QuEChERS結(jié)合超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定番茄中噻蟲(chóng)嗪、噻蟲(chóng)胺、螺蟲(chóng)乙酯及其代謝物殘留

劉 炎，歐陽(yáng)迪慶，葉玉鳳，王成秋，焦必寧，趙其陽(yáng)，張耀海，敖 艷，王海燕

(1.農(nóng)業(yè)部柑桔產(chǎn)品質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估實(shí)驗(yàn)室(重慶)，中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院柑桔研究所/西南大學(xué)柑桔研究所，重慶 400712；2.西南大學(xué) 食品科學(xué)學(xué)院，重慶 400715；3.農(nóng)業(yè)部柑桔及苗木質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心，重慶 400712；4.國(guó)家柑桔工程技術(shù)研究中心，重慶 400712；5.柑桔學(xué)重慶市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，重慶 400712；6.重慶市畜牧科學(xué)院，重慶 402460)

QuEChERS結(jié)合超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定番茄中噻蟲(chóng)嗪、噻蟲(chóng)胺、螺蟲(chóng)乙酯及其代謝物殘留

劉 炎1,3，歐陽(yáng)迪慶1,3，葉玉鳳1,3，王成秋1,2,3,4*，焦必寧1,2,3,4,5*，趙其陽(yáng)1,3，張耀海1,3，敖 艷2,3，王海燕6

(1.農(nóng)業(yè)部柑桔產(chǎn)品質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估實(shí)驗(yàn)室(重慶)，中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院柑桔研究所/西南大學(xué)柑桔研究所，重慶 400712；2.西南大學(xué) 食品科學(xué)學(xué)院，重慶 400715；3.農(nóng)業(yè)部柑桔及苗木質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心，重慶 400712；4.國(guó)家柑桔工程技術(shù)研究中心，重慶 400712；5.柑桔學(xué)重慶市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，重慶 400712；6.重慶市畜牧科學(xué)院，重慶 402460)

建立了QuEChERS-UPLC-MS/MS法快速同時(shí)檢測(cè)番茄中噻蟲(chóng)嗪及其代謝產(chǎn)物(噻蟲(chóng)胺)、螺蟲(chóng)乙酯及其4種代謝產(chǎn)物(BYI08330-enol-glucoside、BYI08330-mono-hydroxy、BYI08330-enol和BYI08330-ketohydroxy)殘留的分析方法。樣品經(jīng)乙腈提取，NaCl和無(wú)水MgSO4除水后,經(jīng)N-丙基乙二胺(PSA)和C18粉末凈化，用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(UPLC-MS/MS)分析，采用多反應(yīng)離子監(jiān)測(cè)模式(MRM)檢測(cè)，基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液外標(biāo)法定量。7種目標(biāo)物質(zhì)在0.2～2 000 μg/L質(zhì)量濃度范圍內(nèi)均具有良好的線性關(guān)系(r2≥0.999 2)，在0.002、0.02、0.20、2.00 mg/kg 加標(biāo)水平下的平均回收率為79.9%～104%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為0.94%～6.4%，方法定量下限(LOQ)為0.002 mg/kg。該方法快速簡(jiǎn)便、靈敏度高、重現(xiàn)性好，能滿足番茄中噻蟲(chóng)嗪、噻蟲(chóng)胺和螺蟲(chóng)乙酯及其代謝產(chǎn)物殘留的快速檢測(cè)和確證要求。

QuEChERS法；超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法；農(nóng)藥殘留；番茄

圖1 噻蟲(chóng)嗪、噻蟲(chóng)胺、螺蟲(chóng)乙酯及其代謝物的結(jié)構(gòu)Fig.1 Structures of thiamethoxam,clothianidin,spirotetramat and its metabolites

