卵巢癌相關(guān)lncRNA及其與microRNA相互作用

蘇薈文，馬玲

（蚌埠醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院腫瘤婦科，蚌埠 233004）

卵巢癌相關(guān)lncRNA及其與microRNA相互作用

蘇薈文，馬玲*

（蚌埠醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院腫瘤婦科，蚌埠 233004）

卵巢癌是婦科惡性腫瘤的首要致死原因。因?yàn)槁殉舶┌l(fā)生、發(fā)展無(wú)明顯癥狀，常常診斷時(shí)已處在難治愈的晚期階段，而卵巢癌普遍反復(fù)產(chǎn)生的耐藥性及病程中易復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移，使得治療效果往往很差，更敏感和更高效的診斷方法和治療生物靶點(diǎn)有待被發(fā)現(xiàn)。近年來(lái)，長(zhǎng)鏈非編碼RNA（lncRNAs）成為腫瘤學(xué)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)，在多種人類(lèi)惡性腫瘤中顯示出其可作為診斷和治療的新興生物標(biāo)志物的潛力。本文著眼于近年來(lái)一些與卵巢癌相關(guān)的lncRNA的研究，并分析這些lncRNA在卵巢癌發(fā)生和發(fā)展中扮演的角色，及其與相關(guān)microRNA在卵巢癌進(jìn)程中相互作用的情況，對(duì)相關(guān)研究進(jìn)展作一綜述。

卵巢癌；長(zhǎng)鏈非編碼RNA；微小RNA；腫瘤發(fā)生；腫瘤發(fā)展，生物標(biāo)志物

卵巢癌是婦科惡性腫瘤中最兇險(xiǎn)的疾病之一，發(fā)病率和死亡率均位居前列。2012年，全球共有238,700例新病例和151,900例死亡病例[1]。很多病例發(fā)現(xiàn)時(shí)已經(jīng)處在廣泛轉(zhuǎn)移的晚期，半數(shù)患者在16個(gè)月內(nèi)復(fù)發(fā)，5年總體生存率在50%以下[2]。由于卵巢癌的頑固耐藥使得傳統(tǒng)治療方法的效果十分有限，對(duì)疾病進(jìn)展的分子機(jī)制也缺乏了解，關(guān)于卵巢癌的基礎(chǔ)研究依然較為滯后。因此，卵巢腫瘤的發(fā)生機(jī)制、早期診斷、長(zhǎng)效控制以及相關(guān)的臨床研究還有待進(jìn)一步深入。

1 lncRNA概述

長(zhǎng)鏈非編碼RNA（long non-coding RNA，lncRNA）是近年來(lái)腫瘤學(xué)研究的熱點(diǎn)之一，它是由200到10萬(wàn)個(gè)核苷酸（nucleotide，nt）組成的非編碼RNA（non-coding RNA），可將lncRNA定義為“可用初級(jí)或剪接轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物形式執(zhí)行功能的RNA 分子，且不屬于任何已知的小RNA（如miRNA）或結(jié)構(gòu)RNA（如tRNA、rRNA）”[3]。lncRNA的生理、病理作用，尤其是與腫瘤的關(guān)系已經(jīng)越來(lái)越受重視[4]。lncRNA參與了多種生物學(xué)活動(dòng)，如基因轉(zhuǎn)錄、物質(zhì)合成、細(xì)胞凋亡等，涉及的作用模式各不相同[5]。Matthieu M等人對(duì)相關(guān)研究的總結(jié)發(fā)現(xiàn)lncRNA的主要有3種作用模式[6]：①在轉(zhuǎn)錄、翻譯等多水平調(diào)控基因和蛋白表達(dá)；②作為內(nèi)源性競(jìng)爭(zhēng)性RNA（ceRNA）影響某些RNA功能(分子阻斷劑)；③作為某些功能性miRNA的前體（precursor）。通過(guò)這些途徑，lncRNA發(fā)揮多種生物學(xué)功能，如基因印記、染色質(zhì)重塑、細(xì)胞周期調(diào)控、剪接調(diào)控、mRNA 降解和翻譯調(diào)控等[7]。

