潰瘍性結(jié)腸炎不同中醫(yī)證型血清細(xì)胞因子相關(guān)研究

陳 亮，楊 芳，景 姍

（南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬南通市中醫(yī)院脾胃病科，江蘇 南通 226001）

論 著

潰瘍性結(jié)腸炎不同中醫(yī)證型血清細(xì)胞因子相關(guān)研究

陳 亮，楊 芳，景 姍

（南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬南通市中醫(yī)院脾胃病科，江蘇 南通 226001）

R256.347.462

B

1004-2814（2017）12-1348-03

南通市衛(wèi)計(jì)委青年基金（WQ2014057）

景 姍

目的：觀察潰瘍性結(jié)腸炎不同中醫(yī)證型血清中細(xì)胞因子的變化，探討其內(nèi)在相關(guān)性。方法： 77例不同中醫(yī)證型潰瘍性結(jié)腸炎辨證分型為大腸濕熱證18例，脾虛濕熱證17例，肝郁脾虛證20例，脾腎陽(yáng)虛證12例，寒熱錯(cuò)雜證10例，正常組20例，觀察血沉（ESR）、疾病活動(dòng)指數(shù)（DAI）的變化，酶聯(lián)免疫法（ELISA）檢測(cè)血清血管活性腸肽（VIP）、表皮生長(zhǎng)因子（EGF）、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）的水平。結(jié)果：與正常組比較，各證型組血沉、DAI均升高（P＜0.05）；血清中VIP在大腸濕熱證、脾腎陽(yáng)虛證中均降低（P＜0.05），脾虛濕熱證、寒熱錯(cuò)雜證升高（P＜0.05）；血清EGF、VEGF在各組均升高（P＜0.05），以大腸濕熱證、脾虛濕熱證升高顯著。結(jié)論：潰瘍性結(jié)腸炎不同中醫(yī)分型與VIP、EGF、VEGF的表達(dá)具有一定相關(guān)性。

潰瘍性結(jié)腸炎；中醫(yī)證型；VIP；EGF；VEGF

Objective：To observe the changes of cytokine in serum of different TCM syndromes of ulcerative colitis and study their inherent relevance. Method: 77 cases of different TCM syndromes of ulcerative colitis patients were divided into 18 cases of large intestine damp-heat syndrome group, 17 cases of spleen- deficiency damp-heat syndrome group, 20 cases of liverstagnation group and spleen-deficiency syndrome group, 12 cases of Yang deficiency of spleen and kidney group, 10 cases of cold-heat complex syndrome group and 20 cases of normal group. The changes of ESR and DAI were observed. The level of VIP,EGF and VEGF was examined by ELISA method. Result: Compared with that of the normal group, the ESR and DAI of the other groups all increased （P＜0.05）. VIP in serum of large intestine damp-heat syndrome group and Yang deficiency of spleen and kidney group decreased（P＜0.05）while that of spleen- deficiency damp-heat syndrome group and cold-heat complex syndrome group increased （P＜0.05）. EGF and VEGF in serum of each group increased （P＜0.05）. Among them, the increase of large intestine damp-heat syndrome group and spleen- deficiency damp-heat syndrome group was the most significant. Conclusion:Different TCM syndromes of ulcerative colitis have certain relevance to the expression of VIP, EGF and VEGF.

ulcerative colitis；TCM syndrome；VIP; EGF；VEGF

潰瘍性結(jié)腸炎（UC）是腸道的慢性非特異性炎癥性疾病，是以侵及結(jié)腸黏膜且以潰瘍?yōu)橹鞯穆苑翘禺愋匝装Y性腸病［1］。本研究觀察血清中部分細(xì)胞因子在不同中醫(yī)證型中的表達(dá)變化，以期提高中醫(yī)證型分類的準(zhǔn)確性，進(jìn)一步建立更加完善的中醫(yī)療效評(píng)價(jià)體系。

1 臨床資料

共77例，均為2014年7月至2016年3月我院脾胃病科門(mén)診及住院部收治的不同中醫(yī)證型的潰瘍性結(jié)腸炎患者。大腸濕熱證18例，男10例、女8例，平均年齡（46.3±8.2）歲；脾虛濕熱證17例，男8例、女9例，平均年齡（47.1±9.3）歲；肝郁脾虛證20例，男10例、女10例，平均年齡（47.5±8.6）歲；脾腎陽(yáng)虛證12例，男5例、女7例，平均年齡（46.6±8.3）歲；寒熱錯(cuò)雜證10例，男6例、女4例，平均年齡（47.3±7.4）歲。疾病嚴(yán)重程度為輕度49例，中度28例。對(duì)照組為健康人群20例，男10例、女10例，平均年齡（46.9±7.3）歲。

中醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)：參照2009年中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)脾胃病分會(huì)“潰瘍性結(jié)腸炎中醫(yī)診療共識(shí)意見(jiàn)”［2］。辨證分為大腸濕熱證、脾虛濕熱證、肝郁脾虛證、脾腎陽(yáng)虛證、寒熱錯(cuò)雜證。

