林 琳,孫學亮,邢克智,郭永軍,陳成勛,于學權(quán),王慶奎
( 1. 天津農(nóng)學院 水產(chǎn)學院,天津 300384; 2. 天津市水產(chǎn)生態(tài)及養(yǎng)殖重點實驗室,天津 300384; 3. 天津市海發(fā)珍品實業(yè)發(fā)展有限公司,天津 300452 )
養(yǎng)殖密度對豹紋鰓棘鱸生長和血液生化指標的影響
林 琳1,2,孫學亮1,2,邢克智1,2,郭永軍1,2,陳成勛1,2,于學權(quán)3,王慶奎1,2
( 1. 天津農(nóng)學院 水產(chǎn)學院,天津 300384; 2. 天津市水產(chǎn)生態(tài)及養(yǎng)殖重點實驗室,天津 300384; 3. 天津市海發(fā)珍品實業(yè)發(fā)展有限公司,天津 300452 )
為探究養(yǎng)殖密度對濕體質(zhì)量為(132.75±0.51) g的豹紋鰓棘鱸生長和血液生化指標的影響,設(shè)計了低(9.34 kg/m3)、中(19.23 kg/m3)、高(37.22 kg/m3)3個養(yǎng)殖密度,每個密度設(shè)3個重復,連續(xù)飽食投喂56 d后取樣,測定相關(guān)指標。試驗結(jié)果表明,37.22 kg/m3組的終末體質(zhì)量、平均質(zhì)量增加率和特定生長率均顯著低于其他兩組(P<0.05),而9.34 kg/m3、19.23 kg/m3組間差異不顯著(P>0.05);養(yǎng)殖密度對飼料系數(shù)、攝食率、瞬時生長率和熱量單位生長系數(shù)無顯著影響(P>0.05)。血清總超氧化物歧化酶的活力在37.22 kg/m3組最高,19.23 kg/m3組最低,且各密度組間差異顯著(P<0.05);37.22 kg/m3組血清總抗氧化能力顯著低于其他兩組(P<0.05),19.23 kg/m3組高于9.34 kg/m3組,但差異不顯著(P>0.05);37.22 kg/m3組血清丙二醛顯著高于其他兩組(P<0.05),而其他兩組間差異不顯著(P>0.05);乳酸脫氫酶隨養(yǎng)殖密度的升高顯著增加,且各密度組間差異顯著(P<0.05);37.22 kg/m3組谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶顯著高于其他兩組(P<0.05),而37.22 kg/m3組的溶菌酶活性顯著低于其他兩組(P<0.05),其他兩組間差異不顯著(P>0.05);養(yǎng)殖密度對血漿葡萄糖、膽固醇、C反應蛋白、總蛋白、乳酸無顯著影響。
養(yǎng)殖密度;豹紋鰓棘鱸;生長;血液生化指標
豹紋鰓棘鱸(Plectropomusleopardus),隸屬鱸形目、科、鰓棘鱸屬,俗稱東星斑,主要分布在西太平洋至印度洋海區(qū),我國海南東岸和南部海區(qū)有少量分布[1]。豹紋鰓棘鱸體色鮮紅,肉味鮮美,營養(yǎng)豐富,含有二十幾種人體所需的微量元素,具有高蛋白,低脂肪,低膽固醇等優(yōu)點[2],具有很高的經(jīng)濟價值。目前市場上銷售的豹紋鰓棘鱸絕大部分為野生魚,該魚的人工養(yǎng)殖尚處于起步階段。目前國內(nèi)對豹紋鰓棘鱸的研究報道見于胚胎及仔稚幼魚發(fā)育[3],鹽度、光照度和溫度對其受精卵孵化和仔魚成活率的影響[4],工廠化養(yǎng)殖試驗[5],主要營養(yǎng)素源對工業(yè)化養(yǎng)殖豹紋鰓棘鱸生長、體色和消化吸收的影響[6],投喂不同飼料對幼魚生長效果的影響[7]等方面;國外僅見豹紋鰓棘鱸幼魚游泳和定居行為[8]、野生種群生物學[9]的報道。目前,人工養(yǎng)殖條件下豹紋鰓棘鱸生長緩慢、成活率低、體色暗淡,養(yǎng)殖難度較大。與同亞科的石斑魚屬(Epinephelus)養(yǎng)殖魚類相比,豹紋鰓棘鱸不適于較高的養(yǎng)殖密度,但其適宜的養(yǎng)殖密度,目前尚未見報道。