2 與卵巢癌相關(guān)的lncRNAs

現(xiàn)今發(fā)現(xiàn)的lncRNA種類(lèi)很多，只有少數(shù)被證實(shí)與卵巢癌的生物學(xué)功能相關(guān)。我們根據(jù)文獻(xiàn)，匯總了卵巢癌研究相關(guān)的lncRNA以及它們的基本信息，發(fā)現(xiàn)它們的表達(dá)量和功能角色各有不同（表1）。

2.1 在卵巢癌中表達(dá)上調(diào)的lncRNAs

H19：H19是一個(gè)與基因印跡相關(guān)的lncRNA，其基因位點(diǎn)位于胰島素樣生長(zhǎng)因子2(Insulin-like growth factor 2，IGF2) 基因，是該印跡基因的產(chǎn)物。H19的表達(dá)在正常情況下主要局限在胚胎組織和成人肌肉組織中[8]，主要影響胚胎發(fā)育[9]。正常表達(dá)的lncRNA H19具有抑癌功能，IGF2 印記基因的突變導(dǎo)致H19 高表達(dá)。研究發(fā)現(xiàn)，在卵巢腫瘤、結(jié)腸腫瘤、前列腺癌等腫瘤中存在異常的IGF2 /H19 位點(diǎn)[4]。另外，包括卵巢癌在內(nèi)的多種惡性腫瘤中H19的表達(dá)上調(diào)[10]。大量研究顯示H19是腫瘤發(fā)生的關(guān)鍵[11]，提示我們H19的異常表達(dá)可能在卵巢癌發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著重要作用。

Zhu等人[12]的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，H19在卵巢癌組織和細(xì)胞中均呈現(xiàn)高表達(dá)，而沉默H19則可抑制卵巢癌細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)其凋亡。另外，Zheng等人[13]的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，人卵巢癌A2780耐藥細(xì)胞株H19的表達(dá)量升高，而且在高級(jí)別漿液性卵巢癌中，高表達(dá)的H19通過(guò)促進(jìn)谷胱甘肽的代謝來(lái)促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞的鉑類(lèi)耐藥。最近，Medrzycki等[14]的研究顯示，組蛋白H1.3可以抑制H19的表達(dá)以及卵巢癌細(xì)胞的增殖。在人卵巢癌OVCAR3細(xì)胞中，H1.3的高表達(dá)可以降低細(xì)胞生長(zhǎng)率和集落形成，并抑制H19的表達(dá)，而敲低H1.3則有相反作用。

HOTAIR：全稱(chēng)為HOX基因轉(zhuǎn)錄的反義RNA（HOX transcription antisense RNA），是第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)具有反式作用的lncRNA，全長(zhǎng)6223bp[15]，它由人類(lèi)HOX基因家族四大成員之一的HOXC基因表達(dá)，位于12號(hào)染色體。PRC2（包括EZH2、SUZ12和EED）和LSD1組蛋白去甲基化酶復(fù)合體（包括LSD1、CoREST和REST）是參與多種生物活動(dòng)的重要蛋白酶，他們與相應(yīng)基因組位點(diǎn)結(jié)合可導(dǎo)致染色體關(guān)閉、靶基因沉默，而HOTAIR則是通過(guò)調(diào)節(jié)這兩者來(lái)發(fā)揮功能，它起到一個(gè)平臺(tái)RNA的作用，通過(guò)其5’和3’端區(qū)域分別與兩個(gè)復(fù)合體同時(shí)結(jié)合[16]，使兩者進(jìn)一步發(fā)揮相應(yīng)作用。

一項(xiàng)研究以68例漿液性卵巢癌組織及30例正常卵巢組織為對(duì)照，相比正常卵巢組織，SOC(serous ovarian cancer)組織中的HOTAIR表達(dá)水平異常高，且這種高表達(dá)與卵巢癌發(fā)生發(fā)展、轉(zhuǎn)移侵襲及預(yù)后均密切相關(guān)[17]，多因素分析發(fā)現(xiàn)HOTAIR高表達(dá)與FIGO分期晚（3～4期）及組織學(xué)分級(jí)高（G3）相關(guān)，顯示HOTAIR高表達(dá)是一個(gè)降低總生存率的獨(dú)立預(yù)后因子，這說(shuō)明在一定程度上HOTAIR可作為一個(gè)預(yù)側(cè)卵巢癌進(jìn)程的生物標(biāo)志因子。該研究還發(fā)現(xiàn)，在細(xì)胞水平HOTAIR通過(guò)延長(zhǎng)細(xì)胞周期和加速凋亡來(lái)促進(jìn)細(xì)胞增殖，該行為依靠調(diào)節(jié)細(xì)胞周期相關(guān)基因和凋亡相關(guān)基因的表達(dá)來(lái)實(shí)現(xiàn)，如Caspase-9、Caspase-3、周期蛋白E和BCL-2等，而敲低HOTAIR表達(dá)量可以抑制細(xì)胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）以及由EMT相關(guān)基因介導(dǎo)的致癌和侵襲作用，證明HOTAIR是一個(gè)潛在治療靶點(diǎn)。