番茄(SolanumlycopersicumL.)是世界第一大蔬菜作物，我國(guó)的番茄產(chǎn)量約占世界的1/3[1]。隨著全球氣候變化、結(jié)構(gòu)調(diào)整和設(shè)施農(nóng)業(yè)的快速發(fā)展，煙粉虱在番茄上的危害逐年增加，造成其傳播的番茄黃化曲葉病毒病日益加重[2]。目前主要采用化學(xué)法防治煙粉虱，但吡蟲(chóng)啉等常規(guī)殺蟲(chóng)劑會(huì)造成抗藥性，因此廣譜、高效、低毒、安全的新型殺蟲(chóng)劑正逐漸受到關(guān)注。根據(jù)中國(guó)農(nóng)藥信息網(wǎng)的數(shù)據(jù)，噻蟲(chóng)嗪、噻蟲(chóng)胺以及螺蟲(chóng)乙酯已被登記用于防治番茄上的煙粉虱。

噻蟲(chóng)嗪、噻蟲(chóng)胺、螺蟲(chóng)乙酯及其代謝物(結(jié)構(gòu)式見(jiàn)圖1)作為高毒農(nóng)藥的替代品種，可有效防治半翅目、鞘翅目和某些鱗翅目害蟲(chóng)。毒理研究表明：噻蟲(chóng)嗪、噻蟲(chóng)胺對(duì)哺乳動(dòng)物、鳥(niǎo)類和水生生物具有低毒性，對(duì)蜜蜂具有高毒性[3]；螺蟲(chóng)乙酯的主要代謝產(chǎn)物對(duì)鳥(niǎo)類和哺乳動(dòng)物具有低急性和短期毒性，其代謝物的毒性均等于或低于母體化合物；也有研究表明，大鼠的雄性生殖毒性可能是由代謝物B-enol引起[4]。由于噻蟲(chóng)嗪在植物體內(nèi)可轉(zhuǎn)化為噻蟲(chóng)胺，所以JMPR評(píng)估報(bào)告中噻蟲(chóng)嗪的膳食評(píng)估殘留物包括噻蟲(chóng)嗪和噻蟲(chóng)胺[3]，螺蟲(chóng)乙酯的膳食評(píng)估殘留物包括螺蟲(chóng)乙酯、B-enol、B-glu、B-mono和B-keto[4]。我國(guó)規(guī)定番茄中噻蟲(chóng)胺的最大殘留限量為1 mg/kg,但尚未制定噻蟲(chóng)嗪的限量標(biāo)準(zhǔn)；規(guī)定番茄中螺蟲(chóng)乙酯及其烯醇類代謝產(chǎn)物的臨時(shí)最大殘留限量為1 mg/kg[5]，但未包括螺蟲(chóng)乙酯其他的代謝物殘留。

目前國(guó)內(nèi)外測(cè)定噻蟲(chóng)嗪、噻蟲(chóng)胺和螺蟲(chóng)乙酯殘留主要采用液相色譜法(HPLC)[6-7]和液相色譜-質(zhì)譜法(LC-MS)[8-12]等，也有較少關(guān)于氣相色譜法(GC)[13-15]和氣相色譜-質(zhì)譜法(GC-MS)[16]的報(bào)道，前處理方法大多采用固相萃取法(SPE)，也有研究采用QuEChERS方法。但尚未見(jiàn)同時(shí)檢測(cè)番茄中噻蟲(chóng)嗪、噻蟲(chóng)胺和螺蟲(chóng)乙酯及其4種代謝物的方法報(bào)道。因此，研究建立高效準(zhǔn)確、同時(shí)測(cè)定以上幾種農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法，對(duì)于保障食品安全、進(jìn)行農(nóng)藥安全性評(píng)價(jià)具有重要意義。

本研究以改進(jìn)的QuEChERS結(jié)合UPLC-MS/MS技術(shù)，建立了快速檢測(cè)番茄中的噻蟲(chóng)嗪、噻蟲(chóng)胺和螺蟲(chóng)乙酯及其代謝物等7種殺蟲(chóng)劑殘留的分析方法。重點(diǎn)對(duì)樣品量和凈化條件等進(jìn)行了優(yōu)化，并將此方法應(yīng)用于柑橘、節(jié)瓜、蘋(píng)果和茄子中上述殺蟲(chóng)劑殘留的測(cè)定。本方法簡(jiǎn)單方便、易于操作,能夠滿足番茄中噻蟲(chóng)嗪、噻蟲(chóng)胺和螺蟲(chóng)乙酯及其代謝物殘留量快速檢測(cè)和確證的要求,并為我國(guó)制定噻蟲(chóng)嗪和螺蟲(chóng)乙酯的代謝物在番茄中的最大殘留限量提供參考依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器、試劑與樣品