在魚類集約化養(yǎng)殖過程中,較高的養(yǎng)殖密度雖然有利于提高單位水體魚產(chǎn)量,但也會導致養(yǎng)殖魚類產(chǎn)生應激脅迫,生長減緩,飼料利用率下降,個體間生長差異增大[10],更易患病[11];較低的養(yǎng)殖密度雖然有利于養(yǎng)殖對象的生長和健康,但單位水體魚產(chǎn)量較低。因此,采用適宜的養(yǎng)殖密度既能保障養(yǎng)殖魚類的健康,又能提高單位水體魚產(chǎn)量。本試驗初步研究高、中、低3種養(yǎng)殖密度對豹紋鰓棘鱸生長和血液生化指標的影響,探索豹紋鰓棘鱸在工廠化養(yǎng)殖條件下的適宜養(yǎng)殖密度,為其集約化健康養(yǎng)殖提供參考。
試驗魚210尾,濕體質(zhì)量(132.75±0.51) g,體長(18.69±0.24) cm。
將試驗魚隨機分配到9個水體容積為138 L的水族箱(80 cm×55 cm×40.5 cm)中,高密度組40尾/箱(37.22 kg/m3),中密度組20尾/箱(19.23 kg/m3),低密度組10尾/箱(9.34 kg/m3),每個密度設(shè)3個重復。日飽食投喂2次,連續(xù)飽食投喂56 d后取樣,測定生長和血液生化指標。
試驗魚先在試驗水族箱內(nèi)馴化14 d,待其正常攝食后開始試驗。試驗期間每日7:30和19:30投喂天津市海發(fā)珍品實業(yè)發(fā)展有限公司生產(chǎn)的海水魚配合飼料,投喂30 min后吸出殘餌,計算攝食量。試驗用海水為豹紋鰓棘鱸養(yǎng)殖車間的海水,海水通過管道流入水族箱中,通過溢水口溢出箱外。每個水族箱內(nèi)放置一個散氣石,連續(xù)充氣。試驗期間海水鹽度27.7~29.4,水溫(28.8±0.1) ℃,溶解氧(6.32±0.01) mg/L,氨氮0.023~0.146 mg/L,亞硝酸鹽0.005~0.025 mg/L。
分別在試驗開始和試驗結(jié)束時測量每尾魚的體質(zhì)量。試驗結(jié)束后,用間氨基苯甲酸乙酯甲磺酸鹽麻醉(100 mg/L)后,尾靜脈采血,肝素鈉抗凝。4 ℃,4000 r/min離心15 min,取血漿,-80 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>
1.5.1 計算公式
特定生長率/%·d-1=[lnmt-lnm0]/t×100%
平均質(zhì)量增加率/%=(mt-m0)/m0×100%
攝食率/%=mf/[0.5×(mt+m0)]t×100%
飼料系數(shù)=mf/(mt-m0)
瞬時生長率/%=mt=m0(1+α/100)t,α = (lnmt-lnm0)×100/t
公式中,mt為試驗結(jié)束體質(zhì)量(g),m0為試驗開始體質(zhì)量(g),t為試驗天數(shù),mf為攝食量(g),T為試驗期間平均水溫(℃)。
1.5.2 血液生化指標
血漿中總超氧化物歧化酶、總抗氧化能力、丙二醛、溶菌酶、C反應蛋白、總蛋白、乳酸、乳酸脫氫酶,采用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒測定。血糖、膽固醇、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶測定采用中生北控生物科技股份有限公司所生產(chǎn)的測試盒測定。
數(shù)據(jù)用SPSS 17.0軟件進行方差分析,差異顯著(P<0.05)的用Duncan′s法作多重比較。表中數(shù)據(jù)用平均值±標準差表示。
試驗結(jié)束時,37.22 kg/m3組的終末體質(zhì)量、平均質(zhì)量增加率、特定生長率均顯著低于其他兩組;19.23 kg/m3組的上述指標稍高于9.34 kg/m3組,但差異不顯著(P>0.05);隨著密度的增加,各組飼料系數(shù)也隨之增加,但差異不顯著(P>0.05);各組間的攝食率、瞬時生長率和熱量單位生長系數(shù)差異不顯著(P>0.05)(表1)。
表1 養(yǎng)殖密度對豹紋鰓棘鱸生長的影響
注:同一行數(shù)據(jù)標有不同字母的,表示差異顯著(P<0.05).下同.