Marsh DJ等人[18]研究發(fā)現(xiàn)在人卵巢癌A2780耐藥細(xì)胞株中，HOTAIR的表達(dá)量是正常細(xì)胞的5倍，從而降低了該細(xì)胞對(duì)鉑類(lèi)藥物的敏感性。Li J等人[19]的研究進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)HOTAIR高表達(dá)通過(guò)Wnt/β-catenin通路引起多種卵巢癌細(xì)胞株對(duì)鉑類(lèi)藥物耐藥。而Wu H等人[20]收集了100例中國(guó)卵巢癌患者組織標(biāo)本，除驗(yàn)證HOTAIR的表達(dá)上調(diào)，還對(duì)基因型進(jìn)行了分析，發(fā)現(xiàn)其中rs4759314和rs7958904兩型與中國(guó)女性關(guān)系密切，其中rs4759314的G等位基因和A等位基因差異顯著，而rs7958904的C等位基因相比于G等位基因則顯著降低了上皮性卵巢癌風(fēng)險(xiǎn)。這些結(jié)果顯示了HOTAIR可以進(jìn)行卵巢癌患病傾向的預(yù)測(cè)以及作為早期診斷生物標(biāo)志物的潛力。

HOST2：HOST2基因即人卵巢癌特異轉(zhuǎn)錄子2（human OC-specific transcript 2），在人卵巢癌組織呈現(xiàn)特異性表達(dá)，它位于10號(hào)染色體，全長(zhǎng)2.9kb，是人卵巢癌特異轉(zhuǎn)錄子之一，也是其中唯一一個(gè)沒(méi)有開(kāi)放閱讀框的轉(zhuǎn)錄子，它不編碼蛋白質(zhì)，產(chǎn)物為lncRNA HOST2[21]，多項(xiàng)研究已確認(rèn)該lncRNA在卵巢癌，尤其是上皮性卵巢癌中高表達(dá)，且顯示其對(duì)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖及侵襲均有明顯促進(jìn)作用。Rangel LB等人[21]的研究顯示，抑制了lncRNA HOST2的表達(dá)之后，卵巢癌OVCAR-3細(xì)胞的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移能力顯著減低。

NEAT1：即核富集轉(zhuǎn)錄體1（The nuclear paraspeckle assembly transcript 1），由多發(fā)性?xún)?nèi)分泌腺瘤綜合征1型基因位點(diǎn)轉(zhuǎn)錄，分別有長(zhǎng)約3.7kb的NEAT1_1和長(zhǎng)約23kb的NEAT1_2兩個(gè)亞型[22]。在最新的基因統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)中顯示，NEAT1是眾多有高度調(diào)節(jié)性的lncRNA之一[22,23]。NEAT1表達(dá)水平的改變?cè)诙喾N人類(lèi)惡性腫瘤均有相關(guān)報(bào)告，包括白血病、結(jié)腸癌、肝癌和神經(jīng)膠質(zhì)瘤等[23-26]，透露了NEAT1在人類(lèi)惡性腫瘤中扮演著重要功能角色。根據(jù)Chai Y等人[27]的研究發(fā)現(xiàn)，NEAT1在卵巢癌患者以及卵巢癌細(xì)胞株中均呈現(xiàn)高表達(dá)，經(jīng)分析這種異常表達(dá)與FIGO分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有相關(guān)性。NEAT1的異常表達(dá)促進(jìn)了OVCAR3細(xì)胞株的增殖和侵襲，敲低其表達(dá)量則扼制了這種效應(yīng)。該研究發(fā)現(xiàn)它通過(guò)與一個(gè)RNA結(jié)合蛋白－－HuR相結(jié)合，從而使自身穩(wěn)定存在來(lái)發(fā)揮作用，因此相較于正常人HuR在卵巢癌患者中也呈現(xiàn)出表達(dá)水平的升高。

