HPLC法測(cè)定胃痛丸中延胡索乙素的含量

雷 楊，韓 宇

（1.通化市食品藥品檢驗(yàn)所，吉林 通化 134000；2.吉林市食品藥品檢驗(yàn)所，吉林 吉林 132000）

HPLC法測(cè)定胃痛丸中延胡索乙素的含量

雷 楊1，韓 宇2

（1.通化市食品藥品檢驗(yàn)所，吉林 通化 134000；2.吉林市食品藥品檢驗(yàn)所，吉林 吉林 132000）

胃痛丸由沉香、丁香、延胡索（醋炒）、姜半夏、當(dāng)歸等18味中藥材組成，延胡索為主藥。對(duì)治療經(jīng)閉痛經(jīng)，產(chǎn)后瘀阻，跌撲腫痛有較好療效。

胃痛寧丸；延胡索乙素；反向高效液相色譜法

1 資料與方法

1.1 儀器、試劑與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

紫外-可見分光光度計(jì)：日本島津UV-1700；高效液相色譜儀：戴安Ultimate3000、日立；對(duì)照品為延胡索乙素，對(duì)照品、試劑均在有資質(zhì)的經(jīng)銷商處購(gòu)買。

1.2 方法

1.2.1 儀器、試劑與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

色譜柱：C18（4.6×250 mm，5 μm）；流動(dòng)相：甲醇-0.1%磷酸溶液（三乙胺調(diào)pH值至6.0）（55：45）；檢測(cè)波長(zhǎng)、280 nm。

1.2.2 對(duì)照品溶液的制備

取延胡索乙素對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1 mL含46 μg的溶液，即得。

1.2.3 供試品溶液的制備

取本品研細(xì)，取約1.0 g，精密稱定，置平底燒瓶中，精密加入濃氨試液-甲醇（1：20）混合溶液50 mL，稱定重量，冷浸1小時(shí)后加熱回流1小時(shí)，放冷，再稱定重量，用濃氨試液-甲醇（1：20）混合溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過。精密量取續(xù)濾液25 mL，蒸干，殘?jiān)蛹状既芙?，轉(zhuǎn)移至5 mL量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得見圖1、圖2。

圖1

圖2

2 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

2.1 測(cè)定波長(zhǎng)選擇

取延胡索乙素對(duì)照品甲醇溶液，經(jīng)UV-1700型紫外-可見分光光度計(jì)在250～300 nm范圍內(nèi)測(cè)定延胡索乙素在280.3 nm的波長(zhǎng)處有最大吸收

2.2 流動(dòng)相的選擇

分別采用乙腈-0.1%冰醋酸溶液（60:40）、甲醇-0.1%冰醋酸溶液（55:45）、甲醇-0.1%磷酸溶液（三乙胺調(diào)pH值至6.0）（55：45）為流動(dòng)相，結(jié)果以甲醇-0.1%磷酸溶液（三乙胺調(diào)pH值至6.0）（55：45）為流動(dòng)相，保留時(shí)間適宜且色譜峰對(duì)稱性好，主峰與雜質(zhì)峰分離度大。溶劑在主峰保留時(shí)間處無(wú)色譜峰，不存在干擾。用二極管陣列檢測(cè)器對(duì)色譜峰純度進(jìn)行檢測(cè)，確定供試品中延胡索乙素為單一成分，故擬定標(biāo)準(zhǔn)選擇甲醇-0.1%磷酸溶液（7:93）為流動(dòng)相。

2.3 提取方法考察

供試品溶液提取溶劑的確定：

（1）方法為上述供試品提取方法

（2）取供試品1.0 g，加氨試液2 mL使?jié)駶?rùn)，精密加甲醇50 mL，稱定重量，加熱回流2小時(shí)，防冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足損失的重量，搖勻，取續(xù)濾液作為供試品溶液。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示方法1提取完全，分離效果好。

2.4 提取時(shí)間考察

正文中提取時(shí)間為冷浸1小時(shí)后加熱回流1小時(shí)，同時(shí)我們也考察了冷浸2小時(shí)，加熱回流2小時(shí)，結(jié)果是正文中提取的雜質(zhì)少，主峰含量高，故選冷浸1小時(shí)后加熱回流1小時(shí)為該方法的提取時(shí)間。

3 方法學(xué)驗(yàn)證

3.1 線性

結(jié)果表明延胡索乙素在0.12519～1.3687 mg，線性關(guān)系良好。

3.2 精密度

數(shù)據(jù)顯示，本方法精密度良好。

3.3 重復(fù)性試驗(yàn)

取同一供試品，依正文方法獨(dú)立測(cè)定6份，數(shù)據(jù)顯示本法重復(fù)良好。

3.4 準(zhǔn)確度試驗(yàn)

取重復(fù)性試驗(yàn)同批次樣品（含量：0.058 mg/g）6份，每份取約0.5 g，精密稱定，再分別加入延胡索乙素對(duì)照品適量，按標(biāo)準(zhǔn)正文含量測(cè)定項(xiàng)下方法測(cè)定，計(jì)算回收率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本方法回收率良好，該方法適合本品的含量測(cè)定。

3.5 穩(wěn)定性考察

精密吸取同一供試品溶液5 μL，分別在0，2，8，12，16，22 h進(jìn)樣，計(jì)算峰面積的RSD值。結(jié)果表明供試品溶液在22h內(nèi)穩(wěn)定。

4 討 論

我們對(duì)取樣量、提取方法、流動(dòng)相類型、流動(dòng)相比例、提取溶劑、提取時(shí)間都進(jìn)行了細(xì)致的考察，結(jié)果是按上述條件分離效果好，提取完全，含量高，方法相對(duì)簡(jiǎn)便。同時(shí)也考察了陰性和溶劑，確定無(wú)干擾。

[1] 馬月光,岳顯可,曹 崗,等.不同產(chǎn)地延胡索飲片炮制前后有效成分含量的測(cè)定[J].中藥材,2013,36(11):1754-1756.

[2] 魯春梅,張春森,姜立勇.延胡索化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展[J].中國(guó)現(xiàn)代藥物應(yīng)用,2011,5(15):126-127.

[3] 賀 凱,高建莉,趙光樹.延胡索化學(xué)成分、藥理作用及質(zhì)量控制研究進(jìn)展[J].中草藥,2010,38(12):1909.

R286

B

ISSN.2095-8242.2017.069.13475.02

本文編輯：趙小龍