總超氧化物歧化酶活力在各養(yǎng)殖密度組間差異顯著(P<0.05),37.22 kg/m3組高于其他兩組;37.22 kg/m3組總抗氧化能力顯著低于其他兩組(P<0.05);而37.22 kg/m3組丙二醛含量顯著高于其他兩組(P<0.05),而9.34 kg/m3、19.23 kg/m3組差異不顯著(P>0.05)(表2)。
表2 養(yǎng)殖密度對豹紋鰓棘鱸抗氧化指標的影響
乳酸脫氫酶活性隨養(yǎng)殖密度的升高而增加,且各組間差異顯著(P<0.05);37.22 kg/m3組谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶活力顯著高于其他兩組(P<0.05),9.34 kg/m3、19.23 kg/m3組差異不顯著(P>0.05);37.22 kg/m3組的溶菌酶活性顯著低于其他兩組(P<0.05);葡萄糖、膽固醇、C反應蛋白、總蛋白、乳酸在各密度組間差異不顯著(P>0.05)(表3)。
表3 養(yǎng)殖密度對豹紋鰓棘鱸血液生化指標的影響
養(yǎng)殖密度是影響魚類生長的一個重要因子。一般來說,低養(yǎng)殖密度能促進水產(chǎn)動物的生長,而過高的養(yǎng)殖密度則會對其造成脅迫。在高養(yǎng)殖密度下,低溶解氧、高氨氮和亞硝酸鹽、對食物和生活空間的競爭等,都會對水產(chǎn)動物的生長和代謝產(chǎn)生負面影響。眼斑星麗魚(Astronotusocellatus)幼魚質(zhì)量增加率、體長增加率、特定生長率和質(zhì)量平均日增長均隨養(yǎng)殖密度的增加而降低,高養(yǎng)殖密度組(400尾/m2,200尾/m2)個體生長速度離散度明顯加大[12]。施氏鱘(Acipenserschrenckii)在養(yǎng)殖密度為1.347 kg/m2和2.469 kg/m2時生長效率、特定生長率和質(zhì)量日增長顯著降低,且各密度組生長差異顯著[13]。王永波等[5]報道,在工廠化養(yǎng)殖豹紋鰓棘鱸過程中,當水溫適宜、溶解氧充足、鹽度適宜、水質(zhì)清澈、換水率達50%~200%時,豹紋鰓棘鱸放養(yǎng)密度可按10~20 kg/m3計算,在魚體質(zhì)量為150 g時,其參考的放養(yǎng)密度為9~15 kg/m3。本試驗中,37.22 kg/m3組的終末體質(zhì)量、平均質(zhì)量增加率和特定生長率均顯著低于9.34 kg/m3、19.23 kg/m3組,而9.34 kg/m3、19.23 kg/m3組間差異不顯著??紤]到養(yǎng)殖成本,豹紋鰓棘鱸養(yǎng)殖密度以19.23 kg/m3為宜,這與上述報道接近。黃姑魚(Nibeaalbiflora)在1.49、3.0、4.8 kg/m3和5.81 kg/m34個密度下養(yǎng)殖30 d,4.8 kg/m3和5.81 kg/m3養(yǎng)殖密度的飼料系數(shù)明顯升高,分別為1.12和1.26[14]。本試驗中各養(yǎng)殖密度組攝食率差異不顯著(P>0.05),飼料系數(shù)隨養(yǎng)殖密度的增加而增加,平均質(zhì)量增加率9.34 kg/m3、19.23 kg/m3組差異不顯著,但均顯著高于37.22 kg/m3組,顯示高密度(37.22 kg/m3)的養(yǎng)殖條件導致豹紋鰓棘鱸生長緩慢。
抗氧化指標的高低能反映魚體的健康狀況??偪寡趸芰δ芮宄龣C體代謝過程中產(chǎn)生的過多的活性氧自由基,保護機體免受自由基氧化損傷,因而總抗氧化能力與機體健康程度密切相關(guān)[15]。機體中的各種抗氧化大分子、抗氧化小分子和抗氧化酶的總水平,即體現(xiàn)了總抗氧化能力。丙二醛是多烯不飽和脂肪酸被自由基氧化生成的脂質(zhì)過氧化代謝產(chǎn)物,其含量的多少可間接反映細胞膜的氧化損傷程度。養(yǎng)殖密度對魚類總抗氧化能力的影響,目前尚未見報道。本試驗中,37.22 kg/m3組總抗氧化能力顯著低于9.34 kg/m3、19.23 kg/m3組,而丙二醛含量顯著高于9.34 kg/m3、19.23 kg/m3組;9.34 kg/m3、19.23 kg/m3組總抗氧化能力和丙二醛含量差異不顯著。這表明,高養(yǎng)殖密度(37.22 kg/m3)導致豹紋鰓棘鱸總抗氧化能力顯著降低,機體遭受明顯的氧化損傷;而中、低養(yǎng)殖密度(19.23 kg/m3、9.34 kg/m3)不會對豹紋鰓棘鱸總抗氧化能力產(chǎn)生顯著影響,機體氧化損傷程度較低。