2.2 在卵巢癌中表達(dá)下調(diào)的lncRNAs

XIST：即X失活特異轉(zhuǎn)錄子（X-inative specific transcript），位于X染色體失活中心（X-inativation center，XIC），對(duì)X染色體失活的啟動(dòng)十分關(guān)鍵[28]。根據(jù)Lyon 假說(shuō)，正常女性在發(fā)育過(guò)程中，兩條X染色體中的一條會(huì)異染色質(zhì)化以巴氏小體( Barr’s body) 的形式存在，繼而轉(zhuǎn)錄失活，使兩性在實(shí)際X染色體數(shù)目上保持相同，這個(gè)現(xiàn)象在遺傳學(xué)的計(jì)量補(bǔ)償效應(yīng)里非常關(guān)鍵，而XIST就是這個(gè)復(fù)雜過(guò)程中的主要作用因子。這一生物學(xué)過(guò)程在腫瘤發(fā)生中也具有重要意義，在一些惡性腫瘤尤其是女性生殖系統(tǒng)來(lái)源的，如宮頸癌，卵巢癌等腫瘤中，XIST表達(dá)量有異常改變[29]。

許多惡性腫瘤的研究中均有關(guān)于XIST發(fā)揮作用的描述，但是根據(jù)腫瘤類(lèi)型的不同其作用方式有所不同。有實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，XIST在細(xì)胞分化、增殖以及維持基因穩(wěn)定性等生物過(guò)程中都發(fā)揮重要作用[30]。在卵巢癌細(xì)胞系中，XIST的表達(dá)是降低的，同時(shí)伴有X失活的缺失[29]，在卵巢癌患者樣本中這種表達(dá)降低顯示與較短的無(wú)進(jìn)展生存期相關(guān)（r=0.653，p=0.001）。相似的實(shí)驗(yàn)顯示，在多種卵巢癌細(xì)胞株中，XIST的表達(dá)下降可以降低卵巢癌細(xì)胞對(duì)紫杉醇類(lèi)藥物的敏感性[31]，可能是紫杉醇對(duì)XIST的毒性作用，以及X特異抗性基因的出現(xiàn)和表達(dá)增加等，降低了XIST 的表達(dá)量，進(jìn)而促進(jìn)了卵巢癌的化療耐藥性。這些實(shí)驗(yàn)均表明了XIST在卵巢癌中本是抑癌作用，而其表達(dá)降低促進(jìn)了卵巢癌的發(fā)生發(fā)展。

MEG3：MEG3基因位于14號(hào)染色體，它是由母系遺傳的印記基因，稱(chēng)為母源性印記基因3（maternally expressed gene 3），其產(chǎn)物是不編碼蛋白質(zhì)的lncRNA MEG3[32]。研究指出MEG3在正常組織中均有表達(dá)，包括卵巢組織[33]，但在多種腫瘤組織和細(xì)胞中，MEG3的表達(dá)是降低甚至缺失的。Sheng X等人[34]的研究指出，相比于正常卵巢組織，MEG3表達(dá)量很低甚至不表達(dá)，而過(guò)表達(dá)的MEG3則抑制卵巢癌細(xì)胞的增殖并促進(jìn)其凋亡，該研究表明MEG3具有抑癌作用。

MEG3發(fā)揮作用的主要機(jī)制是在體內(nèi)缺乏p53時(shí)，誘導(dǎo)p53發(fā)揮其抑癌作用，從而抑制細(xì)胞增殖。綜合上述研究我們可以看出，若MEG3表達(dá)降低或缺失，可直接降低抑癌基因p53的表達(dá)，繼而使得卵巢癌發(fā)生發(fā)展。關(guān)于MEG3在卵巢癌中表達(dá)降低的現(xiàn)象是多種機(jī)制作用的結(jié)果，研究顯示MEG3基因的啟動(dòng)子甲基化可能是主要原因[34]。

3 卵巢癌相關(guān)lncRNAs與miRNAs之間的相互作用

雖然，越來(lái)越多的在卵巢癌中異常表達(dá)的lncRNA被發(fā)現(xiàn)，但其具體作用機(jī)制仍有許多未解之謎，近幾年出現(xiàn)許多旨在闡明lncRNA在卵巢癌中扮演的功能角色及作用信號(hào)通路的研究，其中有實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，一些lncRNA與miRNA的相互作用密切相關(guān)，我們通過(guò)總結(jié)，發(fā)現(xiàn)這些相互作用形成一個(gè)網(wǎng)絡(luò)，通過(guò)多種方式不同程度地促進(jìn)了卵巢癌的發(fā)生發(fā)展（圖1）。