Agilent 1290-6495液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀(美國(guó)Agilent公司)；Milli-Q A10 超純水儀(美國(guó)Millipore公司)；CL31/CL31R 多用途離心機(jī)(美國(guó)Thermo Fisher公司)；KQ5200DE型數(shù)控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)等。

標(biāo)準(zhǔn)品：噻蟲(chóng)嗪(純度99.0%)，噻蟲(chóng)胺(純度99.0%)，螺蟲(chóng)乙酯(BYI08330,純度98.5%)，B-glu(純度98.6%)，B-mono(純度98.2%)，B-enol(純度99.6%)，B-keto(純度94.8%)，均購(gòu)于德國(guó)Dr.Ehrenstorfer GmbH；乙腈、甲醇(色譜純，德國(guó)CNW Technologies GmbH)；N-丙基乙二胺(PSA，德國(guó) CNW Technologies GmbH )；超純反相C18填料(加拿大SiliCycle公司)；氯化鈉和無(wú)水硫酸鎂(分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；甲酸(分析純，重慶川東化工有限公司)。

番茄、柑橘、節(jié)瓜、蘋(píng)果、茄子樣品購(gòu)于當(dāng)?shù)爻小?/p>

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1超高效液相色譜條件色譜柱：Agilent ecipes plus C18液相色譜柱(1.8 μm，2.1 mm×50 mm)；柱溫40 ℃；流動(dòng)相：0.1%甲酸水溶液(A)-甲醇(B)；梯度洗脫程序：0～0.2 min，10% B；0.2～6.0 min，10%～90% B；6.0～8.0 min,90% B；8.0～8.1 min，90%～10% B；8.1～9.0 min，10% B。進(jìn)樣量：3 μL；流速：0.3 mL/min。

1.2.2質(zhì)譜條件離子化模式:電噴霧離子源，正離子模式(ESI+)；質(zhì)譜掃描方式:多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)；干燥氣溫度250 ℃，干燥氣流速14 L/min,氮?dú)鈮毫?0 psi,鞘氣溫度375 ℃，鞘氣流速12 L/min，毛細(xì)管電壓4 000 V，噴嘴電壓500 V，iFunnel parameters高壓為200 V，低壓100 V。7種農(nóng)藥的監(jiān)測(cè)離子、錐孔電壓、碰撞能量等質(zhì)譜參數(shù)如表1所示。

表1 7種農(nóng)藥的串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定參數(shù)Table 1 MS /MS parameters for the seven pesticides

* quantification ion

1.2.3標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制標(biāo)準(zhǔn)工作液:分別準(zhǔn)確稱取 10 mg(精確至 0.01 mg) 農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品，用甲醇溶解并定容至10.0 mL，配成1 000 mg/L標(biāo)準(zhǔn)工作液，于-50 ℃避光保存。用甲醇將標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液逐級(jí)稀釋配成2、1、0.5、0.1、0.05、0.01、0.005、0.001、0.000 2 mg/L的 7種農(nóng)藥的系列混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，置于-50 ℃保存。

