 天天操日日干夜夜撸| 亚洲 国产 在线| 成人18禁在线播放| 日韩视频一区二区在线观看| 日本黄色视频三级网站网址 | av不卡在线播放| 国产熟女午夜一区二区三区| 国产xxxxx性猛交| 日日爽夜夜爽网站| 久久精品91无色码中文字幕| 男女午夜视频在线观看| 91老司机精品| 久久99一区二区三区| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 免费av中文字幕在线| 国产精品自产拍在线观看55亚洲 | 高清视频免费观看一区二区| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| h视频一区二区三区| 亚洲成人手机| 国产精品成人在线| 精品国产一区二区三区四区第35| 黄色毛片三级朝国网站| 1024视频免费在线观看| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 久久午夜综合久久蜜桃| 男女之事视频高清在线观看| 老汉色∧v一级毛片| 午夜成年电影在线免费观看| 99精国产麻豆久久婷婷| 999久久久精品免费观看国产| 久久久国产一区二区| 色94色欧美一区二区| 日韩中文字幕欧美一区二区| aaaaa片日本免费| 人妻一区二区av| 美女国产高潮福利片在线看| 国产一区二区在线观看av| 高清视频免费观看一区二区| 手机成人av网站| 日本vs欧美在线观看视频| 99国产精品免费福利视频| 老司机在亚洲福利影院| 夜夜夜夜夜久久久久| 国产精品二区激情视频| 午夜激情av网站| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 欧美日本中文国产一区发布| 在线观看66精品国产| 首页视频小说图片口味搜索| 亚洲精品粉嫩美女一区| 国产视频一区二区在线看| 少妇的丰满在线观看| 亚洲中文av在线| 天堂俺去俺来也www色官网| 高清av免费在线| 极品教师在线免费播放| 飞空精品影院首页| 久久ye,这里只有精品| 满18在线观看网站|