表1 異常表達(dá)的卵巢癌相關(guān)lncRNATab.1 Dysregulated expression of lncRNAs in ovarian cancer

3.1 H19與相關(guān)miRNA的作用網(wǎng)絡(luò)

LncRNA H19通過(guò)多途徑與多種miRNA密切相關(guān)，形成一個(gè)復(fù)雜調(diào)控網(wǎng)絡(luò)[16]。首先發(fā)現(xiàn)與H19相互作用的是microRNA let-7家族。let-7家族多抑癌作用，而在卵巢癌中多數(shù)let-7家族成員的表達(dá)下調(diào)，且相比于正常卵巢癌細(xì)胞株，耐藥細(xì)胞株的let-7e的表達(dá)水平明顯降低[35]。實(shí)驗(yàn)表明，H19過(guò)表達(dá)與腫瘤的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移相關(guān)，涉及l(fā)et-7家族成員，H19在其中充當(dāng)了一個(gè)調(diào)節(jié)let-7家族的分子海綿，發(fā)揮“海綿效應(yīng)”——吸附 let-7家族成員。在一些let-7靶基因調(diào)控腫瘤轉(zhuǎn)移的模型中，H19扮演著let-7的ceRNA角色[36]，通過(guò)抑制let-7來(lái)調(diào)節(jié)let-7靶基因發(fā)揮作用，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移與浸潤(rùn)?？傊琀19可能通過(guò)抑制let-7家族來(lái)促進(jìn)卵巢癌的發(fā)生發(fā)展。

與H19相互作用更多的是其衍生物——miR-675。研究發(fā)現(xiàn)miR-675 作用的靶基因是對(duì)生長(zhǎng)、發(fā)育和腫瘤發(fā)生的關(guān)鍵基因，例如RB 和Ig fl r。miR-675在多種癌細(xì)胞株中均有致癌作用，最新報(bào)告顯示miR-675通過(guò)抑制一些靶基因來(lái)促進(jìn)腫瘤發(fā)生發(fā)展，包括肝細(xì)胞癌的Twist1基因[37]，胃癌的RUNX1基因[38]。另外，miR-675也發(fā)揮著促癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移效應(yīng)，它通過(guò)與鈣粘素13靶向結(jié)合來(lái)促進(jìn)角質(zhì)細(xì)胞瘤的浸潤(rùn)[39]。而在卵巢癌中，一項(xiàng)研究[40]顯示相比于藥物敏感的對(duì)照組，SKOV3（人卵巢腺癌細(xì)胞SK-OV-3）耐藥細(xì)胞株的H19水平更高，使其衍生物miR-675作用的靶基因產(chǎn)物Slug（又稱(chēng)為Snail2，EMT轉(zhuǎn)錄因子）表達(dá)上調(diào)，Slug是促侵襲因子，可抑制E-cadherin（鈣粘素E）等轉(zhuǎn)移抑制因子的轉(zhuǎn)錄，最終促進(jìn)了EMT，增強(qiáng)了腫瘤轉(zhuǎn)移侵襲能力。卵巢癌普遍有化療耐受和腹膜侵襲，H19 /miR-675 在卵巢癌的化療耐受和轉(zhuǎn)移中的作用還有待進(jìn)一步研究。

3.2 HOTAIR與miRNA的相互作用

研究顯示lncRNA HOTAIR也參與和miRNA的相互作用。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)在急性髓細(xì)胞白血病中，HOTAIR作為一個(gè)內(nèi)源競(jìng)爭(zhēng)性RNA（ceRNA）與miR-193a結(jié)合作用，從而削弱miR-193a對(duì)c-KIT表達(dá)的抑制能力[41]，若干擾HOTAIR對(duì)miR-193a的競(jìng)爭(zhēng)抑制則可以阻礙腫瘤發(fā)展。這一發(fā)現(xiàn)顯示出一定的治療潛能，可能會(huì)成為惡性腫瘤治療中的一大進(jìn)展。根據(jù)Nakano H等人[42]實(shí)驗(yàn)顯示，miR-193a通過(guò)在轉(zhuǎn)錄前水平調(diào)節(jié)MCL1(myeloid cell leukemia-1，髓細(xì)胞白血病基因-1)來(lái)阻止卵巢癌細(xì)胞凋亡，調(diào)節(jié)CCND1（Cyclin D1基因，細(xì)胞周期蛋白D1基因）、ERBB4和KRAS等來(lái)促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞增殖，以上研究表明HOTAIR和miR-193a兩者的相互作用可能是卵巢癌發(fā)生發(fā)展的潛在通路。