超氧化物歧化酶能清除超氧陰離子自由基,保護細胞免受自由基損傷[16-17]。半滑舌鰨(Cynoglossussemilaevis)在高養(yǎng)殖密度(8.20 kg/m2)下,總超氧化物歧化酶顯著低于中(4.83 kg/m2)、低(2.32 kg/m2)養(yǎng)殖密度組[18]。本試驗中,各密度組間總超氧化物歧化酶活力差異顯著(P<0.05),且37.22 kg/m3試驗組顯著高于其他兩組,這與半滑舌鰨[18]的研究結(jié)果相反。
高養(yǎng)殖密度會導致魚類血液溶菌酶活力降低。如黃姑魚在5.81 kg/m3的養(yǎng)殖密度下,其血清溶菌酶活力顯著低于養(yǎng)殖密度為4.84、3.00、1.49 kg/m3的試驗魚[14]。8.20 kg/m2試驗組半滑舌鰨血漿溶菌酶活力顯著低于4.83 kg/m2、2.23 kg/m2組[18]。同樣,密度脅迫也會導致鯽魚(Carassiusauratus)血清溶菌酶活性顯著降低[19]。本試驗也發(fā)現(xiàn),37.22 kg/m3組豹紋鰓棘鱸血漿溶菌酶活性顯著低于9.34 kg/m3、19.23 kg/m3組,這與上述報道一致。
正常狀態(tài)下,機體中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶主要存在于肝臟細胞中,血清中含量很少,當細胞受到損傷時,二者由肝臟細胞擴散到血液,導致血清中這兩種酶的活性升高[20-21]。因此,檢測血液中這兩種酶的活性,可用來判斷肝細胞是否受到損傷[22-23]。本試驗中,37.22 kg/m3組豹紋鰓棘鱸血漿中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性顯著升高,9.34 kg/m3、19.23 kg/m3組中兩種酶活力差異不顯著,表明高養(yǎng)殖密度加劇了豹紋鰓棘鱸肝細胞損傷。
乳酸是機體劇烈運動時肌肉無氧呼吸酵解的代謝產(chǎn)物,乳酸脫氫酶將乳酸催化生成丙酮酸,丙酮酸可參與糖異生作用生成葡萄糖[24]。在此過程中,乳酸脫氫酶的活性顯著提高。點帶石斑魚(Epinephelusmalabaricus) 在1.1、2.1、3.2、4.2 kg/m34個養(yǎng)殖密度下飼養(yǎng)42 d,后2個養(yǎng)殖密度試驗魚肝胰臟中的乳酸脫氫酶顯著升高[25]。本試驗發(fā)現(xiàn),隨養(yǎng)殖密度增加,試驗魚血漿乳酸脫氫酶活力顯著升高,但各組間乳酸含量卻差異不顯著,這可能是19.23 kg/m3、37.22 kg/m3組較高的乳酸脫氫酶活性將一部分乳酸催化生成丙酮酸所致。在豹紋鰓棘鱸飼養(yǎng)過程中也發(fā)現(xiàn),隨著養(yǎng)殖密度的增大,其游動頻率和速度也增加。
高養(yǎng)殖密度(37.22 kg/m3)導致豹紋鰓棘鱸生長性能顯著下降,血液總抗氧化能力、溶菌酶活力顯著降低,丙二醛含量、轉(zhuǎn)氨酶和乳酸脫氫酶活力顯著升高。中(19.23 kg/m3)、低(9.34 kg/m3)養(yǎng)殖密度對豹紋鰓棘鱸生長、血液總抗氧化活力、丙二醛含量、轉(zhuǎn)氨酶和溶菌酶無顯著影響。建議豹紋鰓棘鱸的養(yǎng)殖密度為19.23 kg/m3。
致謝
在本試驗的養(yǎng)殖過程中,天津市海發(fā)珍品實業(yè)發(fā)展有限公司董事長張樹森先生、楊永??偨?jīng)理、朋禮泉經(jīng)理、王禎輝副經(jīng)理、馮建華主任給予了大力支持,在此一并表示衷心感激。
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EffectsofStockingDensityonGrowthandBloodBiochemicalParametersinPlectropomusleopardus
LIN Lin1, 2, SUN Xueliang1, 2, XING Kezhi1, 2, GUO Yongjun1, 2, CHEN Chengxun1, 2,YU Xuequan3, WANG Qingkui1, 2
( 1. College of Fisheries, Tianjin Agricultural University, Tianjin 300384, China; 2. Tianjin Key Laboratory of Aqua-ecology and Aquaculture, Tianjin 300384, China; 3. Tianjin Haifa Seafood Industrial Development Co., Ltd,Tianjin 300452, China )