西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)：參照《對(duì)我國(guó)炎癥性腸病診斷治療規(guī)范的共識(shí)意見(jiàn)》（中華醫(yī)學(xué)會(huì)消化病學(xué)分會(huì)炎癥性腸病協(xié)作，2007年）［3］。

納入標(biāo)準(zhǔn)：參照“國(guó)家中醫(yī)藥管理局‘十一五’重點(diǎn)?？茀f(xié)作組久痢（潰瘍性結(jié)腸炎）診療方案”和2009年中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)脾胃病分會(huì)“潰瘍性結(jié)腸炎中醫(yī)診療共識(shí)意見(jiàn)”。①診斷明確，第1診斷為痢疾（潰瘍性結(jié)腸炎）；②患者愿意配合相關(guān)檢查；③疾病分度屬于輕、中度。

排除標(biāo)準(zhǔn)：合并嚴(yán)重心、肝、腎疾病或者妊娠、哺乳期，1個(gè)月內(nèi)已應(yīng)用磺胺吡啶類、糖皮質(zhì)激素類和免疫抑制劑治療，凝血功能異?；蛴谐鲅獌A向，伴有糖尿病、高血壓病、冠心病、自身免疫性疾病、腫瘤。

2 觀察方法

血沉（ESR）檢測(cè)：采集空腹血樣進(jìn)行全血檢測(cè)。

疾病活動(dòng)指數(shù)（DAI）：根據(jù)Sutherland疾病活動(dòng)指數(shù)表進(jìn)行計(jì)算評(píng)分。小于2分為癥狀緩解，3～5分為輕度活動(dòng)，6～10分為中度活動(dòng)，11～12分為重度活動(dòng)。

血清VIP、EGF、VEGF水平檢測(cè)：收集患者及健康人群清晨空腹的外周靜脈血5～6mL，2500r/min離心10min，分離血清，取其上清液，并置于-80℃冰箱中保存，ELISA法統(tǒng)一檢測(cè)（試劑盒均由深圳晶美生物工程公司提供）。

用SPSS19.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用（±s）表示、采用t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 檢 測(cè)

各組ESR及DAI比較見(jiàn)表1。

表1 各組ESR及DAI比較 （±s）

表1 各組ESR及DAI比較 （±s）

注：與對(duì)照組比較，*P＜0.05。

組別 例 ESR（mm/h） DAI（分）大腸濕熱證 18 16.24±6.32** 8.4±3.3**脾虛濕熱證 17 14.18±6.45** 6.0±3.1**肝郁脾虛證 20 11.82±4.23* 4.6±2.5**脾腎陽(yáng)虛證 12 10.10±3.24* 3.9±1.9*寒熱錯(cuò)雜證 10 11.44±4.87* 4.7±2.5*對(duì)照組 20 6.61±3.12* 1.4±0.6

各組EGF、VEGF、VIP指標(biāo)比較見(jiàn)表2。

表2 各組EGF、VEGF、VIP指標(biāo)比較 （ng/L，±s）

表2 各組EGF、VEGF、VIP指標(biāo)比較 （ng/L，±s）

注：與對(duì)照組比較，*P＜0.05；與大腸濕熱證比較，#P＜0.05；與脾虛濕熱證比較，△P＜0.05。

組別 例 EGF VEGF VIP大腸濕熱證 18 396.37±149.42* 579.67±157.94* 23.06±14.53*△脾虛濕熱證 17 248.18±115.18*# 437.23±127.46* 54.18±23.87*#肝郁脾虛證 20 83.95±63.89#△ 279.74±157.89#△ 33.8±24.24△脾腎陽(yáng)虛證 12 54.02±25.55#△ 220.93±78.34#△ 15.84±4.9*△寒熱錯(cuò)雜證 10 70±29.57#△ 236.82±74.01#△ 56.27±18.67*#對(duì)照組 20 36.84±11.34#△ 123.07±80.32#△ 39.97±12.93#△

4 討 論

潰瘍性結(jié)腸炎主要表現(xiàn)為腹痛、腹瀉、黏液膿血便、里急后重等癥狀，屬中醫(yī)“痢疾”。癥狀不典型者僅表現(xiàn)為腹瀉，大便次數(shù)多，糞質(zhì)清稀，屬中醫(yī)“泄瀉”范疇［4］。病因病機(jī)為濕熱或飲食所傷、情志不暢、勞倦過(guò)度致脾氣受損。濕從內(nèi)生，濕滯日久，多從熱化，濕熱熏蒸，壅滯腸間，傳導(dǎo)失司，與氣血相搏結(jié)，損傷血絡(luò)，氣凝血滯，血敗肉腐，內(nèi)潰成瘍，日久正虛邪戀。所以濕邪內(nèi)蘊(yùn)，氣血壅滯，脾氣虧虛乃發(fā)病的關(guān)鍵。濕邪內(nèi)蘊(yùn)為其標(biāo)實(shí)，脾氣虧虛為其本虛，二者互為因果［5］。致理因素較多，中醫(yī)證型各異。研究發(fā)現(xiàn)，大腸濕熱證、脾虛濕熱證ESR表達(dá)及DAI評(píng)分較其他證型高，證明主要致病因素是濕邪內(nèi)蘊(yùn)，郁而化熱。