3.3 HOST2致癌作用的機(jī)制

lncRNA HOST2在卵巢癌中發(fā)揮作用的分子機(jī)制，顯示與結(jié)合抑制microRNA let-7b相關(guān)[43]。多數(shù)let-7家族成員通常扮演著腫瘤抑制者的角色，而在卵巢癌中表達(dá)下調(diào)，Gao Y等人的研究顯示HOST2扮演了一個(gè)分子海綿的角色，依靠直接結(jié)合的“分子海綿”效應(yīng)來(lái)抑制let-7b的功能，使得let-7b調(diào)節(jié)的靶基因如c-myc、HMGA2、Dicer和Imp3等表達(dá)增加，這些靶基因通過(guò)促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移來(lái)發(fā)揮致癌作用，最終促進(jìn)了卵巢癌的發(fā)生和發(fā)展。

3.4 NAET1致癌作用可被miRNA抑制

Chai Y等人[27]的研究發(fā)現(xiàn)lncRNA NAET1是miR-124-3p的靶向作用物，miR-124-3p通過(guò)與NAET1特異性結(jié)合抑制其作用功能，經(jīng)熒光定量PCR的檢驗(yàn)，轉(zhuǎn)染了miR-124-3p模擬物的OVCAR3細(xì)胞，相比于普通未轉(zhuǎn)染細(xì)胞，NEAT1表達(dá)量明顯降低，而相較于正常人miR-124-3p在卵巢癌患者中呈現(xiàn)出表達(dá)水平的降低。該研究顯示miR-124-3p可能成為扼制NAET1、抗卵巢癌治療的潛在新靶點(diǎn)。

3.5 XIST抑癌作用的發(fā)揮

研究顯示[44]XIST在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中高表達(dá)，這與卵巢癌的情況相反。該實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)敲低XIST引起的腫瘤抑制效應(yīng)不是直接依靠其本身，而是依靠與miR-152的相互作用來(lái)實(shí)現(xiàn)，miR-152通過(guò)結(jié)合抑制XIST來(lái)發(fā)揮與敲低XIST程度相同的抑癌作用，在這一過(guò)程中，miR-152與XIST是互為競(jìng)爭(zhēng)性?xún)?nèi)源性RNA（ceRNA）的關(guān)系。我們可以將這一實(shí)驗(yàn)結(jié)果與卵巢癌進(jìn)行結(jié)合，卵巢癌中XIST的減少以及致癌作用是否與miR-152的競(jìng)爭(zhēng)抑制有關(guān)，兩者相互作用的關(guān)系在卵巢癌發(fā)生發(fā)展中有無(wú)作用還值得進(jìn)一步思考和探究。

3.6 MEG3與相關(guān)miRNA的作用網(wǎng)絡(luò)

研究顯示，lncRNA MEG3可以與多個(gè)miRNA相互作用。在胃癌中顯示MEG3基因啟動(dòng)子的甲基化與miR-148a的下調(diào)相關(guān)[45]，而miR-148a表達(dá)下降又與預(yù)后較差的野生型brcal1/2基因型的卵巢癌患者相關(guān)[46]。因此，在卵巢癌中MEG3與miR-148a兩者的表達(dá)也可能具有相關(guān)性。

另外，研究顯示在舌鱗狀細(xì)胞癌中miR-26a抑制了MEG3基因啟動(dòng)子的甲基化[47]，進(jìn)而促進(jìn)了MEG3的抑癌作用，而miR-26a在卵巢癌細(xì)胞中則通過(guò)靶向作用ER-α來(lái)促進(jìn)其增殖?？梢?jiàn)，MEG3與miR-26a兩者的關(guān)系具有兩面性，其在卵巢癌中還有待更進(jìn)一步研究。