基質(zhì)空白標(biāo)準(zhǔn)溶液:以不含7種農(nóng)藥的番茄果實(shí)為材料，利用本實(shí)驗(yàn)前處理方法制備番茄的基質(zhì)空白溶液。分別移取適量的 20、10、5、1、0.5、0.1、0.05、0.01、0.002 mg/L 的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，用基質(zhì)空白溶液稀釋成一系列質(zhì)量濃度為 2、1、0.5、0.1、0.05、0.01、0.005、0.001、0.000 2 mg/L的基質(zhì)空白標(biāo)準(zhǔn)溶液，在優(yōu)化條件下測(cè)定，分別得到番茄中7種農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.2.4樣品前處理方法準(zhǔn)確稱取5.00 g(精確至0.01 g) 番茄勻漿樣品于50 mL離心管中，加入5.00 mL乙腈，超聲波提取20 min，加入2.0 g MgSO4和0.5 g NaCl,劇烈振搖1 min，10 000 r/min離心5 min。取上清液2 mL轉(zhuǎn)入已加有25 mg PSA和25 mg C18的4 mL 聚四氟乙烯離心管中，振蕩混合1 min，3 000 r/min離心5 min。取上清液過(guò)0.22 μm有機(jī)濾膜，濾液經(jīng) UPLC-MS/MS分析。

圖2 0.2 mg/L 7種農(nóng)藥的UPLC-MS/MS MRM色譜圖Fig.2 UPLC-MS/MS MRM chromatograms of 7 pesticides

圖3 不同樣品量對(duì)番茄中噻蟲(chóng)嗪和螺蟲(chóng)乙酯及其代謝物加標(biāo)回收率的影響Fig.3 Effects of different sample amounts on the recovery of thiamethoxam and spirotetramat and their metabolites in tomato

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜條件優(yōu)化

選擇Agilent ecipes plus C18(1.8 μm，2.1 mm×50 mm)色譜柱進(jìn)行分離，在優(yōu)化色譜條件下，以含0.1%甲酸的純水溶液和純甲醇溶液為流動(dòng)相可獲得較好的分離度及較高的響應(yīng)值，各種農(nóng)藥的保留時(shí)間見(jiàn)表1。圖2為0.2 mg/L番茄基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液的MRM離子色譜圖。

2.2 前處理?xiàng)l件的優(yōu)化

2.2.1稱樣量QuEChERS方法中,稱樣量一般為10.0 g[17-19]，本實(shí)驗(yàn)考察了稱樣量(3.0、5.0、10.0 g)對(duì)7種農(nóng)藥回收率的影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)圖3。結(jié)果表明，稱樣量過(guò)少或過(guò)多均會(huì)影響回收率；當(dāng)稱樣量為5.0 g時(shí)，7種農(nóng)藥的回收率均最佳。隨著稱樣量的增加，有機(jī)溶劑等試劑耗材的成本也會(huì)增加，因此本實(shí)驗(yàn)選取最佳稱樣量為5.0 g。

2.2.2吸附劑PSA去除有機(jī)酸的效果較好，但去除色素、甾醇和維生素的效果一般；C18去除維生素、色素和甾醇的能力較好，但對(duì)少部分農(nóng)藥有一定的吸附。歐盟[20]和AOAC[21]在QuEChERS方法中，一般采用1 mL提取上清液中加入25 mg PSA或25 mg C18。本實(shí)驗(yàn)比較了單一PSA和C18以及PSA-C18混合對(duì)回收率的影響。結(jié)果表明，對(duì)單一PSA而言，B-mono和B-enol的回收率會(huì)隨著吸附劑用量的增加而提高，其他農(nóng)藥則相反，但PSA的最小使用量為50 mg時(shí)，螺蟲(chóng)乙酯、B-glu、B-enol和B-keto的回收率均低于70%。對(duì)單一C18而言，7種農(nóng)藥的回收率基本隨著吸附劑用量的增加而升高，但C18的最大使用量為100 mg時(shí)，B-glu的回收率仍不足70%。Li等[8]指出，PSA量對(duì)農(nóng)藥的回收率產(chǎn)生負(fù)面影響，即隨著PSA添加量的增加目標(biāo)物的回收率會(huì)有所下降；GCB和C18的用量對(duì)目標(biāo)物的提取效率沒(méi)有顯著影響。當(dāng)使用PSA-C18混劑后，B-mono和B-enol的回收率會(huì)隨著添加量的增加先升高后降低，而其他農(nóng)藥的回收率反而降低；當(dāng)PSA+C18為25 mg+25 mg時(shí)，所有目標(biāo)物的回收率均可達(dá)到70%～110%。因此，本實(shí)驗(yàn)選擇加入25 mg PSA 和25 mg C18的混合凈化劑。