A 56-day experiment was performed at three stocking densities of low density (9.34 kg/m3, Group L), medium density (19.23 kg/m3, Group M) and high density (37.22 kg/m3, Group H) with triplication to evaluate the effects of stocking density on the growth, serum biochemical parameters ofPlectropomusleoparduswith initial body weight of (132.75±0.51) g. Results showed that the final body weight, percent weight gain and specific growth rate in Group H were significantly lower than those in Group M and Group L, while no significant difference were observed between Group M and Group L. No significant difference was observed in food conversion ratio, food intake, instantaneous growth rate and thermal-unit growth coefficient among three groups. Significant difference was observed on superoxide dismutase activity, with the maximum in Group H and the minimum in Group M. The total antioxidant capacity in Group H was significantly lower than that in Groups M and L. There was significantly higher malondialdehyde level in Group H than that in Groups M and L, without significant difference between Group M and Group L. The lactic dehydrogenase activity increased with the augment of stocking density, with significant difference among the three groups. The glutamic-pyruvic transaminase level and glutamic-oxaloacetic transaminase level in Group H were statistically higher than those in Group M and Gruop L, while lysozyme activity was significantly lower than those in Group M and Group L. No significant difference was observed on levels of plasma glucose, cholesterol, C-reactive protein, total protein, and lactic acid among the three groups.
stocking density;Plectropomusleopardus; growth; blood biochemical parameter
10.16378/j.cnki.1003-1111.2017.01.014
S965.399
A
1003-1111(2017)01-0083-05
2016-03-08;
2016-05-23.
國家自然科學基金(面上)項目(31270456);國家農(nóng)業(yè)科技成果轉(zhuǎn)化項目(2014GB2A100528);天津市科技支撐計劃項目(12ZCDZNC05900,13ZCZDNC00700);天津市高等學校科技發(fā)展基金計劃項目(20120625).
林琳(1990—),女,碩士研究生;研究方向:水產(chǎn)增養(yǎng)殖學. E-mail:919890544@qq.com.通訊作者:王慶奎(1978—),男,副教授;研究方向:水產(chǎn)動物增養(yǎng)殖學. E-mail: wangqk@tjau.edu.cn.