在一項(xiàng)MEG3功能實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，MEG3是miR-181a的競(jìng)爭(zhēng)性?xún)?nèi)源性RNA（ceRNA）[48]，而在卵巢癌中，miR-181a的高表達(dá)常引起較差的預(yù)后，miR-181a通過(guò)直接抑制Smad7來(lái)參與到上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）[49]。但是MEG3對(duì)miR-181a的競(jìng)爭(zhēng)抑制可能并不是MEG3抑制的EMT的主要機(jī)制，最新研究表明其主要機(jī)制可能是MEG3在表觀遺傳學(xué)水平控制EMT通路多個(gè)相關(guān)基因的表達(dá)[50]。

圖1卵巢癌相關(guān)lncRNA與microRNA相互作用的分子網(wǎng)絡(luò)。A，H19通過(guò)調(diào)節(jié)組蛋白H1.3促進(jìn)細(xì)胞增殖; H19引起不良的預(yù)后和耐藥性；H19通過(guò)與miR675及l(fā)et7家族作用來(lái)增強(qiáng)上述功能。 B，HOTAIR是預(yù)后標(biāo)志物，通過(guò)調(diào)節(jié)EMT促進(jìn)細(xì)胞轉(zhuǎn)移；HOTAIR通過(guò)調(diào)節(jié)凋亡相關(guān)基因（細(xì)胞周期蛋白E，BCL-2，caspase-9，caspase-3）促進(jìn)細(xì)胞增殖；HOTAIR與miR93a競(jìng)爭(zhēng)作用，后者通過(guò)調(diào)節(jié)某些基因（MCL1，CCND1，ERBB4，和KRAS）促進(jìn)細(xì)胞增殖。 C，HOST2通過(guò)結(jié)合let-7b并抑制其功能，增加靶基因（HMGA2，c-myc，Dicer和Imp3）的表達(dá)，從而促進(jìn)細(xì)胞轉(zhuǎn)移，侵襲和增殖。 D，NEA1促進(jìn)細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移； NEAT1與miR124-3p相互作用。 E，XIST可以通過(guò)重新激活X特異性抗性基因來(lái)抑制細(xì)胞對(duì)紫杉醇的耐藥性；XIST通過(guò)與miR152競(jìng)爭(zhēng)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。 F，MEG3通過(guò)p53，RB1及其與miR26a的相互作用促進(jìn)細(xì)胞增殖；MEG3與調(diào)節(jié)EMT的miR181a競(jìng)爭(zhēng)，從而導(dǎo)致預(yù)后不良。Fig.1 The network of molecular interaction between lncRNAs and microRNAs in OC. A, H19 not only promotes cell proliferation through regulating H1.3 but increases drug resistance and lead to poor prognosis. H19 further enhances these effects through interacting with miR675 and let7 family proteins; B, HOTAIR, a prognostic marker, increases cancer dissemination through regulating EMT and promotes cell proliferation by regulating apoptosis-related genes (cyclin E, BCL-2, caspase-9, caspase-3, and BRCA1). HOTAIR also interacts with miR93a which promotes cell proliferation by regulating genes including MCL1, CCND1, ERBB4, and KRAS; C, HOST2 promotes cell metastasis, invasion, and proliferation via binding to let-7b and inhibiting its functions which in turn increases the expression of let-7b target genes (HMGA2, c-myc, Dicer, and Imp3); D, NEA1 increases cell proliferation and dissemination; NEAT1 interacts with miR124-3p; E, XIST can inhibit cell resistance to paclitaxel via reactivating the X-specific resistance gene; XIST also increases cell growth by competing with miR152; F, MEG3 promotes cell proliferation via p53, RB1 and the interaction with miR26a; MEG3 competes with miR181a which regulates EMT, thus leading to poor prognosis.