2.3 基質(zhì)效應(yīng)

基質(zhì)效應(yīng)是由共洗脫基質(zhì)組分引起的分析信號(hào)的抑制或增強(qiáng)現(xiàn)象，已被廣泛研究并被認(rèn)為是食品樣品LC-MS/MS定量分析中的誤差源[22]。本研究使用基質(zhì)匹配的校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)物來(lái)補(bǔ)償基質(zhì)溶液中目標(biāo)農(nóng)藥的基質(zhì)效應(yīng)。計(jì)算基質(zhì)效應(yīng)的公式如下：

ME為正值表明基質(zhì)效應(yīng)增強(qiáng)，反之減弱。一般當(dāng)基質(zhì)效應(yīng)增強(qiáng)或抑制超過(guò)10%，則認(rèn)為基質(zhì)效應(yīng)對(duì)定量檢測(cè)具有顯著影響，不可忽略[10]。從表2可看出，除了B-glu和B-mono外(|ME|<10%)，其余5種農(nóng)藥的ME絕對(duì)值均大于10%，表明這5種農(nóng)藥的基質(zhì)減弱效應(yīng)明顯。為確保結(jié)果的準(zhǔn)確性，本文采用基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作液為基準(zhǔn)進(jìn)行校正。

2.4 方法評(píng)價(jià)

2.4.1線性關(guān)系與檢出限在優(yōu)化的前處理和色譜條件下，對(duì)系列質(zhì)量濃度的基質(zhì)空白混合標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行檢測(cè)，其線性范圍等結(jié)果見(jiàn)表2。結(jié)果表明，7種農(nóng)藥的質(zhì)量濃度(x，μg/L)在0.2～2 000 μg/L范圍內(nèi)與其積分峰面積(y)呈良好的線性關(guān)系，r2≥0.999 2。當(dāng)實(shí)際樣品殘留量超過(guò)此線性范圍時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品溶液適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行定量測(cè)定。在信噪比(S/N)為3時(shí)，7種農(nóng)藥的檢出限(LOD)為0.03～1.6 μg/kg。

表2 7種農(nóng)藥的線性范圍、線性方程、相關(guān)系數(shù)、基質(zhì)效應(yīng)和檢出限Table 2 Linear ranges，regression equations，correlation coefficients，matrix effect and limits of detection(LODs) for seven pesticides

-:no data

2.4.2回收率與精密度分別在空白番茄樣品中添加0.002、0.02、0.20、2.00 mg/kg水平的混標(biāo)溶液，每個(gè)添加濃度平行測(cè)定5次，進(jìn)行加標(biāo)回收率試驗(yàn)。7種農(nóng)藥的平均回收率為79.9%～104%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為0.94%～6.4%(表3)。以最低加標(biāo)濃度可知，7種農(nóng)藥的定量下限(LOQ)為0.002 mg/kg。結(jié)果表明，本方法具有較高的回收率和精密度，滿足農(nóng)藥多殘留檢測(cè)要求。

表3 7種農(nóng)藥的平均回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差Table 3 Mean recoveries and relative standard deviations of 7 pesticides

(續(xù)表3)

AnalyteSpikedlevels(mg/kg)0 0020 020 202 00Meanrecovery(%)RSD(%)Meanrecovery(%)RSD(%)Meanrecovery(%)RSD(%)Meanrecovery(%)RSD(%)B-mono86 44 01024 899 81 186 42 4B-enol84 12 31042 01012 889 31 5B-keto91 64 295 94 694 73 692 91 4