EGF存在于很多組織中，特別是在胃腸道腸道組織中含量最高，EGF是一種有絲分裂刺激原，它可以促進(jìn)上皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等多種細(xì)胞的分裂增殖，同時(shí)可阻止氧化劑誘導(dǎo)的腸黏膜損傷或功能降低，對(duì)維持腸黏膜的完整性及其功能具有重要作用［6］。研究表明，UC患者在病理狀態(tài)下EGF會(huì)明顯升高，這是機(jī)體黏膜自身修復(fù)能力的體現(xiàn)，研究發(fā)現(xiàn)各證型組EGF均顯著升高，尤以大腸濕熱證與脾虛濕熱證明顯，可以推測(cè)兩證型在UC病情進(jìn)展中往往炎癥較明顯，反饋性地促進(jìn)腸黏膜的修復(fù)［7-8］。

VEGF早期亦稱作血管通透因子，是血管內(nèi)皮細(xì)胞特異性的肝素結(jié)合生長(zhǎng)因子，可在體內(nèi)誘導(dǎo)血管新生，能直接作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖，增加血管通透性［9］，其在正常的腸黏膜組織中幾乎不表達(dá)，而在活動(dòng)性UC組織的上皮細(xì)胞和炎性細(xì)胞中表達(dá)明顯增加，VEGF可能在UC中發(fā)揮著重要的調(diào)節(jié)作用［10］。本研究發(fā)現(xiàn)，UC血清中VEGF的表達(dá)顯著高于正常組，推測(cè)VEGF的表達(dá)增強(qiáng)可以加速血管及內(nèi)皮細(xì)胞的新生，微血栓大量形成，加重腸道黏膜損傷，進(jìn)一步加重病情。研究發(fā)現(xiàn)，大腸濕熱證與脾虛濕熱證VEGF升高尤其明顯，與病情及ESR、DAI的表達(dá)也表現(xiàn)出較強(qiáng)的一致性。

VIP在胃腸道主要分布在黏膜固有層和肌層神經(jīng)纖維，可作為神經(jīng)遞質(zhì)、免疫調(diào)節(jié)劑及炎癥介質(zhì)參與多種腸道生理及病理過(guò)程［11］。主要分布于黏膜固有層和肌層神經(jīng)纖維，有血管舒張、抗炎作用、免疫抑制、激素分泌和平滑肌舒張等作用。在抗原刺激作用下，VIP主要由Th2細(xì)胞產(chǎn)生，VIP促進(jìn)Th2型反應(yīng)，抑制Thl型反應(yīng)， UC患者的結(jié)直腸中VIP的含量與對(duì)照組比較明顯下降，而且VIP的下降與黏膜炎癥程度有相關(guān)性，表明VIP在黏膜含量的降低能夠反映局部的炎癥程度和疾病的活動(dòng)度［12］。本研究發(fā)現(xiàn)，大腸濕熱證、脾腎陽(yáng)虛證血清中VIP表達(dá)水平明顯低于其他各證，脾虛濕熱證、寒熱錯(cuò)雜證患者血清中VIP表達(dá)水平明顯高于其他各證，具有明顯的證型相關(guān)性，其表達(dá)的高低可能與正氣和外邪之間的平衡有關(guān)。

綜上所述，大腸濕熱證與脾虛濕熱證UC患者血清中EGF及VEGF 蛋白水平明顯高于其他組與正常人群，大腸濕熱證、脾腎陽(yáng)虛證血清中的VIP表達(dá)水平明顯低于其他各證，脾虛濕熱證血清中VIP表達(dá)水平明顯高于其他各證，具有明顯的相關(guān)性。檢測(cè)UC患者血清中VIP、EGF及VEGF的表達(dá)水平，可作為判斷UC病情輕重及臨床癥候類型的依據(jù)。VIP作為結(jié)腸活性腸肽在UC中具有雙重作用，炎癥刺激使其減少，但經(jīng)過(guò)正反饋表達(dá)又會(huì)明顯增加，而在正虛為主的患者血清中表達(dá)又明顯減少，故VIP表達(dá)水平可作為判斷正邪偏盛的一個(gè)指標(biāo)。

［1］景姍，王新月，楊雪，等.潰瘍性結(jié)腸炎大鼠肺、腸組織先天與后天免疫應(yīng)答的改變及中藥復(fù)方的干預(yù)作用［J］.中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志，2015，35（1）：63-70.

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［3］中華醫(yī)學(xué)會(huì)消化病學(xué)分會(huì)炎癥性腸病協(xié)作組.對(duì)我國(guó)炎癥性腸病診斷治療規(guī)范的共識(shí)意見(jiàn)［J］.中華內(nèi)科雜志，2008，47（1）：73-78.

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2017-08-12