4 小結(jié)

近年來(lái)，隨著高通量測(cè)序方法和基因芯片的發(fā)展和應(yīng)用，以及生物化學(xué)和分子生物學(xué)機(jī)制在人類(lèi)腫瘤發(fā)生發(fā)展中的研究和進(jìn)展，越來(lái)越多與腫瘤相關(guān)的lncRNA被發(fā)現(xiàn)，關(guān)于lncRNA在卵巢癌發(fā)展進(jìn)程中作用的研究也越來(lái)越多（表1），通過(guò)對(duì)近年來(lái)相關(guān)研究的學(xué)習(xí)、歸納和總結(jié)，我們發(fā)現(xiàn)有許多l(xiāng)ncRNA在卵巢癌中都存在著不同程度的異常表達(dá)，而這種異常表達(dá)幾乎貫穿了卵巢癌發(fā)展進(jìn)程的始終，與卵巢癌的發(fā)生、發(fā)展、浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移、化療耐藥以及預(yù)后均有相關(guān)性，這些信息向我們展示了異常表達(dá)的lncRNA在卵巢癌早期診斷中的潛力。有研究通過(guò)基因敲除/沉默或過(guò)表達(dá)的方法扭轉(zhuǎn)一些lncRNA的異常表達(dá)，發(fā)現(xiàn)卵巢癌的發(fā)展速度也隨之減慢，因此可以運(yùn)用基因工程的治療方法可以改善卵巢癌患者的病情?？偨Y(jié)涉及卵巢癌發(fā)生機(jī)制的研究發(fā)現(xiàn)，lncRNA及其相關(guān)的miRNA形成一個(gè)相互作用的網(wǎng)絡(luò)（圖1），在這個(gè)網(wǎng)絡(luò)中通過(guò)多種通路和因子影響卵巢癌的發(fā)生發(fā)展。以上這些研究無(wú)疑為卵巢癌診斷提供了新的生物標(biāo)志物，為卵巢癌治療提供了新思路?，F(xiàn)有的針對(duì)lncRNA基因工程治療手段較為薄弱，可以嘗試從其相互作用的miRNA下手，這一思路將開(kāi)啟卵巢癌防治新篇章。

然而，現(xiàn)有大多數(shù)的研究?jī)H僅局限在相關(guān)性方面，關(guān)于lncRNAs在卵巢癌中更為具體的作用機(jī)理和信號(hào)通路尚不明確，而其作為針對(duì)早期診斷的生物標(biāo)志物也還沒(méi)有更簡(jiǎn)單有效的檢測(cè)方法去實(shí)施。雖然已經(jīng)發(fā)現(xiàn)與卵巢癌相關(guān)的lncRNAs與對(duì)應(yīng)miRNAs之間相互作用在卵巢癌病理進(jìn)程的發(fā)揮著重要作用，但其間的各個(gè)環(huán)節(jié)和還有參與的因子及作用方式仍有許多未知。關(guān)于未來(lái)發(fā)展和研究前景，我們可以著眼于lncRNAs的具體作用方式和功能角色，研究它們是通過(guò)哪些路徑或者影響了那些因子來(lái)促成了卵巢癌的整個(gè)進(jìn)程，尤其是這些lncRNAs與相關(guān)miRNAs之間相互作用對(duì)卵巢癌進(jìn)程的影響，以及將基因工程的方法應(yīng)用于人類(lèi)治療的進(jìn)程等等，都有待更深入的研究和探討，革新和發(fā)展。

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Long non-coding RNAs in ovarian cancer and theirs interaction and microRNAs

Su Huiwen, Ma Ling*(Department of Gynecological Oncology, the First Affiliated Hospital of Bengbu Medical College, Bengbu 233004, China)

Ovarian cancer is the leading cause of death among gynecologic malignancies. Since ovarian cancer develops asymptomatically, it is often diagnosed at an advanced and terminal stage. Generally, recurrent drug-resistant tumors and metastasis reduce the treatment’s efficacy, therefore more sensitive and efficient diagnostic methods and therapeutic biological targets are to be developed. Recently, lncRNAs have been highlighted in oncology research fields, showing their potential as an emerging biomarker in the diagnosis and treatment of various human malignancies. In this review, we have summarized several studies about lncRNAs involved in ovarian cancer and analyzed their roles in the tumorigenesis and development of ovarian cancer as well as the interaction between these lncRNAs and related microRNAs in disease progression.

Ovarian cancer; LncRNAs; microRNAs; tumorigenesis; tumor progression; biomarker

R737.31

A

10.16705/ j. cnki. 1004-1850. 2017. 06. 013

2017-04-27

2017-11-28

蚌埠醫(yī)學(xué)院研究生科研創(chuàng)新計(jì)劃項(xiàng)目

（Byycx1623）

蘇薈文，女（1993年），漢族，研究生

*通訊作者(To whom correspondence should be addressed)：ml1970222@163.com