2.5 與其他前處理方法的比較

表4對(duì)比了本方法與文獻(xiàn)方法的優(yōu)缺點(diǎn),由表可知，同樣使用QuEChERS技術(shù)，本方法的試劑和凈化劑用量相對(duì)更少，成本更低。并且本方法可同時(shí)測(cè)定7種農(nóng)藥，總體回收率相對(duì)較好，RSD較小，能滿足實(shí)際樣品的分析測(cè)定要求。

表4 QuEChERS方法測(cè)定7種農(nóng)藥與其他樣品前處理方法的比較Table 4 Comparison of QuEChERS methods for the determination of 7 pesticides and other sample pretreatment methods

2.6 方法應(yīng)用

將本方法應(yīng)用于柑橘、節(jié)瓜、蘋(píng)果、茄子中7種目標(biāo)農(nóng)藥殘留量的測(cè)定，通過(guò)在這4種空白基質(zhì)中加入0.2、1.0、5.0、10.0、50.0、100.0、500.0、1 000.0、2 000.0 μg/L的7種農(nóng)藥混標(biāo)，獲得7種農(nóng)藥的溶劑標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)系數(shù)，并計(jì)算各基質(zhì)的基質(zhì)效應(yīng)，結(jié)果見(jiàn)表5。由表可知，4種基質(zhì)中7種農(nóng)藥大多數(shù)表現(xiàn)為抑制作用，在實(shí)際樣品測(cè)定時(shí)需用基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行定量。分別在柑橘、節(jié)瓜、蘋(píng)果和茄子空白勻漿樣品中添加0.20 mg/kg 的混標(biāo)溶液，各平行測(cè)定5次，進(jìn)行加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)表5。不同樣品基質(zhì)中7種農(nóng)藥的平均回收率為71.1%～102%，RSD為0.61%～6.1%。4種基質(zhì)中農(nóng)藥的回收率基本滿足農(nóng)藥殘留分析的要求。

表5 7種農(nóng)藥測(cè)定方法的應(yīng)用Table 5 Application of seven pesticide determination methods

(續(xù)表5)

AnalyteLinearrange(μg/L)MatrixLinearequationr2Matrixeffect(ME，%)Meanrecovery(%)RSD(%)Chieh-quay=994 84x+2770 20 9998-374 81 5Appley=1101 52x+2744 40 9999876 42 5Eggplanty=1036 278x+11236 140 9991177 73 0B-mono0 2～2000Methanoly=68 945x+127 270 9999---Citrusy=67 876x-466 440 9995-279 85 0Chieh-quay=50 558x-194 210 9998-2781 71 3Appley=53 076x-182 250 9998-2387 03 0Eggplanty=55 248x-10 420 9997-2077 82 2B-enol0 2～2000Methanoly=551 89x+1586 60 9999---Citrusy=574 53x-4290 30 9994482 70 61Chieh-quay=459 76x-1771 10 9999-1773 12 1Appley=507 26x-426 250 9997-885 91 9Eggplanty=417 85x+943 520 9995-2473 21 7B-keto0 2～2000Methanoly=57 863x-176 660 9999---Citrusy=46 949x-303 840 9994-1986 54 4Chieh-quay=51 473x-424 760 9991-111023 3Appley=52 904x-176 430 9993-985 52 6Eggplanty=48 577x+202 60 9999-1680 61 5

-:no data

圖 4 番茄樣品的色譜圖Fig.4 Chromatogram of a tomato sample

采用本方法檢測(cè)市售20份番茄、20份節(jié)瓜、20份蘋(píng)果、20份茄子樣品，其中節(jié)瓜中未檢出上述7種農(nóng)藥，番茄有1份樣品檢出噻蟲(chóng)嗪和噻蟲(chóng)胺，蘋(píng)果有1份樣品檢出噻蟲(chóng)嗪，茄子有2份樣品檢出噻蟲(chóng)嗪，檢出量為0.003～0.027 mg/kg，但均未超標(biāo)。圖4為檢出農(nóng)藥的市售番茄樣品的色譜圖。

