Shh、Gli1在宮頸癌中的表達(dá)與應(yīng)用意義

李美琴，裴圣林

（廣西醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院，廣西 南寧 530021）

Shh、Gli1在宮頸癌中的表達(dá)與應(yīng)用意義

李美琴，裴圣林

（廣西醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院，廣西 南寧 530021）

目的了解Shh、Gli1在宮頸癌中的表達(dá)情況與應(yīng)用價值。方法用免疫組化S-P法分別檢測子宮頸鱗狀細(xì)胞癌（SCC）、子宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變（CIN）與正常宮頸組織（NC）里的Shh與Gli1蛋白表達(dá)情況。結(jié)果Shh、Gli1在宮頸組織中的表達(dá)隨腫瘤進(jìn)展而增強(qiáng)，且與疾病分化程度、淋巴結(jié)有無轉(zhuǎn)移、臨床分期等有顯著相關(guān)性。結(jié)論宮頸癌中Shh蛋白高度表達(dá)上調(diào)下游轉(zhuǎn)錄因子Glil蛋白，而Hedgehog信號通路的激活可能參與到宮頸癌的發(fā)生發(fā)展，定期檢測更利于宮頸癌的早期診斷。

Shh；Gli1；宮頸癌；表達(dá)

神經(jīng)膠質(zhì)瘤相關(guān)基因同源蛋白（GLI）為Hedgehog信號通路末端的轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，有一定的轉(zhuǎn)錄激活功能，GLI蛋白與Shh基因緊密相關(guān)[1]。本文則通過免疫組織化學(xué)法對SCC、CIN與NC中的Shh基因與Gli1蛋白表達(dá)情況進(jìn)行研究，力求為宮頸癌的診斷與治療提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

從2012年3月～2016年7月廣西醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院行婦科手術(shù)切除的子宮頸鱗狀細(xì)胞癌組織存檔蠟塊標(biāo)本62例，宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）35例。所有病患在參與此次調(diào)查前均未接受過放、化療與免疫治療，均經(jīng)宮頸癌HE病理切片確診。另選取同期19例因良性病變行子宮切除術(shù)治療患者的正常宮頸上皮檢查結(jié)果作對照。

1.2 免疫組化方法[2]

依靠S-P法，兔抗人多克隆抗體Shh與Gli1都從美國Santa Crnz公司購得，濃度依次是1:100、1:150；DAB顯色劑由北京中杉生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)，免疫組化流程根據(jù)試劑盒說明完成，用PBS替代一抗進(jìn)行陰性對照。

1.3 評定標(biāo)準(zhǔn)[3]

Shh蛋白主要定位于細(xì)胞質(zhì)，而Gli1蛋白陽性表達(dá)在細(xì)胞質(zhì)與細(xì)胞核中，可見棕褐色值棕褐色顆粒即代表染色陽性。任意選取5個高倍視野，共包括500個細(xì)胞（每個高倍視野100個細(xì)胞）進(jìn)行評定。

2 結(jié) 果

2.1 Shh與Gli1在不同宮頸組織里的表達(dá)

19例正常組織中Shh表達(dá)（-）16例、（+）3例，陽性率15.7%，Gli1表達(dá)（-）15例、（+）4例、陽性率21%；35例宮頸上皮內(nèi)瘤變中Shh表達(dá)（-）21例、（+）10例、（++）3例、（+++）1例，陽性率28.5%，Gli1表達(dá)（-）18例、（+）12例、（++）2例、（+++）3例，陽性率28.5%；62例宮頸癌組織中Shh表達(dá)（-）19例、（+）22例、（++）10例、（+++）11例，陽性率35.4%，Gli1表達(dá)（-）18例、（+）20例、（++）12例、（+++）12例，陽性率32.2%，可看出Shh與Gli1于正常宮頸組織沒有表達(dá)或弱表達(dá)，且隨腫瘤發(fā)生與進(jìn)展，表達(dá)增強(qiáng)。

2.2 Shh與Gli1表達(dá)和宮頸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系

從下表1中可看出，Shh與Gli1表達(dá)和宮頸癌病患年齡無關(guān)，而與疾病分化程度、淋巴結(jié)有無轉(zhuǎn)移、臨床分期等有顯著相關(guān)性，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

表1 Shh與Gli1表達(dá)和宮頸癌臨床病理參數(shù)關(guān)系分析

3 討 論

宮頸癌的出現(xiàn)為一個多因素協(xié)同，多階段發(fā)生的復(fù)雜性過程，還屬于細(xì)胞增殖分化和細(xì)胞凋亡平衡失調(diào)的過程[4]。Shh基因?qū)儆谝环N高度保守的分泌性糖蛋白，是和生長發(fā)育相關(guān)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)因子，Shh基因與Gli蛋白表達(dá)與宮頸癌的發(fā)生與發(fā)展相關(guān)[5]。本次調(diào)查中，我們發(fā)現(xiàn)正常宮頸組織內(nèi)的Shh基因呈低表達(dá)，不過在癌組織內(nèi)的表達(dá)則表現(xiàn)出異常高表達(dá)。不過Shh基因的表達(dá)和病患年齡等無關(guān)聯(lián)性，卻和腫瘤分化程度、臨床分期與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。其中隨著腫瘤分化程度的下降，表達(dá)升高，表明Shh是宮頸癌上調(diào)的表達(dá)蛋白，表達(dá)升高的現(xiàn)象極可能是某種機(jī)制被激活而導(dǎo)致了宮頸癌的發(fā)生。而Shh合成后與細(xì)胞表層的特異性受體PTCH結(jié)合，若Hh蛋白和PTCH結(jié)合，SMO則通過細(xì)胞中相應(yīng)的信號傳導(dǎo)的瀑布式反應(yīng)，來達(dá)到激活Gli家族轉(zhuǎn)錄因子的目的，以增強(qiáng)或限制Hh信號靶基因轉(zhuǎn)錄。所以通過探究我們認(rèn)為Shh過度表達(dá)使得下游轉(zhuǎn)錄因子Gli表達(dá)升高，以致于Hh信道傳導(dǎo)通路被激活。而這也就表明Hh信道傳導(dǎo)通路中SMO受體治療可能會改善宮頸癌的預(yù)后。

[1] 陳 群.宮頸癌的早期篩查[J].中外醫(yī)學(xué)研究,2011,09(24):162-164.

[2] 篩查——宮頸癌的防治“捷徑”[J].抗癌,2012,24(1):4-7.

[3] 錢小萍,范水娟,姚 慧.15881名農(nóng)村婦女宮頸癌篩查結(jié)果[J].浙江預(yù)防醫(yī)學(xué),2014,(6):627-628.

[4] 魏麗惠.宮頸癌篩查結(jié)果的規(guī)范化處理[J].醫(yī)師在線,2017,7(22):12-13.

[5] 李 珍.3222例宮頸癌篩查分析[J].中國老年保健醫(yī)學(xué),2016,14(1):68-70.

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ISSN.2095-8803.2017.27.063.02