3 結(jié) 論

本研究采用優(yōu)化后的QuEChERS結(jié)合UPLC-MS/MS技術(shù)，建立了快速檢測(cè)番茄中噻蟲(chóng)嗪、噻蟲(chóng)胺、螺蟲(chóng)乙酯及4種代謝產(chǎn)物殘留的方法。本方法具有操作簡(jiǎn)單、快速、靈敏度高、檢出限低和重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)，能滿足番茄中噻蟲(chóng)嗪、噻蟲(chóng)胺、螺蟲(chóng)乙酯及4種代謝產(chǎn)物同時(shí)檢測(cè)的要求。該方法同時(shí)適用于柑橘、節(jié)瓜、蘋(píng)果、茄子中上述7種農(nóng)藥殘留的檢測(cè)，有較高的應(yīng)用推廣價(jià)值。

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Analysis of Thiamethoxam,Clothianidin and Spirotetramat and Their Metabolites Residues in Tomato Using QuEChERS Method with Ultra Performance Liquid Chromatography-Mass Spectrometry

LIU Yan1,3,OUYANG Di-qing1,3,YE Yu-feng1,3,WANG Cheng-qiu1,2,3,4*,JIAO Bi-ning1,2,3,4,5*,ZHAO Qi-yang1,3,ZHANG Yao-hai1,3,AO Yan2,3,WANG Hai-yan6

(1.Laboratory of Risk Assessment for Citrus Quality and Safety,Ministry of Agriculture,Citrus Reserch Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences/Southwest University,Chongqing 400712,China;2.College of Food Science,Southwest University,Chongqing 400715, China;3.Quality Supervision and Testing Center for Citrus and Seedling,Ministry of Agriculture,Chongqing 400712,China;4.National Center for Citrus Engineering,Chongqing 400712,China;5.Chongqing Key Laboratory of Citrus,Chongqing 400712,China;6.Chongqing Academy of Animal Science,Chongqing 402460,China)

In this study,an analytical method was established for the determination of thiamethoxam and its metabolites clothianidin,spirotetramat and its four metabolites such as BYI08330-enol-glucoside,BYI08330-ketohydroxy,BYI08330-enol and BYI08330-mono-hydroxy residues in tomatoes using QuEChERS cleanup with ultra-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry(UPLC-MS/MS).The residues in samples were extracted with acetonitrile,dehydrated with anhydrous magnesium sulfate and sodium chloride,then purified with primary secondary amine (PSA) sorbent and C18,finally detected by ultra-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry(UPLC-MS/MS) under the multi-reactive ion monitoring mode(MRM) and quantified by external standard method.The results showed that good linearities for the seven analytes i.e.thiamethoxam,clothianidin,spirotetramat,BYI08330-enol-glucoside,BYI08330-mono-hydroxy,BYI08330-enol and BYI08330-ketohydroxy were observed in the concentration range of 0.2-2 000 μg/L with the correlation coefficients(r2) not less than 0.999 2. The limits of quantification(LOQs) were 0.002 mg/kg.The average recoveries at the fortified levels of 0.002,0.02,0.20 and 2.00 mg/kg were in the range of 79.9%-104% with the relative standard deviations of 0.94%-6.4%.With the advantages of rapidness,simplicity,high sensitivity and good reproducibility,the method is suitable for the determination of thiamethoxam,clothianidin,spirotetramat and their four metabolites residues in tomatoes.

QuEChERS;UPLC-MS/MS;pesticide residues;tomato

2017-07-24；

2017-08-21

2017年國(guó)家柑桔及熱帶作物產(chǎn)品質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估項(xiàng)目(GJFP2017004)；國(guó)家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)(柑桔)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)項(xiàng)目 (CARS-26)

*

焦必寧，研究員，研究方向：果蔬貯藏加工技術(shù)與質(zhì)量安全，Tel:023-68349046，E-mail:jiaobining@citrus.cn

王成秋，副研究員，研究方向：食品安全與質(zhì)量控制，Tel:023-68349046，E-mail:citruszhx@163.com

10.3969/j.issn.1004-4957.2017.12.003

O657.63；O657.7

A

1004-4957(2017)12-1431-08